| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 5g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The specific molecular target is not specified in the provided texts. In melanoma cells, treatment with 4-Hydroxycoumarin leads to decreased papillin expression, reduced translocation of papillin to focal adhesions, and reduced activation of FAK and Rac-1 [3].
In B16-F10 melanoma cells, 4-Hydroxycoumarin decreases tyrosine phosphorylation of several proteins in a concentration-dependent manner [2]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在丙型肝炎病毒 (HCV) NS3 蛋白的蛋白酶结构域和解旋酶结构域的连接处，发现了一个独特的、高度保守的结合位点。4-苯氧基苄胺是一类新型的直接抗病毒药物，它能与该变构位点结合，稳定 NS3 蛋白的非活性构象，从而抑制其活性 [1]。在 B16-F10 黑色素瘤细胞中，4-羟基香豆素（50、160 或 500 µM）可破坏肌动蛋白细胞骨架，损害应力纤维和片状伪足的形成，并诱导细胞收缩。这种作用具有浓度依赖性，且对肿瘤细胞具有选择性，因为它对 B82 成纤维细胞没有产生显著影响。去除化合物后，该效应可逆[2]。
4-羟基香豆素可浓度依赖性地降低B16-F10细胞与细胞外基质蛋白的黏附。在500 µM浓度下，细胞与纤连蛋白或玻连蛋白的黏附降低约一半。与IV型胶原的黏附降低至五分之一，与层粘连蛋白的黏附降低至对照组的十分之一[2]。 4-羟基香豆素在伤口愈合实验中抑制B16-F10细胞的随机运动（迁移）。浓度为 50 和 160 µM 时部分抑制细胞迁移，而 500 µM 时则完全抑制细胞迁移 [2]。 4-羟基香豆素 在浓度为 50 至 500 µM 的条件下处理 24 小时后，对 B16-F10 细胞或 B82 成纤维细胞的细胞活力没有明显影响。它也没有改变这两种细胞系中的肌动蛋白表达 [2]。 在 B16-F10 细胞中，4-羟基香豆素 以浓度依赖的方式（50-500 µM）降低了几种蛋白质的酪氨酸磷酸化水平。这种效应与细胞骨架紊乱、黏附受损和迁移能力下降相关[2]。体外用4-羟基香豆素处理B16-F10黑色素瘤细胞可降低其转移能力[3]。4-羟基香豆素（500 µM）既不具有细胞抑制作用也不具有细胞毒性，且不影响B16-F10细胞的长期存活[3]。4-羟基香豆素（500 µM）对培养的肝细胞无毒性[3]。4-羟基香豆素（500 µM）对体外培养的近端肾小管LLC-PK1细胞无毒性[3]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在静脉注射B16-F10细胞前7天，对C57BL/6小鼠口服给予4-羟基香豆素（10、20或40 mg/kg/天），可使肺部实验性转移灶的数量减少85%以上[3]。在皮下移植B16-F10肿瘤的C57BL/6小鼠中，口服给予10 mg/kg/天的4-羟基香豆素，可从第22天起缩小肿瘤体积，并显著延长平均生存期（P = 0.02）。更高剂量（20或40 mg/kg/天）对肿瘤体积或生存期无影响。阳性对照环磷酰胺（200 mg/kg，单次腹腔注射）从第16天起缩小了肿瘤体积，但并未改变生存期[3]。
在同一皮下肿瘤模型中，4-羟基香豆素以20或40 mg/kg/天的剂量给药，可使自发性肺转移灶数量减少50%（平均值分别为5.5 ± 1.5和5.8 ± 4.8，而对照组为11.9 ± 6.0）。当剂量为10 mg/kg/天时，这种减少不具有统计学意义（7.0 ± 1.7）[3]。 在静脉注射黑色素瘤细胞之前预防性给予4-羟基香豆素可减少转移灶数量，表明其影响的是实验性转移的早期阶段，而非转移灶的生长[3]。 |
| 细胞实验 |
采用 MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）法评估细胞活力。该方法基于活细胞线粒体对可溶性四唑盐的还原作用。还原产物为不溶性有色甲臜，将其溶解于二甲基亚砜中，并在 570 nm 波长处进行分光光度法测定。还原的甲臜量与活细胞数量成正比 [2]。
