| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Melatonin MT2 receptor (Ki = 1.58 nM for human recombinant Mel1b receptor) [2]
Melatonin MT1 receptor (Ki = 466 nM for human recombinant Mel1a receptor) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在有或无褪黑素存在的情况下，氨基四氢乙烯4-P-PDOT (10 mM) 均不改变福斯克林在CHO-mt1细胞中诱导的环磷酸腺苷(cAMP)水平。另一方面，4-P-PDOT是一种激动剂，在CHO-mt2细胞存在的情况下，可浓度依赖性地抑制福斯克林诱导的cAMP，其pEC50值为8.72，实际活性为0.86 [1]。细胞活力检测[5] Cell
它竞争性拮抗褪黑素对兔视网膜钙依赖性[³H]多巴胺释放的抑制作用，其KB值为9.3 nM，pA2值为8.03。 [2] 在所测试的浓度（100、1000 和 10000 nM）下，4P-PDOT 在兔视网膜 [³H]多巴胺释放试验中没有内在效力（无激动活性）。[2] 在人结直肠癌 HT-29 细胞和宫颈癌 HeLa 细胞中，用 50 µM 4P-PDOT 预处理 30 分钟并不能逆转褪黑素对化疗（顺铂或 5-氟尿嘧啶）诱导的细胞毒性、caspase-3 激活或细胞凋亡的增强作用。[4] 用 1.0 mg/kg 4P-PDOT 预处理可拮抗褪黑素介导的 klotho 突变小鼠海马中 ERK 磷酸化水平降低的减弱作用。 [5] 预先给予0.5或1.0 mg/kg 4P-PDOT可拮抗褪黑素介导的klotho突变小鼠海马中Nrf2核转位、Nrf2 DNA结合活性以及GCLc/GCLm mRNA表达的降低。[5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
静脉注射 4-P-PDOT（0.5-1.0 mg/kg；klotho 突变）显著抵消了褪黑素介导的抗氧化作用，并显著逆转了 GSH 相关参数值的波动。4-P-PDOT 治疗显著改善了褪黑素治疗的 klotho 突变小鼠的记忆功能。4-P-PDOT 还可以控制 klotho 突变小鼠海马区 Nrf2 和磷酸化 ERK 的表达，这被称为褪黑素介导的信号衰减。在表现出记忆障碍的 klotho 突变小鼠中，腹腔注射褪黑素（20 mg/kg）可显著减轻记忆缺陷。在物体识别测试和被动回避测试中，预先静脉注射 1.0 mg/kg 4P-PDOT 可显著逆转褪黑素的这种记忆增强作用。 [5]在Klotho突变小鼠中，褪黑素（20 mg/kg，腹腔注射）对海马氧化应激标志物（突触体活性氧、丙二醛、蛋白质羰基）升高和谷胱甘肽系统稳态失衡（GSH水平和GSH/GSSG比值降低）的保护作用，会被预先静脉注射1.0 mg/kg 4P-PDOT显著抵消。[5]
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| 酶活实验 |
对人重组褪黑素受体 Mel1a 和 Mel1b 进行竞争性结合实验。将表达这些受体的 COS-7 细胞裂解液与 80 pM 放射性配体 2-[¹²⁵I]-碘褪黑素以及不同浓度的测试化合物（0.1 pM - 100 µM）在 25°C 下孵育 1.5 小时。孵育结束后，通过玻璃纤维滤膜进行快速真空过滤终止反应。使用 1 µM 褪黑素确定特异性结合。采用 Cheng 和 Prusoff 的方法，根据竞争曲线获得的 IC50 值计算平衡解离常数（Ki 值）。在这些条件下，4P-PDOT 对 Mel1a 受体的 Ki 值为 466 nM，对 Mel1b 受体的 Ki 值为 1.58 nM。[2]
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[5] 细胞
细胞类型： HT-29 和 HeLa 细胞。 测试浓度： 50 µM 孵育时间： 30 分钟 实验结果： 对褪黑素诱导的细胞活力影响甚微。 使用 MTT 法评估细胞活力。将 HT-29 和 HeLa 细胞以每孔 0.1 x 10⁶ 个细胞的密度接种于 12 孔板中。细胞用 50 µM 4P-PDOT 预处理 30 分钟，然后在有或无 1 mM 褪黑素的情况下，与化疗药物（20 µM 顺铂或 1 mM 5-氟尿嘧啶）孵育 48 小时。处理后，向每个孔中加入 MTT，并在 37°C 下孵育 60 分钟。弃去上清液，加入 DMSO 溶解甲臜晶体。在 490 nm 和 650 nm（参考波长）处测量光密度。数据以对照组（未处理细胞）的百分比表示。[4] 使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。用药物预处理 HT-29 和 HeLa 细胞（1.2 x 10⁶ 个细胞/mL），用胰蛋白酶消化收集细胞，洗涤并离心。将沉淀物重悬于含有 Annexin V-FITC 的结合缓冲液中，孵育 10 分钟，洗涤，然后重悬于含有碘化丙啶 (PI) 的结合缓冲液中。立即用流式细胞仪分析细胞，使用 FL-1（Annexin V-FITC）和 FL-3（PI）检测器分析 10,000 个事件。 [4] 测定 caspase-3 活性。将刺激或静息细胞（1.2 x 10⁶ 个细胞/mL）进行超声破碎，并将细胞裂解液与底物溶液（20 mM HEPES，pH 7.4，2 mM EDTA，0.1% CHAPS，5 mM DTT 和 8.25 µM caspase-3 底物 AC-DEVD-AMC）在 37°C 下孵育 1 小时。使用微孔板读数仪在激发波长 360 nm 和发射波长 460 nm 下测量荧光底物的裂解情况，从而计算活性。[4] 对小鼠海马组织进行 Western blot 分析。将组织在含有 Tris-HCl、SDS、EGTA、EDTA、甘油和磷酸酶/蛋白酶抑制剂混合物的裂解缓冲液中匀浆。将裂解液离心，取上清液进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析，使用抗磷酸化ERK抗体和抗ERK抗体。[5] 分析Nrf2的核转位。使用商业试剂盒提取海马裂解液的核组分和胞质组分。将提取的组分进行SDS-PAGE电泳，并用抗Nrf2抗体进行免疫印迹分析。分别使用抗组蛋白H4和抗β-肌动蛋白抗体作为核组分和胞质组分的上样对照。[5] 使用商业化的TransAM Nrf2转录因子ELISA试剂盒测定Nrf2的DNA结合活性。将核蛋白提取物（10 µg）加入包被有含ARE共识结合位点寡核苷酸的孔中。孵育和洗涤后，将孔板与抗Nrf2抗体孵育，随后与二抗孵育。启动比色反应，并在 450 nm 处测量吸光度。[5] 进行 RT-PCR 以评估 GCLc 和 GCLm 的 mRNA 表达。从海马组织中分离总 RNA，并进行逆转录。PCR 产物在含有溴化乙锭的 2% 琼脂糖凝胶上进行分离，并在紫外光下显影。[5] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：用褪黑素治疗Klotho突变小鼠[2]
