5(6)-FITC 中文名称: 异硫氰酸荧光素

别名: 异硫氰酸荧光素;5(6)-异硫氰酸荧光素;4’(或5’)-异硫氰酸荧烷;异硫荧光素;异硫氰酸荧光素(5-,6-异构体混合物); Fluorescein Isothiocyanate (mixture of 5- and 6- isomers) 异硫氰酸荧光素(5-,6-异构体混合物);Fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素;异硫氰酸荧光素(FITC);异硫氰酸荧光素(FITC),BR;异硫氰酸荧光素5,6-FITC;4'(或5')-异硫氰酸荧烷;5(6)-异硫氰酸荧光素,4'(或5')-异硫氰酸荧烷; 异硫氰酸荧光素 (5-,6-异构体混合物)

目录号: V31124 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

5(6)-FITC（异硫氰酸荧光素）是荧光素染料的胺反应衍生物，在荧光显微镜、流式细胞术和基于免疫荧光的测定（例如蛋白质印迹和 ELISA）、作为抗体标记和其他检测中具有广泛的应用。探针。

5(6)-FITC CAS号: 27072-45-3
产品类别: New8

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
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产品描述

5(6)-FITC（异硫氰酸荧光素）是荧光素染料的胺反应衍生物，广泛应用于荧光显微镜、流式细胞术和基于免疫荧光的测定（例如蛋白质印迹和 ELISA），可作为标记抗体和其他探针。

生物活性&实验参考方法

细胞实验	- 抗体标记实验：抗体在碳酸盐缓冲液（pH 9.0）中透析调节pH值。5(6)-荧光素异硫氰酸酯（5(6)-FITC）溶解于无水溶剂，按抗体:FITC摩尔比1:20–1:50逐滴加入抗体溶液，4°C避光孵育4–6小时后，通过凝胶过滤柱分离标记抗体与游离的5(6)-FITC[1] - Fab'片段标记实验：制备含单个游离巯基的Fab'片段，将5(6)-FITC活化生成巯基反应性衍生物，与Fab'片段在磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中25°C避光孵育2小时。透析去除未结合的5(6)-FITC，获得保留巯基的FITC标记Fab'[2] - DNA荧光检测实验：将5(6)-FITC偶联至DNA引物或核苷酸，标记后的DNA样品进行自动化序列分析，通过荧光检测器检测5(6)-FITC发出的荧光信号（激发波长~495 nm，发射波长~520 nm），进而确定DNA序列[3]
药代性质 (ADME/PK)	代谢/代谢物氰化物可通过口服、吸入和皮肤接触迅速吸收并分布于全身。氰化物主要通过硫氰酸酶或3-巯基丙酮酸硫转移酶代谢为硫氰酸盐。氰化物代谢物经尿液排出。(L96)
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	毒性概述氰化物是电子传递链第四复合物（位于真核细胞线粒体膜上）中细胞色素c氧化酶的抑制剂。它与该酶中的三价铁原子形成复合物。氰化物与该细胞色素的结合会阻止电子从细胞色素c氧化酶传递到氧气。结果，电子传递链被破坏，细胞无法再进行有氧呼吸产生ATP供能。主要依赖有氧呼吸的组织，例如中枢神经系统和心脏，尤其容易受到影响。已知氰化物还可通过与过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、高铁血红蛋白、羟钴胺素、磷酸酶、酪氨酸酶、抗坏血酸氧化酶、黄嘌呤氧化酶、琥珀酸脱氢酶和铜/锌超氧化物歧化酶结合而产生一些毒性作用。氰化物与高铁血红蛋白中的铁离子结合，形成无活性的氰化高铁血红蛋白。(L97)
参考文献	[1]. Goding JW. Conjugation of antibodies with fluorochromes: modifications to the standard methods. J Immunol Methods. 1976;13(3-4):215-26. [2]. Fluorescein labeling of Fab' while preserving single thiol. Anal Biochem. 1988 Aug 15;173(1):59-63. [3]. Fluorescence detection in automated DNA sequence analysis. Nature. 1986 Jun 12-18;321(6071):674-9.
其他信息	5-异硫氰酸荧光素是异硫氰酸荧光素的5-异构体。它是一种可与组织和蛋白质偶联的荧光探针；可用作荧光抗体染色以及蛋白质和氨基酸结合技术的标记物。异硫氰酸荧光素是一种由荧光素衍生的含氰化合物。它用于流式细胞术。(L552) 可与组织和蛋白质偶联的荧光探针。它被用作荧光抗体染色程序以及蛋白质和氨基酸结合技术中的标记物。 - 5(6)-FITC（5(6)-异硫氰酸荧光素）是一种具有荧光素核心结构的荧光标记试剂，以5-异构体和6-异构体的混合物形式存在[1][2][3] - 其主要功能是通过异硫氰酸酯基团（-NCS）与靶分子的氨基或巯基反应，从而与生物分子（抗体、Fab'片段、DNA等）偶联[1][2][3] - 它在激发波长~495 nm和发射波长~520 nm处具有强烈的荧光，能够灵敏地检测标记的生物分子[3]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C21H11NO5S
分子量	389.3807
精确质量	389.035
CAS号	27072-45-3
相关CAS号	63469-13-6 (hydrochloride)
PubChem CID	18730
外观&性状	Yellow to orange solid powder
密度	1.5±0.1 g/cm3
沸点	708.6±60.0 °C at 760 mmHg
熔点	>360ºC(lit.)
闪点	382.4±32.9 °C
蒸汽压	0.0±2.3 mmHg at 25°C
折射率	1.754
LogP	4
tPSA	120.44
氢键供体(HBD)数目	2
氢键受体(HBA)数目	7
可旋转键数目(RBC)	1
重原子数目	28
分子复杂度/Complexity	668
定义原子立体中心数目	0
InChi Key	MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N
InChi Code	InChI=1S/C21H11NO5S/c23-12-2-5-16-18(8-12)26-19-9-13(24)3-6-17(19)21(16)15-4-1-11(22-10-28)7-14(15)20(25)27-21/h1-9,23-24H
化学名	3',6'-dihydroxy-6-isothiocyanatospiro[2-benzofuran-3,9'-xanthene]-1-one
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意：本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO : ≥ 156 mg/mL (~400.64 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO : ≥ 156 mg/mL (~400.64 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.5682 mL	12.8409 mL	25.6819 mL
	5 mM	0.5136 mL	2.5682 mL	5.1364 mL
	10 mM	0.2568 mL	1.2841 mL	2.5682 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。