为进行形态学和 F-肌动蛋白含量分析，将 Labtek 培养室中处理的细胞用 4% 甲醛 PBS 溶液固定，并用 0.1% Triton X-100 PBS 溶液透化。聚合的肌动蛋白用荧光染料标记的鬼笔环肽染色。采用荧光显微镜观察细胞形态和F-肌动蛋白[2]。 进行细胞与细胞外基质蛋白（人纤连蛋白 (5 µg/ml)、人玻连蛋白 (1 µg/ml)、小鼠IV型胶原蛋白 (20 µg/ml) 或小鼠层粘连蛋白 (10 µg/ml)）的黏附实验。将蛋白吸附于96孔微孔板中，4℃过夜。用热变性牛血清白蛋白（10 mg/ml，溶于PBS）封闭孔板。采用非酶法消化处理后的细胞，重悬后，将10⁴个细胞加入包被的孔中，于37℃孵育30分钟使其黏附。洗涤去除未黏附的细胞，并将剩余细胞固定，用结晶紫染色。在595 nm处测定溶解染料的吸光度。非特异性黏附通过仅包被BSA（<4%）的孔进行评估，并扣除[2]。 细胞迁移通过划痕愈合实验进行研究。过夜培养后，用细胞刮刀在细胞培养物上划出实验性伤口。用PBS冲洗培养物，然后加入含有载体、4-HC或细胞松弛素D的无血清培养基。立即（t = 0）和24小时后使用倒置显微镜拍摄培养物照片[2]。 蛋白质酪氨酸磷酸化分析：将处理后的细胞在冷的裂解缓冲液中裂解。冰上孵育15分钟后，通过离心去除不溶性物质。每条上样量为40 µg总蛋白，经SDS-PAGE分离后转移至尼龙膜上。用抗磷酸酪氨酸（PY）抗体（克隆 PY20，1:500）或抗肌动蛋白（克隆 C11，1:2000）检测细胞提取物，然后进行增强化学发光检测[2]。 |
| 动物实验 |
在实验性转移分析中，通过灌胃法给雄性C57BL/6小鼠连续7天给予4-羟基香豆素（10、20或40 mg/kg/天）。溶剂为0.2%甲基纤维素。第7天，每只小鼠经尾静脉注射8 × 10⁵个未经处理的B16-F10细胞。两周后处死小鼠，切取肺组织计数肺转移瘤[3]。
在存活/自发转移分析中，将2 × 10⁵个B16-F10细胞皮下注射到雄性C57BL/6小鼠体内。两周后，选择肿瘤直径在3-6 mm之间的小鼠。小鼠被分为三组：对照组（0.2%甲基纤维素）、4-羟基香豆素组（10、20或40 mg/kg/天，灌胃给药）和环磷酰胺组（200 mg/kg，单次腹腔注射，阳性对照）。肿瘤大小采用以下公式估算：（长轴）×（短轴）² × 0.52。记录死亡日期以绘制Kaplan-Meier生存曲线。死亡后，切除肺组织以量化肺部自发转移灶的数量[3]。 为进行毒理学评价，健康小鼠连续60天灌胃给予4-羟基香豆素（10、20或40 mg/kg/天）。对照组小鼠接受载体（0.2%甲基纤维素）[3]。 用于电镜观察的小鼠经心脏灌注，灌注液为赞博尼固定液（0.3%苦味酸溶于6.2%中性缓冲甲醛溶液）。解剖的器官（肾脏、肝脏、肺）浸入相同的固定液中，于4℃固定24小时。之后，样品经1%四氧化锇后固定、脱水和包埋。获得60 nm厚的超薄切片，并用透射电镜进行分析[3]。 测定接受4-羟基香豆素（10 mg/kg/天）治疗30天的健康小鼠的柠檬酸盐血浆中的凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血活酶时间（aPTT）。PT采用Quick法测定。通过添加活化剂试剂评估 aPTT；将混合物在 37°C 下孵育 120 秒，然后用 0.02 M CaCl₂ 诱导凝块形成。两种方法均记录凝块形成时间 [3]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
4-羟基香豆素的药代动力学尚不清楚[3]。长期服用4-羟基香豆素（10 mg/kg/天，持续30天）48小时后未观察到抗凝血作用，凝血酶原时间（PT）恢复至对照水平：11.8 ± 0.5 s，对照组为11.2 ± 0.7 s，而4-羟基香豆素组为11.8 ± 0.5 s，这表明该化合物被迅速清除[3]。在体内，结构密切相关的化合物香豆素（1,2-苯并吡喃酮）半衰期较短（在人体内约为1小时），并迅速代谢为羟基化衍生物，包括7-羟基香豆素（主要）和4-羟基香豆素（次要）[2]。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
4-羟基香豆素（20或40 mg/kg/天，持续30-60天）在C57BL/6小鼠中引起剂量和时间依赖性的肝损伤，包括门静脉周围肝细胞的胞质改变。10 mg/kg/天剂量下未观察到肝脏组织学改变。血清γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）水平不受任何剂量的影响[3]。在肾脏中，4-羟基香豆素（20或40 mg/kg/天）从第三周开始使血尿素氮（BUN）水平升高至正常值上限（7-30 mg/dl）以上。组织学分析显示鲍曼囊壁层发生化生，近端小管立方上皮细胞的微绒毛消失。肌酐清除率 (CCR) 和尿 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG) 水平未受影响，表明肾小球或肾小管细胞未受功能性损伤 [3]。
