| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ATR kinase
Camonsertib (RP-3500) is a potent and selective inhibitor of ataxia telangiectasia and Rad3-related (ATR) kinase. Biochemical IC50 for ATR/ATRIP is 1.0 ± 0.40 nmol/L, and Ki is 0.022 ± 0.002 nmol/L. It exhibits 30-fold selectivity over mTOR (IC50 = 120 nmol/L), >2,000-fold selectivity over ATM and DNA-PK (IC50 >10,000 nmol/L and >10,000 nmol/L, respectively), and >2,000-fold selectivity over PI3Kα (IC50 = 780 nmol/L) in cell-based assays [1]. Camonsertib targets ATR (ataxia telangiectasia and Rad3-related) kinase, a key regulator of the DNA damage response that is activated by replication stress and DNA damage. ATR phosphorylates downstream targets including CHK1, which leads to cell cycle arrest and DNA repair. By inhibiting ATR with high potency (IC50 = 1 nM), Camonsertib disrupts the DNA damage response and induces synthetic lethality in cancer cells with high replication stress. The compound's high selectivity for ATR over other kinases reduces off-target effects. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Camonsertib（RP-3500；1 μM；1-24 小时）可抑制 CHK1 (Ser345) 的磷酸化 1 至 3 小时 [1]。基于 LoVo 细胞的 Western Blot 分析，Camonsertib 可抑制吉西他滨刺激的 ATR 对其底物 pCHK1 (Ser345) 的磷酸化 [1]。在基于细胞的实验中，Camonsertib 可抑制吉西他滨刺激的 ATR 对 LoVo 细胞中 CHK1 (Ser345) 的磷酸化，IC50 为 0.33 nmol/L。在ATM或BRCA1/2通路缺陷的一系列细胞系中，该药物表现出强大的抗增殖活性，在5天的CellTiter-Glo检测中，IC50值范围为8至64 nmol/L [1]。
用1 μmol/L Camonsertib处理LoVo和CW-2细胞后，Western blot分析显示pCHK1 (Ser345)在1-3小时内受到抑制，随后在4小时后重新磷酸化，并激活DNA-PKcs、KAP1和H2AX，表明DNA双链断裂的诱导[1]。 在RPE1-hTERT TP53KO ATM-WT和ATM-KO细胞中，暴露于30 nmol/L Camonsertib48-72小时后，两种细胞系中γH2AX染色均有相似程度的增加；洗脱后，ATM-WT 细胞可在 24 小时内恢复，而 ATM-KO 细胞的 DNA 损伤至少持续 48 小时 [1]。 在 SUM149PT（BRCA1 突变）细胞中进行的协同作用研究表明，与序贯给药相比，同时给予Camonsertib和奥拉帕尼 3 天可产生更大的协同作用（ZIP 协同评分 >10）和更强的细胞杀伤作用 [1]。 体外实验表明，Camonsertib 对 ATR 激酶的抑制作用在生化实验中 IC50 为 1.0 nM，在细胞实验中 IC50 为 0.33 nM。它对 ATR 的选择性比 mTOR（IC50：120 nM）高 30 倍，对 ATM、DNA-PK 和 PI3Kα 激酶的选择性高 2000 倍以上。 Camonsertib (1 μM; 1-24 小时) 可抑制 CHK1 (Ser345) 磷酸化 1 至 3 小时，并抑制吉西他滨刺激的 ATR 对其底物 pCHK1 (Ser345) 在 LoVo 细胞中的磷酸化。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Camonsertib（RP-3500；3、7、15 mg/kg；侧向注射；每日一次，持续18天）在LoVo异种移植瘤中产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制作用，最小有效剂量（MED）为7 mg/kg [Camonsertib（5、10 mg/kg；血管内注射；每日一次）在CW-2漂浮异种移植瘤模型中产生具有统计学意义的肿瘤生长抑制作用[1]。据称，Camonsertib（7 mg/kg；持续7天）可使LoVo肿瘤小鼠的KAP1和DNA-PKcs磷酸化水平分别提高8.1倍和2.7倍[1]。