| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EphA4 receptor ligand-binding domain (LBD) (Kd = 0.42 ± 0.02 μM by ITC; Ki = 0.65 μM by FPA) [1]
EphA3 LBD (Kd = 4.55 ± 1.09 μM by ITC) [1] EphA2 LBD (No binding, N.B.) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在原代皮层神经元中，123C4以浓度依赖的方式诱导生长锥塌陷。在500 nM、10 μM和100 μM浓度下，塌陷的生长锥百分比与对照组相比显著增加。100 μM 123C4与ephrinA1-Fc联合处理也显示出类似效果。[1]
在原代海马神经元中，123C4刺激EphA4磷酸化。Western blot分析显示，10 μM和100 μM 123C4均增加了pEphA4/总EphA4的比值。[1] 在原代神经元中，FITC标记的123C4（10 μM和100 μM）被内吞并与早期内体标记物EEA1共定位，表明发生了受体内吞作用。共定位呈剂量依赖性。[1]在稳定转染EphA4的HEK293细胞中，123C4不会引起受体磷酸化，但它拮抗了Ephrin-A5诱导的磷酸化。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在SOD1(G93A)突变小鼠（ALS模型）中，从出生后第60天开始，每日腹腔注射30 mg/kg的123C4，可将平均寿命从134.3 ± 7.2天（对照组）延长至142.8 ± 6.9天（p < 0.01，Student's t检验）。[1]
在123C4治疗组小鼠中，疾病持续时间（从发病到死亡）从28.2 ± 4.2天（对照组）延长至38.6 ± 5.7天（p < 0.01）。[1] Kaplan-Meier生存曲线显示，与对照组小鼠相比，123C4治疗组小鼠的生存期显著延长。[1] |
| 酶活实验 |
荧光偏振竞争实验 (FPA)：将 EphA4 LBD 与不同浓度的测试化合物在 PBS 缓冲液 (pH 7.2) 中于室温预孵育 10 分钟，然后加入 FITC 标记的 KYL 肽 (KYLPYWPVLSSL)。孵育 30 分钟后，在激发/发射波长 480/535 nm 处测量偏振值。Ki 值通过 S 型剂量反应非线性回归确定。[1] 等温滴定量热法 (ITC)：使用 ITC200 仪器测量 123C4 与 EphA4 LBD（或其突变体）之间的直接解离常数。同时测定热力学参数（ΔH，-TΔS）。对于野生型 EphA4 LBD，Kd = 0.42 ± 0.02 μM，ΔH = -11.06 ± 0.06 kcal/mol。[1]
核磁共振波谱：在 700 MHz 下采集了 13C-甲硫氨酸标记的 EphA4 LBD (50 μM) 的二维 [13C,1H]-HSQC 谱图。滴定 123C4 (10-50 μM) 后，Met60 和 Met164 的交叉峰消失，并出现新的峰，表明在核磁共振时间尺度上交换缓慢。解离速率估计 < 30 s⁻¹，由此得出 Kd < 300 nM。核磁共振还显示了 123C4 对 ephrin-B2 的置换作用。 [1] 分子对接：使用Gold软件将123C4对接至EphA4 LBD（PDB ID 4M4R）。低能量结合构象显示配体采用I型β-转角结构，并形成分子内氢键。[1] |
| 细胞实验 |
从C57BL/6小鼠（P0-P1或E18-E18）中分离出原代皮层或海马神经元。解剖组织后，用木瓜蛋白酶/DNase I溶液在37°C下处理20分钟，然后进行机械分离，并接种于聚赖氨酸/层粘连蛋白包被的盖玻片或培养板上。细胞在添加了B27补充剂的Neurobasal培养基中，于37°C、5% CO2/10% O2的条件下培养。[1]
免疫细胞化学：神经元用4%多聚甲醛固定，用0.1% Triton X透化，用5%牛血清白蛋白封闭。轴突生长锥用鬼笔环肽-罗丹明染色，树突用抗MAP2抗体染色，早期内体用抗EEA1抗体染色。图像通过共聚焦显微镜采集。 [1] 蛋白质印迹：细胞在裂解缓冲液（25 mM Tris-HCl、150 mM NaCl、5 mM EDTA、1% Triton-X、1 mM 过钒酸钠、蛋白酶抑制剂）中裂解。裂解液用抗 EphA4 抗体和蛋白 A 琼脂糖进行免疫沉淀，然后进行 SDS-PAGE 电泳，转移至硝酸纤维素膜，用 HRP 标记的抗磷酸酪氨酸抗体进行印迹，并用 ECL 试剂显色。印迹膜经脱色后重新进行总 EphA4 抗体检测。[1] 图像分析：对于生长锥塌陷，每个处理组采集 100 张图像（每张图像 2-3 个神经元）。轴突被定义为最长的 MAP-2 阳性神经突。对塌陷的生长锥进行计数。使用 ImageJ 共定位阈值插件对 FITC-123C4 和 EEA1 的共定位进行定量分析。统计分析采用双尾非配对 Student's t 检验或 ANOVA。[1] |
| 动物实验 |
将SOD1(G93A)突变小鼠（B6.Cg-Tg(SOD1(G93A))1Gur/J）进行繁殖。将数量相等的同窝同性别小鼠随机分为两组（每组n=12，6只雄性，6只雌性）。从出生后第60天开始，小鼠接受腹腔注射（ip）治疗，分别注射123C4或生理盐水对照。123C4溶于生理盐水，浓度为2 mg/mL，并用0.2 μm滤膜过滤除菌。剂量：每日30 mg/kg体重。每日评估小鼠后肢震颤和伸展反射消失情况。终点：小鼠被推倒后10秒内无法翻身。采用Kaplan-Meier法比较疾病发生率和生存率。 [1]
初步药代动力学研究：对BalbC小鼠进行单次静脉注射123C4（5 mg/kg）。30分钟后测量血液和脑组织中的化合物浓度。[1] 初步毒性研究：两只SOD1(G93A)小鼠从出生后第60天开始，每天腹腔注射123C4（30 mg/kg），持续数周。与溶剂对照组相比，未观察到任何不良毒性反应。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
