| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
In life science research, 4-POBN primarily functions as a free radical detection reagent and does not possess a conventional "drug target"; instead, it directly reacts with reactive oxygen species and carbon-centered radicals via addition reactions to form spin adducts, enabling the identification and semi-quantification of various radical sources. Meanwhile, 4-POBN (with the CAS number 5351-17-7 when used as the MPO inhibitor 4-aminobenzohydrazide, noting that CAS number confusion exists in the literature) is also a potent irreversible inhibitor of myeloperoxidase, with an IC50 of 0.3 µM against this enzyme. It irreversibly binds to the heme cofactor in the MPO active site, blocking the production of oxidative species such as hypochlorous acid, thus demonstrating therapeutic potential in inflammatory diseases including subacute stroke.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外实验中，4-POBN 可作为自旋捕获剂。在与 NADPH 再生系统、乙醇和 4-POBN 共同孵育的肝微粒体中，可以检测到 4-POBN 的 α-羟乙基自由基加合物的特征性 ESR 信号；[¹⁷O] 标记技术可以进一步区分超氧阴离子和羟基自由基加合物。在细胞水平上，4-POBN 可保护 CYP2E1 过表达的 HepG2 细胞免受花生四烯酸诱导的氧化损伤，提高细胞活力并减少细胞凋亡和坏死。在分离的大鼠肝细胞中，高浓度的 PBN 会适度损害细胞完整性，而 4-POBN 在相同条件下未表现出类似的细胞毒性，表明其具有相对良好的细胞相容性。作为一种髓过氧化物酶（MPO）抑制剂，4-POBN（CAS 5351-17-7）是一种不可逆抑制剂，能够完全阻断MPO的过氧化物酶循环活性。
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| 酶活实验 |
体外酶活性研究主要集中于4-POBN对髓过氧化物酶（MPO）的抑制作用。以4-POBN（CAS 5351-17-7）为测试化合物，将重组人髓过氧化物酶（MPO）与H₂O₂和显色底物（例如Amplex Red、TMB或牛磺酸）孵育，并通过监测氧化产物的生成速率来评估MPO活性。将4-POBN溶解于合适的有机溶剂（例如DMSO）中，并稀释至一系列目标浓度（例如0–10 µM）。将不同浓度的4-POBN与MPO预孵育，加入H₂O₂启动反应，并使用紫外-可见分光光度计或荧光微孔板读数仪动态监测反应产物，以计算IC₅₀值。洗脱或稀释实验可以进一步验证抑制作用的可逆性或不可逆性。在经典的自旋捕获实验中，典型条件包括将 4-POBN（例如，20 mM）与过氧化物酶体系（例如，辣根过氧化物酶 + H₂O₂）和自由基源（例如，甲酸钠）混合；然后通过 ESR 光谱检测自由基加合物的特征超精细分裂模式，以鉴定捕获的物种。
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| 细胞实验 |
在自由基研究中使用 4-POBN 的典型细胞实验方案包括以下步骤：
(1) 细胞接种和培养：将靶细胞（例如，过表达 CYP2E1 的 HepG2 细胞）接种到多孔板中，并在完全培养基中培养至约 70-80% 汇合度； (2) 处理：将 4-POBN 溶解于 PBS 或细胞培养基中，并与细胞预孵育（通常为 0.5-20 mM，预孵育 30-60 分钟），然后暴露于自由基诱导剂（例如，花生四烯酸、过氧化氢或甲酸钠）以模拟氧化应激； (3) 终点测量：通过 CCK-8/MTT 法评估细胞活力，而通过 Annexin V-FITC/PI 双染结合流式细胞术评估细胞凋亡/坏死；使用 DCFH-DA 探针测量细胞内总 ROS 水平； (4) 自旋捕获 ESR 分析：裂解细胞并与 4-POBN 孵育进行自旋捕获反应，通过分析 ESR 光谱鉴定生成的自由基类型。所有实验均包括载体处理的对照组和多个 4-POBN 浓度组，每个条件至少设置三个复孔以确保统计学有效性。 |
| 动物实验 |
使用 4-POBN 的代表性体内动物实验方案如下：（1）给药：将 Fischer 雄性大鼠（300-400 g）或小鼠在标准饲养条件下适应环境，然后腹腔注射（ip）4-POBN（通常为 1.5 g/kg），可选择性地与自由基诱导剂（如甲酸钠（2 g/kg ip）或乙醇）共同给药以诱发自由基生成；
（2）样本采集：在指定时间点（例如，给药后 1 小时或每隔 20 分钟），采集胆汁、血液或靶组织（例如，肝脏）进行后续的 ESR 分析； (3) 自由基加合物检测：将胆汁或组织匀浆进行处理并装入毛细管中，在室温或低温下进行电子顺磁共振(ESR)光谱分析，以检测自由基加合物的特征超精细分裂模式（例如，具有aN ≈ 15.71 G 和 aβH ≈ 2.90 G 的六线信号）； (4) 为了进一步鉴定特定自由基加合物的结构，可采用高效液相色谱-电子顺磁共振(HPLC-ESR)联用技术。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
