| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
β-Amyloid (31-35) is the functional cytotoxic domain of the Aβ peptide. β-Amyloid(31-35) promotes the phosphorylation of biotinylated Aβ(1-40), enhances CDK-1 activity, and inhibits the binding of Aβ to cyclin B1. β-Amyloid(31-35) is cytotoxic, and olomoucine suppresses this action in neurons of the differentiated human teratocarcinoma cell line Ntera 2/cl-D1 (NT-2) [1]. Recommendations for Beta-Amyloid Aggregation (This is our suggested approach; it should be adjusted to suit your particular need as it simply offers guidelines). 1. Solid Aβ peptide should be dissolved in cold hexafluoro-2-propanol (HFIP). To achieve monomerization and randomization of the structure, incubate the peptides for a minimum of one hour at room temperature. 2. The HFIP is removed by evaporation and the resultant peptide is kept as a thin film at -20 or -80 °C. 3. The resultant membrane should be dissolved in 5 mM of anhydrous DMSO, vortexed, and diluted with buffer (serum- and phenol-red-free media) to the proper concentration. 4. After that, let the solution age for 48 hours at 4–8°C. The materials were then centrifuged at 14,000g for 10 minutes at 4-8°C; soluble oligomers were in the supernatant. For the studies, the supernatant was diluted 10-200 times. Different approaches are used based on the final application.
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| 体外研究 (In Vitro) |
β-淀粉样蛋白 (31-35) 是 Aβ 肽的功能性细胞毒性结构域。 β-Amyloid(31-35) 促进生物素化 Aβ(1-40) 的磷酸化，增强 CDK-1 活性，并抑制 Aβ 与细胞周期蛋白 B1 的结合。 β-淀粉样蛋白 (31-35) 具有细胞毒性，olomoucine 可抑制分化的人畸胎癌细胞系 Ntera 2/cl-D1 (NT-2) 神经元中的这种作用 [1]。 β-淀粉样蛋白聚集的建议（这是我们建议的方法；应根据您的特定需求进行调整，因为它只是提供指导）。 1. 固体 Aβ 肽应溶解在冷的六氟-2-丙醇 (HFIP) 中。为了实现结构的单体化和随机化，请将肽在室温下孵育至少一小时。 2. 通过蒸发除去 HFIP，所得肽以薄膜形式保存在 -20 或 -80 °C 下。 3. 将所得膜溶解在 5 mM 无水 DMSO 中，涡旋，并用缓冲液（不含血清和酚红的培养基）稀释至适当的浓度。 4. 之后，让溶液在 4–8°C 下老化 48 小时。然后将材料在4-8℃下以14,000g离心10分钟；可溶性低聚物存在于上清液中。为了进行研究，将上清液稀释 10-200 倍。根据最终应用，使用不同的方法。
β-Amyloid 31-35 (20 µM) 能增加重组CDK-1/cyclin B1的活性，表现为促进³²P从ATP掺入生物素化的组蛋白H1肽底物。[1] β-Amyloid 31-35 (20 µM) 能增加与重组CDK-1孵育的组蛋白III-SS中的磷酸丝氨酸（pS）水平，以及增加与从神经元细胞免疫沉淀的CDK-1孵育的合成CDK-1底物（CSH 103）中的磷酸苏氨酸（pT）水平。[1] β-Amyloid 31-35 (20 µM) 在测试条件下，不影响重组或免疫沉淀的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK p42）或蛋白激酶C δ（PKCδ）的磷酸化活性。[1] β-Amyloid 31-35 (25 µM) 在孵育24小时后，对分化的人NT-2神经元表现出细胞毒性，通过MTT还原法检测。这种细胞毒性可通过共同孵育50 µM的CDK抑制剂olomoucine来防止。[1] |
| 酶活实验 |
Cyclin B1结合实验（ELISA）： 将酶联免疫吸附测定板用重组人cyclin B1包被。检测生物素化的Aβ肽（1-40或25-35）的结合。为了测试竞争性抑制，将未标记的Aβ肽（包括20 µM的Aβ 31-35）与生物素化肽同时加入。对结合进行定量，并计算亲和力常数。[1]
CDK-1激酶活性实验： 测量重组CDK-1/cyclin B1或免疫沉淀CDK-1的磷酸化活性。底物包括组蛋白III-SS、合成组蛋白H1肽片段（PKTPKKAKKL）或合成CDK-1底物（CSH 103）。反应在[γ-³²P]ATP存在下进行，以测量³²P掺入底物的量，或通过免疫分析检测反应产物中免疫反应性磷酸丝氨酸（pS）和磷酸苏氨酸（pT）水平的增加。将Aβ肽（包括20 µM的Aβ 31-35）加入反应混合物以测试其对激酶活性的影响。[1] MAPK和PKC活性实验： 对于MAPK p42实验，用髓鞘碱性蛋白作为底物包被板。对于PKCδ实验，用组蛋白III-SS包被板。使用重组激酶或从细胞提取物中免疫沉淀的激酶，在[γ-³²P]ATP存在下或使用pS/pT免疫分析法进行实验。测试Aβ肽（包括20 µM的Aβ 31-35）影响激酶活性的能力。[1] |