高剂量卡蒙塞替尼（Camonsertib）治疗肿瘤，方案为用药3天/停药4天（30 mg/kg）和用药5天/停药2天（25 mg/kg），与连续给药相比，显示出更大的意外抗肿瘤作用。低剂量制剂（10 mg/kg）连续给药14天[1]。与PARP抑制剂奥拉帕尼（Olaparib，80 mg/kg；两种药物均在第1-3天用药/停药4天）联合用药，或序贯给药（PARP抑制剂用药3天，然后RP-3500用药3天，再用药1天）相比，序贯给药方案可产生更大的抗肿瘤作用。相反，在影响耐受性时，给药方案可产生更大的抗肿瘤作用[1]。在LoVo结直肠异种移植瘤小鼠中，每日一次口服卡蒙塞替尼，持续17天，可产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制，最小有效剂量（MED）为7 mg/kg。在 15 mg/kg 剂量下，一只小鼠因体重下降而被处死，由此确定最大耐受剂量 (MTD) 为 10 mg/kg，每日一次，持续给药 [1]。
在 CW-2 结肠异种移植瘤模型中，每日一次 5 和 10 mg/kg 的 Camonsertib 可显著抑制肿瘤生长 [1]。 在 ATM 双等位基因缺失的胃癌患者来源异种移植瘤 (PDX) 模型中，每日一次 5 和 10 mg/kg 的 Camonsertib 可诱导肿瘤完全消退，且不引起体重下降 [1]。 在 LoVo 肿瘤中的药效学分析显示，pCHK1 的抑制呈剂量依赖性，体内肿瘤 IC80 估计值为 18.6 nmol/L（85% CI：7.23–145 nmol/L，基于游离血浆浓度）。在最小有效剂量 (5–7 mg/kg) 下，游离血浆浓度高于 IC80 可维持 10–12 小时，足以达到疗效 [1]。 间歇给药方案（例如，用药 3 天/停药 4 天）允许使用更高的剂量（高达 30 mg/kg），与每日连续给药相比，可提高疗效并减少贫血。在Granta-519异种移植瘤模型中，采用3天用药/4天停药方案，以30 mg/kg的剂量给药，比持续低剂量给药更能有效抑制肿瘤生长，且红细胞消耗更少[1]。 与PARP抑制剂（奥拉帕尼或尼拉帕尼）联合用药的研究表明，低剂量卡蒙塞替（例如15 mg/kg）与PARP抑制剂间歇性联合给药（3天用药/4天停药）比序贯给药更有效、耐受性更好，且无显著的药物相互作用，并在停药期间保持网织红细胞再生[1]。 体内研究表明，卡蒙塞替具有口服生物利用度，并表现出强效的抗肿瘤作用。该化合物通过抑制ATR，诱导高复制应激癌细胞（例如ATM、ARID1A或其他DNA修复基因突变的癌细胞）发生合成致死。然而，现有文献中尚未详细描述具体的体内疗效数据。 Camonsertib 正在研发用于癌症治疗。 |
| 酶活实验 |
ATR 生化激酶活性测定采用从哺乳动物细胞纯化的重组标记 ATR/ATRIP 蛋白进行。该测定使用 GST 标记的 p53 底物和 3 μmol/L ATP，缓冲液中含有 HEPES、Brij、EGTA 和甘油。磷酸化底物通过在 EDTA/Tris/BSA 缓冲液中与抗磷酸化 p53 (Ser15) 抗体、供体磁珠和受体磁珠孵育 4-5 小时进行检测。磷酸化程度通过酶标仪进行荧光定量（激发波长 680 nm，发射波长 520-620 nm）。IC50 值由剂量反应曲线确定 [1]。
对于体外激酶活性测定，将重组 ATR 蛋白（与 ATRIP 形成复合物）与肽底物和 ATP 在激酶测定缓冲液中孵育。加入不同浓度（0.001-1000 nM）的测试化合物。激酶活性可通过放射性ATP掺入法或发光ADP检测法测定。IC50值通过拟合剂量反应曲线计算。选择性评估采用一组相关的激酶。 |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析
测试浓度： 1 μM 孵育时间： 1、2、4、6、8、16、24 小时，IC50 为 0.33 nM[1]。每小时 实验结果： CHK1(Ser345) 磷酸化在 1 至 3 小时内受到抑制。从 4 小时开始，由于 DNA-PKcs 及其底物 KAP1 和 H2AX 在处理过的细胞中被激活，CHK1(Ser345) 重新磷酸化。 使用 CellTiter-Glo 试剂盒检测细胞活力。将细胞以最佳密度接种于 96 孔板中，并用化合物处理 120 小时。使用酶标仪读取发光值，并将细胞活力标准化至未处理的对照组。使用 SynergyFinder 和零相互作用效力 (ZIP) 模型分析 PARP 抑制剂的协同作用 [1]。 免疫印迹：将细胞或肿瘤碎片在含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的缓冲液中裂解。裂解液经 SDS-PAGE 电泳分离后转移至 PVDF 膜，并用针对 pCHK1 (Ser345)、pKAP1 (Ser824)、KAP1、ATM、pDNA-PKcs、CHK1、γH2AX 和内参的一抗进行检测。使用 HRP 标记的二抗和化学发光法检测信号 [1]。 γH2AX 免疫荧光：将处理后的细胞用 4% 多聚甲醛固定，用 Triton X-100 透化，封闭，然后与抗 γH2AX 抗体孵育，随后与 Alexa Fluor 488 标记的二抗和 DAPI 孵育。使用 Operetta 高内涵显微镜采集图像，并使用 Harmony 软件分析以量化核 γH2AX 强度 [1]。 对于基于细胞的检测，将癌细胞系（例如 LoVo 结直肠癌细胞）用浓度范围为 0.01-10 µM 的 Camonsertib 处理 1-24 小时。通过蛋白质印迹法检测 CHK1 (Ser345) 的磷酸化水平来评估 ATR 活性。使用 CellTiter-Glo 或 MTT 法检测细胞活力和增殖。可以进行与 DNA 损伤剂（例如吉西他滨）的联合研究，以评估增敏效应。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 携带 LoVo 异种移植瘤的雌性小鼠（6-8 周龄）[1]
