| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
- `4-Hydroxylonchocarpin` targets tyrosinase, tyrosinase-related proteins (TRP-1, TRP-2), and MAPK phosphatase (MKP-1). It inhibits tyrosinase activity with an IC₅₀ of 25.3 μM, and downregulates the expression of TRP-1, TRP-2 [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- B16F10黑色素瘤细胞抗黑色素生成作用：B16F10细胞用`4-Hydroxylonchocarpin`（10、50、100 μM）处理48小时（同时加入100 nM α-MSH刺激黑色素生成），黑色素含量呈浓度依赖性降低。50 μM浓度时，黑色素含量较α-MSH刺激对照组减少42±3%。Western blot检测显示，50 μM `4-Hydroxylonchocarpin`可使TRP-1蛋白表达降至对照组的0.4倍，TRP-2降至0.3倍，小眼畸形相关转录因子（MITF）降至0.2倍[1]
- MAPK信号通路调控作用：B16F10细胞经50 μM `4-Hydroxylonchocarpin`处理48小时后，ERK1/2磷酸化水平升至对照组的2.1倍，JNK磷酸化水平升至1.8倍，而MKP-1蛋白表达降至0.3倍。RT-PCR进一步证实，50 μM `4-Hydroxylonchocarpin`可使MKP-1 mRNA表达降至对照组的0.4倍，表明其通过抑制MKP-1调控MAPK通路[1] - 无细胞体系酪氨酸酶活性抑制：在蘑菇酪氨酸酶无细胞实验中，`4-Hydroxylonchocarpin`（0-100 μM）对酪氨酸酶活性的抑制IC₅₀为25.3 μM；100 μM浓度时，酪氨酸酶活性抑制率达68±4%[1] |
| 酶活实验 |
- 实验在50 mM磷酸缓冲液（pH 6.8）中进行，总反应体积为200 μL。每个反应体系包含10单位蘑菇酪氨酸酶、0.5 mM L-酪氨酸（底物）及浓度为0、10、25、50、75或100 μM的`4-Hydroxylonchocarpin`。反应混合物在37℃孵育30分钟，使L-酪氨酸氧化为多巴色素。孵育后，用酶标仪测定475 nm处吸光度（多巴色素特征吸光度）。酪氨酸酶抑制率按公式计算：[(对照组吸光度-处理组吸光度)/对照组吸光度]×100%。通过将抑制率与`4-Hydroxylonchocarpin`浓度对数作图并拟合浓度-效应曲线，得出IC₅₀值[1]
|
| 细胞实验 |
- B16F10细胞黑色素含量测定实验：B16F10细胞培养于含10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素的DMEM培养基中，37℃、5% CO₂条件下培养。细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板，过夜贴壁后，每孔加入100 nM α-MSH刺激黑色素合成，随后加入`4-Hydroxylonchocarpin`（10、50、100 μM）。处理48小时后，细胞用PBS洗涤2次，胰酶消化后1,000×g离心5分钟收集细胞沉淀。沉淀用100 μL含10% DMSO的1 N NaOH重悬，80℃加热1小时使细胞充分裂解、黑色素溶解，测定405 nm处吸光度，参照合成黑色素标准曲线定量黑色素含量[1]
- B16F10细胞Western blot实验：B16F10细胞用50 μM `4-Hydroxylonchocarpin`处理48小时后，冷PBS洗涤，加入含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液冰上裂解30分钟。12,000×g、4℃离心15分钟，取上清用蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度。每泳道上样30 μg蛋白进行10% SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜。膜用5%脱脂牛奶TBST溶液封闭1小时，4℃过夜孵育一抗（靶标：TRP-1、TRP-2、MITF、MKP-1、p-ERK1/2、总ERK1/2、p-JNK、总JNK、内参β-actin）。TBST洗涤后，室温孵育辣根过氧化物酶标记二抗1小时，ECL化学发光试剂显影， densitometry软件定量条带强度[1] - B16F10细胞RT-PCR实验：B16F10细胞用50 μM `4-Hydroxylonchocarpin`处理24小时后，RNA提取试剂提取总RNA。RNA经逆转录试剂盒（oligo(dT)引物）逆转录为cDNA，用MKP-1和内参GAPDH特异性引物进行PCR扩增。PCR反应条件：94℃预变性5分钟，随后30个循环（94℃变性30秒、58℃退火30秒、72℃延伸45秒），72℃终延伸10分钟。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色后紫外灯下观察[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
B16F10细胞体外细胞毒性：将B16F10细胞以每孔5×10³个细胞的密度接种于96孔板中，并过夜培养。加入浓度分别为10、25、50、75或100 μM的4-羟基龙胆碱，继续培养48小时。处理后，向每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），并在37℃下继续培养4小时。小心移除上清液，并向每孔加入150 μL DMSO溶解甲臜晶体。使用酶标仪在570 nm处测定吸光度，并计算相对于未处理对照组的细胞存活率。在所有测试浓度（最高达 100 μM）下，细胞存活率均保持在 85 ± 2% 以上，表明无明显细胞毒性 [1]
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
据报道，异巴伐色烯存在于丝状蒙杜利亚（Mundulea sericea）、丁克拉格多斯滕尼亚（Dorstenia dinklagei）和其他有相关数据的生物体中。
- `4-羟基龙卡品` 是一种从豆科植物中分离得到的天然异黄酮化合物。其抗黑色素生成机制涉及两条互补途径：1）直接抑制酪氨酸酶活性（IC₅₀ = 25.3 μM），酪氨酸酶是黑色素合成的关键酶； 2) 通过抑制 MKP-1 间接抑制黑色素相关蛋白（TRP-1、TRP-2、MITF）的表达，进而激活 ERK1/2 和 JNK MAPK 信号通路 [1] - 由于其强大的抗黑色素生成活性和对 B16F10 细胞的低细胞毒性，4-羟基龙胆碱 在开发用于皮肤美白的化妆品和治疗色素沉着过度疾病（如黄褐斑和雀斑）的治疗药物方面具有潜在的应用价值 [1] |
| 分子式 |
C20H18O4
|
|---|---|
| 分子量 |
322.3545
|
| 精确质量 |
322.12
|
| CAS号 |
56083-03-5
|
| PubChem CID |
5889042
|
| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
535.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
203-204℃
|
| 闪点 |
193.7±23.6 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.651
|
| LogP |
5.99
|
| tPSA |
66.76
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
514
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1(C=CC2=C(O1)C=CC(=C2O)C(=O)/C=C/C3=CC=C(C=C3)O)C
|
| InChi Key |
IQHPDUUSMBMDGN-WEVVVXLNSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H18O4/c1-20(2)12-11-16-18(24-20)10-8-15(19(16)23)17(22)9-5-13-3-6-14(21)7-4-13/h3-12,21,23H,1-2H3/b9-5+
|
| 化学名 |
(E)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)-3-(4-hydroxyphenyl)prop-2-en-1-one
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~155.11 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.76 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (7.76 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1022 mL | 15.5111 mL | 31.0222 mL | |
| 5 mM | 0.6204 mL | 3.1022 mL | 6.2044 mL | |
| 10 mM | 0.3102 mL | 1.5511 mL | 3.1022 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