溶解度：123C4在PBS中的溶解度约为100 μM。[1]
血浆稳定性：在大鼠血浆中的半衰期(t1/2) > 60分钟，显著长于KYL肽（t1/2 ~10分钟）。[1] 脑渗透性：在BalbC小鼠中单次静脉注射5 mg/kg剂量后，约60%的123C4在30分钟内到达脑组织，其浓度与EphA4 LBD的Kd值相似。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项初步研究中，连续数周每天腹腔注射 30 mg/kg 的 123C4 治疗 SOD1(G93A) 小鼠，与仅接受载体的对照组小鼠相比，未观察到任何不良毒性症状。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
123C4是一种高效且选择性的EphA4 LBD配体，专为肌萎缩侧索硬化症（ALS）而开发。它在原代皮层神经元中作为EphA4激动剂发挥作用，诱导受体磷酸化和内吞作用。其作用机制可能涉及EphA4的反向信号传导和内化，从而阻止其与反应性星形胶质细胞上的ephrin-B2结合。该化合物在SOD1(G93A)小鼠模型中也显示出延缓ALS进展的疗效。提示其在阿尔茨海默病、脊髓损伤、脑损伤和某些癌症的治疗中具有潜在应用价值。123C4与先前报道的肽类药物相比，在血浆中更稳定，且分子量更低。[1]
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| 分子式 |
C43H47CLN8O6
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|---|---|
| 分子量 |
807.336288690567
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| 精确质量 |
806.33
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| CAS号 |
2034159-30-1
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| PubChem CID |
122661600
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.3
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| tPSA |
216
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| 氢键供体(HBD)数目 |
8
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
19
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| 重原子数目 |
58
|
| 分子复杂度/Complexity |
1330
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
ClC1C=CC(=CC=1)C[C@@H](C(N[C@H](C(NCCC1=CNC2C=CC(=CC1=2)OC)=O)CC1C=CN=CC=1)=O)NC([C@H](CC1=CNC2C=CC(=CC1=2)O)NC(CCCN)=O)=O
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| InChi Key |
SRCCZHZOKZJHOK-IGMOWHQGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C43H47ClN8O6/c1-58-32-9-11-36-34(23-32)28(24-48-36)14-18-47-41(55)37(20-27-12-16-46-17-13-27)51-42(56)38(19-26-4-6-30(44)7-5-26)52-43(57)39(50-40(54)3-2-15-45)21-29-25-49-35-10-8-31(53)22-33(29)35/h4-13,16-17,22-25,37-39,48-49,53H,2-3,14-15,18-21,45H2,1H3,(H,47,55)(H,50,54)(H,51,56)(H,52,57)/t37-,38-,39-/m0/s1
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| 化学名 |
4-amino-N-[(2S)-1-[[(2S)-3-(4-chlorophenyl)-1-[[(2S)-1-[2-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)ethylamino]-1-oxo-3-pyridin-4-ylpropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]butanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~123.86 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2386 mL | 6.1932 mL | 12.3864 mL | |
| 5 mM | 0.2477 mL | 1.2386 mL | 2.4773 mL | |
| 10 mM | 0.1239 mL | 0.6193 mL | 1.2386 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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