剂量： 3、7、15 mg/kg（0.5% 甲基纤维素/0.02% SDS 载体） 给药途径： 口服；每日一次，持续 18 天 实验结果： 产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制，最小有效剂量 (MED) 为 7 mg/kg。最大耐受剂量 (MTD) 为 10 mg/kg，每日一次，持续给药。 对于异种移植瘤研究，将 5×10⁶ 个细胞（或用于 PDX 的肿瘤碎片）皮下植入雌性小鼠（6-8 周龄；CB17 SCID、NOD/SCID 或 BALB/c 裸鼠）体内，培养基：Matrigel 的比例为 1:1。当肿瘤体积达到 100-200 mm³ 时，将小鼠随机分组，并口服给予溶于 0.5% 甲基纤维素/0.02% SDS 的卡蒙塞替尼 (Camonsertib)。给药方案包括每日连续给药或间歇给药（例如，每周给药 2、3 或 5 天，停药/用药交替）。每周使用游标卡尺测量三次肿瘤体积，并按公式 0.52 × 长 × 宽² 计算。监测体重和临床症状以评估耐受性 [1]。 在药代动力学/药效学研究中，分别于给药后 0.5、1、3、8 和 24 小时采集全血，用柠檬酸盐缓冲液稀释，分离血浆。将肿瘤样本速冻，并通过免疫印迹法分析 pCHK1、pKAP1 和 pDNA-PKcs 的表达。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定血浆中卡蒙塞替尼 (Camonsertib) 的浓度 [1]。血液学：在研究终点，通过心脏穿刺采集全血至 EDTA 抗凝管中，并使用血液分析仪分析红细胞 (RBC) 和网织红细胞计数 [1]。在体内疗效研究中，将肿瘤异种移植瘤（例如 ATM 缺陷或高复制应激的肿瘤）植入免疫缺陷小鼠体内。当肿瘤达到预定大小时，将小鼠随机分组，并根据药代动力学研究确定的剂量，通过灌胃给予卡蒙塞替尼治疗。每周测量两次肿瘤体积。在研究终点，收集肿瘤组织进行 CHK1 磷酸化 Western blot 分析，以确认 ATR 抑制情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在携带LoVo肿瘤的小鼠中，口服卡蒙替尼可使血浆游离药物浓度呈剂量依赖性升高。在最低有效剂量（5-7 mg/kg，每日一次）下，血浆游离药物浓度在约10-12小时内保持在肿瘤IC80（18.6 nmol/L）以上，足以达到治疗效果。该化合物具有良好的口服生物利用度，其药代动力学特征与每日一次给药方案相符。目前尚未报道具体的半衰期或生物利用度百分比[1]。
卡蒙替尼具有良好的口服生物利用度。该化合物在DMSO中的溶解度为83 mg/mL（202.2 mM）。建议在-20°C下储存以保持长期稳定性。更详细的药代动力学参数，包括半衰期、Cmax、AUC和组织分布，可从相关文献中获取。该化合物仅供研究使用，不得用于人类或兽医用途。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠中，每日连续口服卡莫那替（剂量≥15 mg/kg）会导致体重减轻和贫血（红细胞计数降低和网织红细胞减少）。连续给药的最大耐受剂量（MTD）为每日一次10 mg/kg。间歇给药方案（例如，用药3天/停药4天）允许使用更高的剂量（最高达30 mg/kg），且耐受性更好；网织红细胞计数在4天的停药期内恢复，表明红系毒性是可逆的。在与PARP抑制剂（奥拉帕尼或尼拉帕尼）联合治疗的研究中，持续联合治疗耐受性差，但间歇性联合治疗（用药3天/停药4天）并降低剂量（例如，15 mg/kg卡蒙替尼+低剂量PARP抑制剂）耐受性良好，未出现明显的体重减轻或严重贫血，且基于药代动力学分析未观察到药物相互作用[1]。
卡蒙替尼的毒理学数据可从临床前和临床研究报告中获得。作为一种临床阶段化合物，它已进行过安全性评估。与ATR抑制剂相关的常见不良反应可能包括骨髓抑制和胃肠道紊乱。作为研究性化合物，应遵循标准安全预防措施。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
卡蒙塞替尼（Camonsertib）是一种吡唑并吡啶类化合物，其结构为1H-吡唑并[3,4-b]吡啶，在1、4和6位分别被1H-吡唑-3-基、(3-内型)-3-羟基-8-氧杂双环[3.2.1]辛烷-3-基和(3R)-3-甲基吗啉-4-基取代。它是一种高效且选择性的ATR激酶抑制剂（IC50 = 1 nM）。它可用作抗肿瘤药物和EC 2.7.11.1（非特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶）抑制剂。它属于吗啉基、咪唑基、吡唑并吡啶基、叔醇基和氧杂双环烷基类化合物。卡蒙塞替尼是一种口服的共济失调毛细血管扩张症和Rad3相关激酶（ATR）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，卡蒙塞替尼（Carmonesertib）选择性地靶向并抑制ATR活性，阻断下游丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶检查点激酶1 (CHK1)的磷酸化。