剂量：0.5 mg/kg 或 1.0 mg/kg。 给药途径：静脉注射。 实验结果：显著逆转了核转位、Nrf2 DNA结合活性和GCL mRNA表达降低[2]。褪黑素介导的抗氧化作用。显著逆转了这些GSH相关参数水平的变化。显著逆转了褪黑素治疗的Klotho突变小鼠的记忆功能。 在Klotho突变小鼠（一种源自C3H/Hej背景的衰老遗传模型）的研究中，4P-PDOT溶解于20% DMSO中，然后用无菌生理盐水稀释。在行为学测试（新物体识别测试和被动回避测试）中，小鼠在记忆测试前5分钟静脉注射（iv），剂量为0.5或1.0 mg/kg。[5] 小鼠从出生后第35天（PND 35）至第51天（PND 51）连续17天，每天两次腹腔注射褪黑素（10、20或30 mg/kg）。在行为学测试日（PND 52、53用于新物体识别测试；PND 54、55用于被动回避测试），小鼠在测试前45分钟额外注射一次褪黑素。4P-PDOT在记忆测试前5分钟给药。小鼠在PND 55的被动回避测试保持期结束后30分钟处死，用于神经化学分析。 [5] 在体外细胞研究中，HT-29 和 HeLa 细胞先用 50 µM 4P-PDOT 预处理 30 分钟，然后再与褪黑素和/或化疗药物（顺铂或 5-氟尿嘧啶）孵育 48 小时。[4] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
N-(4-苯基-1,2,3,4-四氢萘-2-基)丙酰胺是四氢萘类化合物的成员。
4P-PDOT（4-苯基-2-丙酰胺基四氢萘）是一种非吲哚类竞争性褪黑素受体拮抗剂。它是MT2（Mel1b）褪黑素受体亚型的选择性拮抗剂，具有很高的选择性（基于Ki值，对Mel1b的亲和力比对Mel1a高295倍：466 nM vs 1.58 nM）。 [2] 4P-PDOT 的选择性亲和力比 (Mel1a/Mel1b) 大于 100。[2] 在癌症研究中，用 4P-PDOT（一种 MT2 拮抗剂）预处理并不能阻断褪黑素与化疗药物（顺铂、5-氟尿嘧啶）在 HT-29 和 HeLa 细胞中的协同促凋亡和细胞毒性作用，这表明这些作用并非通过 MT2 受体介导。[4] 在一项关于认知障碍的研究中，褪黑素对 klotho 突变小鼠记忆缺陷和氧化应激的保护作用是通过 MT2 受体介导的，因为这些作用会被选择性 MT2 拮抗剂 4P-PDOT 所抵消。 [5] 提出的分子信号通路涉及褪黑素激活MT2受体，导致ERK磷酸化，进而促进Nrf2核转位和DNA结合活性。这上调GCLc和GCLm的表达，恢复GSH水平并降低氧化应激，最终改善记忆功能。[5] |
| 分子式 |
C19H21NO
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|---|---|
| 分子量 |
279.383
|
| 精确质量 |
279.162
|
| CAS号 |
134865-74-0
|
| PubChem CID |
3976006
|
| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.11g/cm3
|
| 沸点 |
480.1ºC at 760 mmHg
|
| 闪点 |
292ºC
|
| 蒸汽压 |
2.22E-09mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.595
|
| LogP |
4.05
|
| tPSA |
29.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
1
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
348
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
RCYLUNPFECYGDW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H21NO/c1-2-19(21)20-16-12-15-10-6-7-11-17(15)18(13-16)14-8-4-3-5-9-14/h3-11,16,18H,2,12-13H2,1H3,(H,20,21)
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| 化学名 |
cis-N-(4-phenyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-yl)propanamide
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| 别名 |
4P-PDOT 4PPDOTAH-0244-P-PDOT 4-phenyl-2- propionamidotetralin
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~41.67 mg/mL (~149.15 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 4.17 mg/mL (14.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 41.7mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 4.17 mg/mL (14.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 41.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5794 mL | 17.8968 mL | 35.7935 mL | |
| 5 mM | 0.7159 mL | 3.5794 mL | 7.1587 mL | |
| 10 mM | 0.3579 mL | 1.7897 mL | 3.5794 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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