| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Caspase-3; Caspase-10
Kelch-like ECH-associated protein 1 (Keap1, a sensor protein for phase 2 inducers) - Acts as a covalent modifier/reactant. Phase 2 response / Keap1-Nrf2-ARE pathway (CD value for NQO1 induction = 0.15 μM in murine hepatoma Hepa1c1c7 cells and wild-type L1210 cells) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
当 L1210 细胞暴露于 0.6 M 2-HBA（双（2-羟基亚苄基）丙酮）时，NQO1 和谷胱甘肽还原酶的比活性分别增加 6 倍和 1.5 倍。此外，细胞总谷胱甘肽含量发生 2.4 倍的坐标诱导。在更深入的研究中，发现2-HBA以浓度依赖性方式诱导NQO1。 2-HBA 处理以浓度依赖性方式诱导 L1210 野生型细胞及其 Y8 耐药细胞的细胞周期停滞和凋亡。 Caspase-3 和 Caspase-10 均可由 2-HBA 触发[1]。
1. 在鼠白血病L1210野生型细胞中，用亚微摩尔浓度（例如0.6 μM，处理48小时）的 2-HBA 处理可诱导相2反应，表现为NAD(P)H:醌受体氧化还原酶1 (NQO1) 活性增加6倍，谷胱甘肽还原酶活性增加1.5倍，以及总细胞谷胱甘肽水平增加2.4倍（与未处理的对照组相比）。在此浓度下未观察到细胞毒性。[1] 2. 2-HBA 在野生型L1210细胞中使NQO1比活性加倍的所需浓度（CD值）为0.15 μM，与之前在鼠肝癌细胞中的数据一致。[1] 3. 相反，缺乏功能性p53蛋白表达的脱氧腺苷抗性L1210 Y8突变细胞，在用 2-HBA 处理后未显示NQO1活性诱导。Y8细胞的基础NQO1活性约为野生型细胞的50%。[1] 4. 在较高（微摩尔）浓度下，2-HBA 在野生型和Y8 L1210细胞中均引起细胞周期阻滞和凋亡。在野生型细胞中，处理（例如5-15 μM，24小时）引起G2/M期细胞周期阻滞。在Y8细胞中，处理（例如0.5-2.5 μM，24小时）导致G0/G1和G2/M期细胞群增加。[1] 5. 2-HBA 以浓度依赖性方式诱导凋亡，通过Annexin-V-FLUOS/碘化丙啶流式细胞术评估。Y8突变细胞对 2-HBA 的凋亡效应更敏感。例如，2.5 μM的 2-HBA 诱导了56.6%的Y8细胞发生凋亡，而需要15 μM才能诱导37.8%的野生型细胞发生凋亡。坏死比例很小。[1] 6. 用 2-HBA 处理L1210细胞（野生型15 μM，Y8细胞2.5 μM，处理6小时）显著提高了无细胞提取物中caspase-3（终末执行caspase）和caspase-10（起始caspase）的活性。caspase-1、-6和-8的活性未受显著影响。在Y8细胞中激活更明显。[1] 7. 2-HBA 诱导的凋亡是p53非依赖性的，因为L1210野生型（表达突变型p53）和Y8细胞（缺乏p53表达）均没有功能性p53蛋白。[1] |
| 酶活实验 |
在 96 孔板中，细胞生长 24 小时，然后暴露于 2-HBA（双（2-羟基亚苄基）丙酮）24 或 48 小时，具体取决于是否要测量谷胱甘肽水平或酶的活性。暴露时间过后，通过离心（1500 g，4°C，15 分钟）收集细胞，然后用 DPBS 清洗，然后在 0.08% 洋地黄皂苷中裂解。对于蛋白质分析，使用等分试样 (25 μL)。使用 Prochaska 测试评估 NQO1 活性[1]。
1. NQO1活性测定（Prochaska测试）： 将L1210细胞接种于96孔板（每孔20,000个细胞）并培养24小时。然后用 2-HBA 的系列稀释液处理48小时。处理后，细胞通过离心收集，用Dulbecco磷酸盐缓冲盐水洗涤，并在0.08%洋地黄皂苷中裂解。取裂解液等份用于蛋白测定。NQO1活性直接在微孔板中测量。该测定通常涉及监测酶催化的合适醌底物的还原反应，该反应偶联到比色或荧光指示剂。计算比活性，并根据剂量反应曲线确定使酶活性加倍所需的浓度（CD值）。[1] 2. 谷胱甘肽还原酶活性测定： 从 2-HBA 处理和对照的L1210细胞制备细胞裂解液，方法同上。谷胱甘肽还原酶活性根据标准酶学程序测量，通常涉及通过监测340 nm处NADPH吸光度的降低来跟踪NADPH依赖的氧化型谷胱甘肽（GSSG）还原为还原型谷胱甘肽（GSH）的过程。[1] |