这阻断了ATR介导的信号传导，从而抑制DNA损伤检查点的激活，破坏DNA损伤修复，并诱导肿瘤细胞凋亡。ATR是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在多种癌细胞类型中表达上调，在DNA修复、细胞周期进程和细胞存活中发挥着关键作用。它由DNA复制相关应激引起的DNA损伤激活。卡蒙塞替尼（RP-3500）是一种新型、高效、选择性、口服生物利用度高的ATR激酶抑制剂，目前正在晚期实体瘤患者中进行临床评估（NCT04497116）。其设计旨在利用合成致死效应治疗DNA损伤反应缺陷的肿瘤，例如ATM缺失或BRCA1/2突变。临床前研究表明，间歇给药（例如，用药3天/停药4天）可最大限度地提高疗效，同时最大限度地降低靶向血液毒性（贫血）。当与PARP抑制剂（奥拉帕尼、尼拉帕尼）联合采用间歇给药方案时，该化合物显示出显著的协同效应，与序贯给药相比，可获得更优的抗肿瘤反应。这些发现支持开展间歇性卡蒙塞替尼单药治疗以及与PARP抑制剂联合治疗的临床试验，以提高治疗指数[1]。
卡蒙塞替尼（RP-3500）是一种新型、高效、选择性的ATR激酶抑制剂，IC50为1.00 nM。它对ATR的选择性比mTOR高30倍，对ATM、DNA-PK和PI3Kα的选择性比mTOR高2000倍以上。卡蒙塞替尼可抑制CHK1磷酸化，并具有抗肿瘤作用。它是一种研究性化合物，尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C21H26N6O3
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|---|---|
| 分子量 |
410.47
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| 精确质量 |
410.206
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| 元素分析 |
C, 61.45; H, 6.38; N, 20.47; O, 11.69
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| CAS号 |
2417489-10-0
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| PubChem CID |
156487652
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.6
|
| tPSA |
101
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
628
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
OC1(CC2CCC(O2)C1)C1C=C(N2CCOCC2C)N=C2N(C3=NNC=C3)N=CC=12
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| InChi Key |
YIHHYCIYAIVQKX-YNOVCBQDSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H26N6O3/c1-13-12-29-7-6-26(13)19-8-17(21(28)9-14-2-3-15(10-21)30-14)16-11-23-27(20(16)24-19)18-4-5-22-25-18/h4-5,8,11,13-15,28H,2-3,6-7,9-10,12H2,1H3,(H,22,25)/t13-,14-,15+,21?/m1/s1
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| 化学名 |
(1R,5S)-3-[6-[(3R)-3-methylmorpholin-4-yl]-1-(1H-pyrazol-5-yl)pyrazolo[3,4-b]pyridin-4-yl]-8-oxabicyclo[3.2.1]octan-3-ol
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| 别名 |
Camonsertib; 2417489-10-0; RP-3500; RP3500; Rp 3500;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~121.81 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4362 mL | 12.1812 mL | 24.3623 mL | |
| 5 mM | 0.4872 mL | 2.4362 mL | 4.8725 mL | |
| 10 mM | 0.2436 mL | 1.2181 mL | 2.4362 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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