3-Indolebutyric acid (IBA; 3-indolebutyric acid)   中文名称: 吲哚丁酸

Microbial Metabolite; Endogenous Metabolite

生长素是一种重要的植物激素，参与多种植物发育过程。生长素水平的时空调节对于在适当的时间和地点实现器官的发育是必要的。这些水平可以通过生长素[吲哚3-乙酸（IAA）]从其共轭形式及其前体的转化来调节。Indole-3-butyric acid/吲哚-3-丁酸（IBA）是一种生长素前体，在过氧化物酶体β氧化过程中转化为IAA。在拟南芥中，IBA转化为IAA的改变会导致多种植物缺陷，表明IBA在关键方面有助于生长素的稳态。与IAA一样，IBA及其结合物可以在植物中运输，但许多IBA载体仍需鉴定。在这篇综述中，我们讨论了迄今为止在拟南芥中鉴定的IBA转运蛋白，包括ATP结合盒转运蛋白（ABCG）家族G亚家族的多效耐药性（PDR）成员，主要促进因子超家族（MFS）家族的IBA1转运蛋白（TOB1）成员，并假设其他潜在的IBA载体参与植物发育。[1]

---

在培养开始时，两种生长素的水平都无法检测到，这表明拟南芥TCL是研究外源生长素完全控制下AR形成的最佳选择。分析了不同生态型、转基因系和敲除突变体的TCL在不同处理下的AR反应。研究表明，Indole-3-butyric acid/吲哚-3-丁酸/IBA比IAA和IBA+Kin更能诱导AR。IBA诱导的IAA外排（PIN1）和IAA内流（AUX1/LAX3）基因、IAA内流载体活性以及参与IAA生物合成的ANTHRANILATE合成酶-α1（ASA1）基因的表达。ASA1和ANTHRANILATE合成酶β1（ASB1）是同一酶的另一个亚基，在外源IBA存在的情况下，它们对AR的形成有积极影响，因为它们的突变体wei2wei7的TCL中的AR反应大大降低。来自ech2ibr10突变体的经IBA处理的TCL的AR反应也显著降低，该TCL被阻断为IBA到IAA的转化。一氧化氮是IAA下游信号，也是IBA转化为IAA的副产物，在IAA和IBA处理的TCL中早期检测到，但在后一种外植体中检测到的水平更高。 结论：总之，研究结果表明，吲哚-3-丁酸通过转化为涉及NO活性的IAA，以及对IAA转运和ASA1/ASB1介导的IAA生物合成的积极作用，诱导AR的形成。这些结果对于旨在克服具有经济价值的物种的生根阻力的应用非常重要，但主要是为了帮助理解IBA在不定根自然过程中的作用。[2]

---

受控的植物生长需要通过各种信号分子进行调节，包括类固醇、肽、氧和氮自由基，以及“经典”的植物激素组。生长素对控制植物生长至关重要，也协调许多发育过程，如新根的形成。它通过转录水平的作用缓慢调节根结构，更快速地通过主要靶向质膜感觉系统和细胞内信号通路的机制调节根结构。后一种反应使用几种第二信使，包括Ca（2+）、一氧化氮（NO）和活性氧（ROS）。在这里，我们研究了两种生长素，主要生长素吲哚-3-乙酸（IAA）和另一种内源性生长素Indole-3-butyric acid/吲哚-3-丁酸（IBA）在拟南芥和玉米侧根形成过程中的不同作用。这主要通过不同类型的荧光显微镜和NO产生抑制剂进行分析。这项研究表明，过氧化物酶体IBA转化为IAA后是过氧化物酶体制NO，这对IBA诱导的侧根形成很重要。我们得出结论，过氧化物酶体NO在生长素诱导的根器官发生中起着新的作用。特别是，过氧化物酶体中NO和IAA的空间和时间协调释放是IBA强烈促进侧根形成的原因。[3]

---

体外活动：在一年中的良好产蛋季节，雏鸡的总产量约为 80% 至 85%，可孵化蛋的百分比高达约 80% 至 90%。在一年中产蛋不佳的季节，雏鸡的总产量约为 50% 至 55%，而可孵化蛋的百分比高达约 60% 至 65%。在运行良好的商业孵化场中，任何一年的平均孵化率约为孵化蛋总数的 75%，这被认为是优秀的。细胞测定：对于自然受精且之前没有活胚胎迹象的卵子，用最佳量的Indole-3-butyric acid/IBA处理促进了某些卵子中活胚胎的形成。它进一步提高了特定批次鸡蛋的雏鸡产量。在卵子胚层的赋予生命的细胞中，最佳量的IBA刺激了细胞的生命生长活性，并导致活胚胎的形成，尽管在最仔细的照光处理之前，该形成未能显现出来。

对于受精禽蛋的活体动物胚胎来说，当提供Indole-3-butyric acid/IBA时，它会刺激孵化过程中的生物生命生长过程。在所有情况下，经过 IBA 治疗后，孵出的雏鸡都健康、有活力且充满活力。它们比未经处理的鸡蛋孵出的普通小鸡更能抵抗疾病

