规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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10mg |
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25mg |
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50mg |
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100mg |
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250mg |
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Other Sizes |
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靶点 |
NLRP3; NF-κB
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体外研究 (In Vitro) |
晚期糖基化终产物(AGEs)可与AGE受体(RAGE)相互作用,作为无菌危险信号诱导炎症。4′-甲氧基白藜芦醇(4′mr)是一种从龙脑科中提取的多酚,其抗炎作用尚未被研究。在本研究中,我们试图通过RAW264.7巨噬细胞来探索4'MR在ages诱导的炎症模型中的保护作用。4′mr显著抑制促炎因子和趋化因子如白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)的基因表达,以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶2 (COX2)两种典型促炎酶的基因表达。此外,4'MR通过下调NADPH氧化酶的ROS生成、蛋白羰基和高级氧化蛋白产物水平,显著降低了氧化应激。进一步分析发现,4′mr可减弱MGO-BSA诱导的RAGE过表达。它还阻断了AGE-RAGE的下游信号,特别是包括p38和JNK在内的MAPKs,随后降低了NF-κB的激活。此外,4'MR显著降低nod样受体pyrin domain containing 3 (NLRP3)炎性体的激活,包括NLRP3和cleaved caspase-1,并减少成熟IL-1β的分泌。综上所述,我们的研究结果表明,4'MR的抗炎作用主要是通过抑制rage介导的MAPK/NF-κB信号通路和NLRP3炎性小体的激活。4′mr可能成为炎症相关疾病的新型治疗剂。[1]
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酶活实验 |
细胞内ROS生成测定[1]
4′- o -甲基白藜芦醇对活性氧生成的影响根据我们之前的研究方法确定。为了定量细胞内ROS水平,RAW264.7巨噬细胞在96孔板中培养24 h,然后用200µg/mL BSA或MB(含或不含10µM 4′- o -甲基白藜芦醇)刺激24 h。培养后抽吸上清,用温PBS洗涤细胞2次。然后用25µM 2’,7’-二氯二氢荧光素(DCFH-DA)在DF10中37℃孵育1 h。之后,用温PBS洗涤细胞两次。最后,在每孔中加入200µL HBSS后,利用酶标仪测定dcfh - da活化细胞在485 nm处发射和528 nm处激发的荧光强度。结果以非糖化BSA的百分比表示。 蛋白质羰基和AOPP水平测定[1] 用200µg/mL BSA或MB(含或不含10µM 4′- o -甲基白藜芦醇)处理24 h后,用匀浆器制备细胞培养物的裂解物。用BCA蛋白测定试剂盒测定总蛋白浓度。蛋白质羰基表示为nmol / mg总蛋白质,由蛋白质羰基测定试剂盒根据制造商的协议测量。高级氧化蛋白产物(AOPP)的含量按照我们之前的研究进行了测定。简单地说,用0、10、20、40、80、100µmol/L氯胺- t绘制标准曲线,用300µL蛋白裂解物进行样品检测。在管中加入75微升1.16 M KI和150微升乙酸,与氯胺- t或样品作为反应物。然后立即用酶标仪在340 nm处测定吸光度。计算氯胺- t的AOPP量,结果显示为每mg总蛋白中氯胺- t当量的nmol。 |
细胞实验 |
RNA的分离与qPCR分析[1]
RAW264.7巨噬细胞(106个细胞/孔)在添加200µg/mL BSA或添加或不添加10µM 4′- o -甲基白藜芦醇的MB的DF10中培养24 h,根据制造商的说明,用标准的TRIzol方法提取总rna。用分光光度计测定提取rna的浓度。用PrimeScript RT试剂试剂盒按照说明书逆转录进行cDNA合成。使用QuantiFast SYBR-Green RT-PCR试剂盒对目的基因进行实时PCR定量。18S表达作为内控。所用正向和反向引物序列见附录A(表A1)。在qPCR仪中使用LightCycler 96的ΔCT方法分析测量值。 NO和IL-1β水平测定[1] RAW264.7巨噬细胞(106个细胞/孔)在添加200µg/mL BSA或MB(含或不含10µM 4′- o -甲基白藜芦醇)的DF10中培养24 h,收集上清液检测一氧化氮(NO)和白细胞介素1β (IL-1β)。采用小鼠NO和IL-1β酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测NO和IL-1β水平。 蛋白的提取与Western Blot分析[1] RAW264.7巨噬细胞(106个细胞/孔)在六孔培养皿中饥饿4小时后,在添加200µg/mL BSA的DF10或添加或不添加10µM 4′- o -甲基白藜芦醇的MB中培养45分钟。然后,用预冷PBS洗涤细胞2次,用200µL RIPA裂解缓冲液在冰上裂解15分钟。裂解液随后转移到2 mL管中,离心(12,000× g, 10分钟,4°C)收集上清。用BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白浓度。SDS-PAGE上每车道共运行30µg蛋白,并将其转移到PVDF膜上。膜在室温下用5%脱脂牛奶封闭1小时,用一抗(ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、p38 MAPK、p-p38 MAPK、p65、p-p65、NLRP3和cleaved caspase-1,比例为1:1000)孵育;RAGE和β-肌动蛋白以1:3000的比例使用,在4°C下轻柔摇晃过夜。用PBST每5分钟洗涤3次后,PVDF膜在室温下用酶标二抗(1:1000)孵育30分钟。最后,用增强化学发光(ECL)试剂显示免疫反应条带,并通过ChemiDoc®MP图像实验室检测。使用图像实验室软件定量波段密度。 |