4-POBN的药代动力学研究主要集中在其体内分布上。在雄性大鼠中，腹腔注射等摩尔剂量的4-POBN（165 mg/kg）和PBN（150 mg/kg）后，采用微透析取样结合高效液相色谱（HPLC）分析，结果显示4-POBN的稳态静脉血浓度为210 ± 10 µM，稳态脑组织浓度为149 ± 9 µM。与PBN（脑组织浓度为331 ± 25 µM）相比，4-POBN的脑组织渗透率显著降低（p < 0.05），这归因于4-POBN更高的亲水性。此外，4-POBN还表现出显著的胆汁排泄。腹腔注射后一小时内，即可在大鼠胆汁中检测到4-POBN自由基加合物的强六线ESR信号，表明4-POBN至少部分通过肝胆途径代谢和消除。4-POBN加合物一旦形成，在还原条件下相对稳定，因此可以在体外和体内条件下进行更长时间的检测。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外和体内毒性研究表明，4-POBN具有相对良好的安全性。在分离的大鼠肝细胞中，高浓度的PBN显著损害肝细胞完整性（降低细胞活力和GSH水平），而4-POBN在相同的实验条件下未表现出类似的肝细胞损伤，且不影响细胞内ATP或细胞色素P-450的含量，表明其肝细胞毒性远低于PBN。在内毒素诱导的内毒素血症大鼠模型中，腹腔注射4-POBN（0.85 M，10 ml/kg）7天后，混合品系大鼠的存活率为42%（所有仅接受内毒素注射的载体对照组动物均在1天内死亡），表明4-POBN在体内可保护机体免受全身炎症损伤。在离体灌注去甲肾上腺素预收缩的大鼠心脏中，4-POBN 表现出剂量依赖性的正性血管舒张作用（冠状动脉血流量增加 40%），而在较高浓度下则产生轻微的负性肌力作用；在所研究的剂量范围内，它对心率（正性变时性作用）没有显著影响。值得注意的是，早期研究表明，某些硝酮自旋捕获剂可能是生物环境中 NO 的来源，这表明在长期应用中应考虑这种潜在影响。
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C7H9N3O
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|---|---|
| 分子量 |
151.17
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| 精确质量 |
151.074
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| CAS号 |
5351-17-7
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| PubChem CID |
21450
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| 外观&性状 |
Light yellow to brown solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
225-227 °C(lit.)
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| 折射率 |
1.641
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| LogP |
-0.75
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| tPSA |
81.14
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
11
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| 分子复杂度/Complexity |
141
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WPBZMCGPFHZRHJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H9N3O/c8-6-3-1-5(2-4-6)7(11)10-9/h1-4H,8-9H2,(H,10,11)
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| 化学名 |
4-Aminobenzoic acid hydrazide
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| 别名 |
4 ABAH 4-POBN 4POBN 4 POBN4-ABAH NSC-6404-AminobenzohydrazideMyeloperoxidase Inhibitor 1 NSC640 NSC 640 4ABAH
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 25 mg/mL (~165.38 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (6.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (6.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 6.6151 mL | 33.0753 mL | 66.1507 mL | |
| 5 mM | 1.3230 mL | 6.6151 mL | 13.2301 mL | |
| 10 mM | 0.6615 mL | 3.3075 mL | 6.6151 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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