TCL cultyre[2]
从花序茎的节间切下由包括表皮在内的六层细胞组成的约0.5×8mm的浅表TCL。在22±2°C的持续黑暗中，在由添加了0.55 mM肌醇、0.1μM硫胺素HCL、1%（w/v）蔗糖、0.8%琼脂（w/v，pH 5.7）的MS盐组成的培养基上培养TCL，表皮朝上，直至第15天。Col-0 TCL在该培养基上培养，添加10μM IBA/吲哚-3-丁酸、10μM IBA加0.1μM Kin、0.1μM Kin、10μM IAA、10μM-IBA加0.01μM MeJA，并在HF下作为实验对照。将ech2ibr10、wei2-1wei7-1和lax3aux1-21突变体及其野生型的TCL与10μM IBA、10μM IAA或在HF下培养。ASA1:：GUS TCL用10μM IPA或10μM NAA或IBA加0.01μM MeJA培养。用10μM IBA培养DR5:：GUS、PIN1:：GUS和LAX3:：GUS以及Col和Col-gl1生态型的TCL。每个基因型和每个重复使用100个外植体。在高压灭菌之前，用1M NaOH将pH值调节至5.7。对于宏观分析，在培养结束时，在LEICA MZ8立体显微镜下检查WT和突变体的外植体，并将AR反应评估为培养结束时留在初始阶段或形成宏观愈伤组织和AR的外植体百分比，以及每个生根外植体的平均AR数（±SE）。

---

GUS活性的组织化学分析[2]
在培养的第8天和第15天收获DR5:：GUS、PIN1:：GUS和LAX3:：GUS，AUX1:：GUS的TCL，并按照Willemsen等人的描述用GUS染色进行处理，如Veloccia等人所述，进行了细微的修改。在真空钟形罩中渗透15分钟后，将样品在37°C的黑暗中孵育30分钟（DR5:∶GUS和LA X3:：GUS），或45分钟（AUX1:∶GUS，ASA1:：GUS），或2.5小时（PIN1:∶GUS）。）。GUS测定后，将样品固定在70%（v/v）乙醇中，用分级乙醇系列脱水，包埋在Technovit 7100中，用Microm HM 350 SV切片机纵向切片12μm，并在光学显微镜下观察。

---

激素定量[2]
在时间0（即切除后不久）收集Col-0的TCL，并保存至-80°C，直至分析。根据Veloccia等人的研究，使用50mg TCL的等分试样提取IAA和IBA/吲哚-3-丁酸。通过快速分辨反相HPLC（RR-RP-HPLC）分离进行IAA和IBA的定量测定，然后用带有ESI界面的三重四极杆（QqQ）质谱仪进行MS/MS检测。两种生长素的纯标准品、内标品和定量依据Veloccia等人。

---

一氧化氮检测[2]
在落射荧光显微镜下，使用可渗透细胞的二乙酸酯衍生物二氨基荧光素FM（DAF-FMDA）定量用10μM Indole-3-butyric acid/IBA或10μM IAA培养的Col-0 TCL中的细胞内NO含量。在确认仅用缓冲液检测不到明显的落射荧光信号后，在添加了5μM DAF-FMDA的20 mM HEPES/NaOH缓冲液（pH 7.4）中培养2、3和6天，将TCL孵育20分钟（附加文件1：图S1a-b）。用缓冲液洗涤三次以去除多余的荧光探针后，使用配备特定滤光片组（EX 450–490、DM 510、LP 515）的徕卡DMRB显微镜观察TCL。这些图像是用LEICA DC500数码相机采集的，并用IM1000图像分析软件进行分析。每次处理20个TCL，随机进行10次观察，使用ImageJ软件量化荧光信号（绿色）的强度，并以任意单位（AU；0至255）表示。将这些值取平均值并归一化为对照值，即在没有荧光探针的缓冲液中孵育的TCL中测量的值。

---

将野生型和lrt1突变体的玉米粒（Zea mays L.）浸泡6小时，在室温下在黑暗中在湿润的滤纸卷上发芽4天。选择长度为50-70mm的直主根幼苗（野生型，lrt1）进行生长素处理。在药理学实验中，根尖在室温下在黑暗中浸入适当的溶液中。对于用生长素处理根，在将根尖浸没2小时之前，立即制备10μM IAA或IBA/吲哚-3-丁酸的有效工作浓度。

拟南芥种子经过表面灭菌处理后，放置在不含维生素且含有1%蔗糖（β-氧化缺陷突变体和相关野生型对照为1.5%）的半强度Murashige&Skoog（1962）（MS）培养基上，该培养基用0.8%植酸酶固化。将装有种子的盘子在4°C下储存48小时以打破休眠，然后在连续的黄光下垂直安装3-4天。

拟南芥突变体pex5-1 pex7-1、pxa1-1和pex6（最初由Zolman等人于2000年指定为B11）具有β-氧化缺陷，并显示出IBA/吲哚-3-丁酸不敏感性（Zolman等，2001a；Zolman&Bartel，2004；Woodward&Bartel），以及NO产生受损的突变体noa1（最初由Guo等人于2003年指定为Atnos1）用于我们的实验。