| 细胞实验 |
暴露于 2-HBA（双（2-羟基亚苯亚甲基）丙酮）24 小时后，通过离心收集一式两份的细胞等分试样（1×106）并用冷 DPBS 洗涤。使用Annexin-V-FLUOS测定法测定细胞凋亡，同时使用碘化丙啶摄取测定坏死分数[1]。
1. 流式细胞术细胞周期分析： L1210细胞（野生型和Y8突变型）用递增浓度的 2-HBA 处理24小时。然后收集细胞，用冷的DPBS洗涤，并重悬于柠檬酸钠溶液中。加入碘化丙啶，细胞在冰上孵育30分钟。然后加入RNase，室温孵育30分钟后，细胞在4°C下保存过夜。分析前，将细胞悬液通过细针以确保为单细胞。取1×10⁶个细胞等份在流式细胞仪上进行分析，使用氩离子激光器（488 nm激发）和560 nm检测。测量DNA含量，并使用适当的分析软件确定细胞周期分布（G0/G1、S、G2/M期）和亚G0/G1凋亡细胞群。[1] 2. Annexin-V/PI染色评估凋亡和坏死： 暴露于 2-HBA 24小时后，通过离心收集L1210细胞的双份等份（1×10⁶个细胞），并用冷的DPBS洗涤。使用荧光Annexin-V偶联物检测试剂盒测定凋亡。将细胞重悬于含有Annexin-V-荧光素和碘化丙啶的结合缓冲液中并孵育。然后使用488 nm激发通过流式细胞术分析细胞。使用515 nm发射滤光片检测荧光素（Annexin-V）荧光，使用560 nm滤光片检测PI荧光。这样可以区分活细胞（Annexin-V阴性，PI阴性）、早期凋亡细胞（Annexin-V阳性，PI阴性）和晚期凋亡/坏死细胞（Annexin-V阳性，PI阳性）。[1] 3. 无细胞提取物中的Caspase活性测定： 用 2-HBA（分别为15 μM和2.5 μM）处理野生型和Y8 L1210细胞6小时。取1×10⁶个细胞等份用于制备无细胞提取物，冷冻保存直至分析。使用针对每种caspase的特异性荧光肽底物和抑制剂，在96孔板格式中测定caspase活性。对于caspase-3，使用底物Ac-DEVD-AMC和抑制剂Ac-DEVD-CHO；对于caspase-6，使用Ac-VEID-AFC和Ac-VEID-CHO；对于caspase-8，使用Ac-IETD-AFC和Ac-IETD-CHO；对于caspase-10，使用Z-AEVD-AFC和Z-AEVD-FMK。细胞提取物与底物（以及底物加抑制剂作为对照）在37°C下孵育1.5小时。使用具有适当激发/发射滤光片的酶标仪荧光法测量荧光产物（AMC或AFC）的释放。根据荧光信号计算caspase活性。[1] 4. 总谷胱甘肽测定： 用 2-HBA（例如0.6 μM，24小时）处理的L1210细胞被裂解。取裂解液等份用含EDTA的冰冷偏磷酸处理以沉淀蛋白质。离心后，将上清液转移至另一块板，并用含EDTA的磷酸钠缓冲液（pH 7.5）中和。通过循环测定法测定总细胞谷胱甘肽。该测定通常涉及在NADPH存在下，谷胱甘肽还原酶循环还原5,5'-二硫代双（2-硝基苯甲酸），生成黄色产物，其形成速率（在412 nm处分光光度法测量）与总谷胱甘肽浓度成正比。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在亚微摩尔浓度（例如 0.6 μM）下，2-HBA 在 L1210 细胞中未显示出细胞毒性，这体现在细胞形态学上，且处理组和对照组细胞的总蛋白含量相同。[1]
2. 在较高微摩尔浓度下，2-HBA 可诱导细胞凋亡，主要表现为细胞凋亡，坏死程度极低。Annexin-V/PI 双染结果显示，大多数受影响的细胞处于早期凋亡阶段（Annexin-V 阳性，PI 阴性）。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
另见：1,5-双(2-羟基苯基)戊-1,4-二烯-3-酮（注释已移至）。