| 细胞实验 |
神经元细胞毒性实验（MTT法）： 将分化的人NT-2神经元在培养中增殖。细胞与测试肽（包括25 µM的 β-Amyloid 31-35）孵育24小时。在一些实验中，CDK抑制剂olomoucine（50 µM）与肽共同孵育。孵育期后，使用MTT还原法评估细胞活力。测量生成的甲瓒染料量，该量与线粒体活性和细胞活力相关。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
β-淀粉样蛋白 31-35（浓度为 25 µM）在体外暴露 24 小时后对分化的人类 NT-2 神经元具有细胞毒性。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
β-淀粉样蛋白31-35 (β-Amyloid 31-35) 是淀粉样β肽的片段，与阿尔茨海默病病理相关。它被认为是全长Aβ肽发挥细胞毒性所需的最小序列。[1] 提出的机制涉及β-淀粉样蛋白31-35与细胞周期蛋白B1 (cyclin B1) 的结合，后者是CDK-1复合物的调节成分。这种结合增强了CDK-1对其底物的激酶活性。由此产生的异常磷酸化事件可能导致神经元功能障碍和死亡，从而将淀粉样蛋白毒性与阿尔茨海默病中观察到的细胞周期失调联系起来。[1]
广谱 CDK 抑制剂奥洛莫辛可以预防 β-淀粉样蛋白 31-35 的细胞毒性，这支持了 CDK 激活在其毒性机制中的作用。[1] 该研究表明，Aβ 与细胞周期蛋白 B1/CDK-1 之间的直接相互作用可能将淀粉样蛋白假说与阿尔茨海默病特征性的 tau 蛋白磷酸化异常联系起来。[1] |
| 分子式 |
C25H47N5O6S
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|---|---|
| 分子量 |
545.73558
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| 精确质量 |
545.325
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| CAS号 |
149385-65-9
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| PubChem CID |
10816380
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.137 g/cm3
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| 沸点 |
866.382ºC at 760 mmHg
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| LogP |
3.124
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| tPSA |
205.02
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
18
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
766
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| 定义原子立体中心数目 |
6
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| SMILES |
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N
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| InChi Key |
ZMDGLWRNBGRYQB-ZKHIMWLXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H47N5O6S/c1-8-15(5)20(26)23(33)30-21(16(6)9-2)24(34)27-13-19(31)28-18(12-14(3)4)22(32)29-17(25(35)36)10-11-37-7/h14-18,20-21H,8-13,26H2,1-7H3,(H,27,34)(H,28,31)(H,29,32)(H,30,33)(H,35,36)/t15-,16-,17-,18-,20-,21-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3S)-2-amino-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoic acid
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 该产品在溶液状态不稳定，请现配现用。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~5 mg/mL (~9.16 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.81 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8324 mL | 9.1619 mL | 18.3237 mL | |
| 5 mM | 0.3665 mL | 1.8324 mL | 3.6647 mL | |
| 10 mM | 0.1832 mL | 0.9162 mL | 1.8324 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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