为了进行显微镜观察，将3-4d龄的幼苗转移到显微镜载玻片上，将其放置在由盖玻片制成的薄室中。将腔室充满半强度MS培养基，但不含植脂凝胶，并将其放置在无菌玻璃试管中，试管中的培养基水平达到腔室的开口下端。这使得腔室和反应杯之间可以自由交换介质。幼苗在连续的黄光下垂直生长长达24小时。在此期间，幼苗在液体培养基中稳定了根系生长并产生了新的根毛。使用过氧化物酶体靶向信号1-绿色荧光蛋白（PTS1-GFP）对过氧化物酶体内进行监测（参见Woodward&Bartel，2005b）。

Non-Human Toxicity Values
LD50 Mouse oral 100 mg/kg
LD50 Mouse ip 100 mg/kg

---

8617 rat LD oral >500 mg/kg National Academy of Sciences, National Research Council, Chemical-Biological Coordination Center, Review., 5(7), 1953
8617 mouse LD50 oral 100 mg/kg Agricultural Chemicals, Thomson, W.T., 4 vols., Fresno, CA, Thomson Publications, 1976/77 revision, 3(76), 1976/1977
8617 mouse LD50 intraperitoneal 100 mg/kg Agrochemicals Handbook, with updates, Hartley, D., and H. Kidd, eds., Nottingham, Royal Soc of Chemistry, 1983-86, A231(1983)

[1]. Indole 3-Butyric Acid Metabolism and Transport in Arabidopsis thaliana. Front Plant Sci. 2019 Jul 3;10:851.
[2]. Indole-3-butyric acid promotes adventitious rooting in Arabidopsis thaliana thin cell layers by conversion into indole-3-acetic acid and stimulation of anthranilate synthase activity. BMC Plant Biol. 2017 Jul 11;17(1):121.
[3]. Indole-3-butyric acid induces lateral root formation via peroxisome-derived indole-3-acetic acid and nitric oxide. New Phytol. 2013 Oct;200(2):473-482.

Indole-3-butyric acid is a indol-3-yl carboxylic acid that is butanoic acid carrying a 1H-indol-3-yl substituent at position 1. It has a role as a plant hormone, a plant metabolite and an auxin. It is functionally related to a butyric acid. It is a conjugate acid of an indole-3-butyrate.
Indole-3-butyric acid has been reported in Zea mays, Cocos nucifera, and other organisms with data available.

---

IBA is the main player of adventitious rooting in arabidopsis TCLs, and possibly in many other culture systems and species characterized by very low endogenous auxin contents. IBA acts by conversion into IAA, and by enhancing IAA biosynthesis and transport. The nodal point of its action is the regulation of the endogenous IAA pool. IBA-regulation of IAA homeostasis involves the activity of other compounds downstream to its peroxisomal conversion, NO and jasmonates. The relationship of IBA with NO and jasmonates, and the downstream auxin signalling and perception, needs further investigation. Even if useful for planning experiments to overcome the rooting recalcitrance of species of economic value, the main implication of the findings is to help in understanding the mechanism by which IBA controls the natural process of adventitious rooting,[2]

---

A question which still remains to be answered is the role of endogenous IBA. Recent studies have indicated that the IBA to IAA conversion is relevant for undisturbed seedling development by feeding into internal active auxin pools (Strader et al., 2011). One phenotypic aspect of many mutants that cannot utilize IBA is a shortage of lateral roots (e.g. Zolman et al., 2001a,b; Wiszniewski et al., 2008; Strader et al., 2010, 2011). This could be an indicator that IBA to IAA conversion is necessary for LRF. Our present data show that the spatially and temporally coordinated release of NO and IAA is needed for IBA bioactivity. IBA to IAA peroxisomal conversion not only results in tightly regulated IAA synthesis, but also promotes concomitant NO formation. It can be expected that other processes also requiring IBA, and also involving NO, will be shown to rely on peroxisomal IAA–NO generation. Here, we can mention polarized tip growth of root hairs and root adaptation to salt and water stresses (Lombardo et al., 2006; Strader et al., 2010, 2011; Tognetti et al., 2010; Strader & Bartel, 2011). Future work is necessary to elaborate what kind of NO-producing enzyme systems are responsible for the NO formation induced by IBA, and whether NO-mediated signaling is also utilized in other processes in which IBA is active or essential.[3]

C12H13NO2

203.24

203.094

C, 70.92; H, 6.45; N, 6.89; O, 15.74

133-32-4

8617

White to slightly yellow crystals
White to tan powder or crystalline solid

1.3±0.1 g/cm3

426.6±20.0 °C at 760 mmHg

124-125.5 °C(lit.)

211.8±21.8 °C

0.0±1.1 mmHg at 25°C

1.646

2.34

53.09

2

2

4

15

230

0

O([H])C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12)=O

JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C12H13NO2/c14-12(15)7-3-4-9-8-13-11-6-2-1-5-10(9)11/h1-2,5-6,8,13H,3-4,7H2,(H,14,15)

4-(1H-indol-3-yl)butanoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (12.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。