1. 背景和化合物类别：2-HBA 是一种双迈克尔反应受体，属于双(亚苄基)烷酮类化合物。迈克尔反应受体是 II 期反应诱导剂的主要类别，其特征在于能够与巯基反应。2-HBA 芳环上的邻位羟基对其高诱导效力和巯基反应活性至关重要。[1] 2. 双重浓度依赖性效应：2-HBA 的生物学效应表现出明显的浓度依赖性二分性。在低浓度（亚微摩尔级）下，它能有效诱导细胞保护性的 II 期反应。在高浓度（微摩尔级）下，2-HBA 可诱导 p53 非依赖性细胞凋亡。在 L1210 细胞中，2-HBA 的化学预防指数（凋亡 IC50 / 诱导 CD 值）约为 100（15 μM / 0.15 μM）。这种低剂量诱导 II 期细胞凋亡、高剂量诱导细胞凋亡的模式似乎是各类 II 期细胞凋亡诱导剂的普遍现象。[1] 3. 化学保护中的潜在协同作用：2-HBA 既能增强正常/癌前细胞的细胞防御机制（诱导 II 期细胞凋亡），又能通过细胞凋亡清除基因异常细胞，这使其成为针对致癌过程多个步骤的化学预防策略的理想候选药物。 [1] 4. 模型系统意义：使用 p53 缺陷型 L1210 和 Y8 细胞系表明，2-HBA 可以独立于 p53 状态诱导细胞凋亡，考虑到 p53 突变在人类癌症中的高频率，这一发现意义重大。[1] |
| 分子式 |
C17H14O3
|
|---|---|
| 分子量 |
266.29126
|
| 精确质量 |
266.094
|
| 元素分析 |
C, 76.68; H, 5.30; O, 18.02
|
| CAS号 |
131359-24-5
|
| 相关CAS号 |
131359-24-5
|
| PubChem CID |
5472867
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
495.5±40.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
267.6±23.8 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.704
|
| LogP |
4.91
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| tPSA |
57.53
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
20
|
| 分子复杂度/Complexity |
338
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(/C=C/C1=CC=CC=C1O)/C=C/C2=CC=CC=C2O
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| InChi Key |
RFRXIWQYSOIBDI-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H14O3/c1-2-14-16(13-5-3-4-6-15(13)20-14)17(19)11-7-9-12(18)10-8-11/h3-10,18H,2H2,1H3
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| 化学名 |
(2-ethyl-1-benzofuran-3-yl)-(4-hydroxyphenyl)methanone
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| 别名 |
2-HBA
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~375.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.39 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7553 mL | 18.7765 mL | 37.5530 mL | |
| 5 mM | 0.7511 mL | 3.7553 mL | 7.5106 mL | |
| 10 mM | 0.3755 mL | 1.8777 mL | 3.7553 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
IGN523
d-T101 peptide
Ac-DMLD-CMK TFA
2-Et-AZT
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