在肺部，所有评估剂量（10、20、40 mg/kg/天）的4-羟基香豆素均诱导克拉拉细胞增生和顶端突起消失，其顶端穹顶状区域自第 30 天起出现渗漏。II 型肺泡细胞的板层小体部分空虚或出现空泡化 [3]。 4-羟基香豆素（10 mg/kg/天，持续 30 天）产生显著的抗凝血作用，使活化部分凝血酶时间 (aPTT) 延长两倍（117.7 ± 21.2 秒 vs. 对照组的 62.8 ± 3.2 秒）。 PT 延长 15 倍以上（>200 秒 vs. 对照组 13.3 ± 1.0 秒）。末次给药后 48 小时，该效应完全消失 [3]。 4-羟基香豆素可在 C67BL/6 小鼠肝脏中生物转化为 3,4-环氧化物，这可能是其毒性的原因 [3]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
4-羟基香豆素类化合物因其生物活性和药理活性，在杂环化合物中占有重要地位。本文综述了2015-2018年间4-羟基香豆素在多组分反应中合成各种杂环化合物的最新应用。4-羟基香豆素最显著的反应活性在于其3位碳原子的亲核性，该位点可发生曼尼希反应和偶联反应等反应[1]。体外研究表明，4-羟基香豆素对黑色素瘤细胞具有破坏肌动蛋白细胞骨架、降低细胞黏附性和迁移能力的作用，提示其可能有助于预防黑色素瘤转移，并有望作为黑色素瘤的辅助治疗药物[2]。
体内4-羟基香豆素的抗转移作用支持了香豆素可能作为前药发挥作用的假设，其羟基化代谢物（如4-HC）才是活性成分[2][3]。 阐明4-羟基香豆素抗转移和抗肿瘤作用的分子机制，可能有助于开发结构和/或机制相关的药物，用于预防转移。4-羟基香豆素的治疗指数较窄，限制了其作为黑色素瘤辅助治疗药物的应用[3]。 |
| 分子式 |
C13H13NO
|
|---|---|
| 分子量 |
199.2484
|
| 精确质量 |
199.099
|
| CAS号 |
107622-80-0
|
| PubChem CID |
2760343
|
| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
|
| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
319.6±25.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
149.5±16.4 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.595
|
| LogP |
3.08
|
| tPSA |
35.25
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
15
|
| 分子复杂度/Complexity |
169
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C([H])([H])N([H])[H]
|
| InChi Key |
CCAZAGUSBMVSAR-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C13H13NO/c14-10-11-6-8-13(9-7-11)15-12-4-2-1-3-5-12/h1-9H,10,14H2
|
| 化学名 |
(4-phenoxyphenyl)methanamine
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~12.5 mg/mL (~62.74 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (6.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 1.25 mg/mL (6.27 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (6.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.0188 mL | 25.0941 mL | 50.1882 mL | |
| 5 mM | 1.0038 mL | 5.0188 mL | 10.0376 mL | |
| 10 mM | 0.5019 mL | 2.5094 mL | 5.0188 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