参考文献 | |
其他信息 |
5-[2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]benzene-1,3-diol is a stilbenoid.
(E)-5-(4-Methoxystyryl)benzene-1,3-diol has been reported in Alpinia hainanensis, Dracaena cochinchinensis, and other organisms with data available. |
分子式 |
C15H14O3
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分子量 |
242.26986
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精确质量 |
242.094
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元素分析 |
C, 74.36; H, 5.82; O, 19.81
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CAS号 |
33626-08-3
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相关CAS号 |
33626-08-3
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PubChem CID |
6255462
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外观&性状 |
White to off-white solid powder
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密度 |
1.252
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沸点 |
446.5±14.0 °C at 760 mmHg
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闪点 |
223.8±20.1 °C
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蒸汽压 |
0.0±1.1 mmHg at 25°C
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折射率 |
1.692
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LogP |
3.62
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tPSA |
49.69
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氢键供体(HBD)数目 |
2
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氢键受体(HBA)数目 |
3
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可旋转键数目(RBC) |
3
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重原子数目 |
18
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分子复杂度/Complexity |
259
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定义原子立体中心数目 |
0
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SMILES |
COC1=CC=C(C=C1)C=CC1=CC(O)=CC(O)=C1
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InChi Key |
IHVRWFJGOIWMGC-NSCUHMNNSA-N
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InChi Code |
InChI=1S/C15H14O3/c1-18-15-6-4-11(5-7-15)2-3-12-8-13(16)10-14(17)9-12/h2-10,16-17H,1H3/b3-2+
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化学名 |
5-[(E)-2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]benzene-1,3-diol
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别名 |
4'-O-Methylresveratrol; 33626-08-3; (E)-5-(4-Methoxystyryl)benzene-1,3-diol; Desoxyrhapontigenin; RESVERATROL 4'-METHYL ETHER; 4'O-Methylresveratrol; 4-Methoxyresveratrol; Deoxyrhapontigenin; 3,5-Dihydroxy-4'-methoxystilbene;
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HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外实验) |
DMSO: 48~50 mg/mL (198.1~206.4 mM)
Ethanol: ~48 mg/mL (~198.1 mM) |
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溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 4.1276 mL | 20.6381 mL | 41.2763 mL | |
5 mM | 0.8255 mL | 4.1276 mL | 8.2553 mL | |
10 mM | 0.4128 mL | 2.0638 mL | 4.1276 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。