| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
5-FAM itself does not have a specific biological target. As a fluorescent dye, its "targets" are specific functional groups (such as primary amines -NH₂ or thiols -SH) present in molecules, to which it forms stable covalent bonds (e.g., amide or disulfide bonds) for labeling purposes. It can label amine-containing biomolecules following carbodiimide activation (e.g., with EDC/NHS) of its carboxyl group.
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| 体外研究 (In Vitro) |
5-FAM 包含一个羧酸基团，当其与伯胺接触时，会被碳二亚胺活化。荧光素是目前最常用的生物分子荧光衍生化试剂。除了具有优异的荧光量子产率、良好的水溶性和相对较高的吸收率外，荧光素的激发波长最大值与氩离子激光器的 488 nm 光谱线非常接近 [1]。体外活性评估侧重于其作为标记试剂的有效性，而非生物活性。5-FAM 标记的分子可以通过荧光显微镜和流式细胞术等技术进行可视化和追踪。一项研究在 MMP-9 高通量抗癌活性检测中使用了 5-FAM 标记的肽底物。此外，5-羧基荧光素二乙酸酯 (5-CFDA) 可被细胞内酯酶水解生成荧光 5-FAM，该过程可用于评估细胞活力。它具有优异的荧光量子产率、良好的水溶性以及与氩离子激光器488 nm谱线高度匹配的激发波长最大值等优点。
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| 体内研究 (In Vivo) |
5-FAM 通常不推荐用于体内成像。对于大多数体内应用，由于近红外染料具有更优异的组织穿透性，因此是更优的选择。体内研究主要将 5-FAM 用作示踪剂，以研究其在囊泡磷脂凝胶 (VPG) 等药物递送系统中的缓释特性。例如，一项研究表明，封装在 VPG 中的 5-FAM 标记的胸腺五肽 (5-FAM-TP5) 在皮下注射后可持续释放长达 216 小时。
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| 酶活实验 |
使用含有 5-FAM（供体）和 QXL520（受体）的肽底物。肽被 MMP-9 切割后，5-FAM 的荧光被回收，并使用多孔板读数仪在激发/发射波长为 485 nm / 525 nm 处进行检测。[1]
对于在羊皮纸上进行喷墨打印，使用荧光显微镜在激发/发射波长为 485 nm / 525 nm 处测量 5-FAM 的荧光。图像使用 MetaMorph 软件进行分析。[1] |
| 细胞实验 |
用于追踪标记分子的细胞摄取和分布。基本流程如下：
1. 细胞制备：将细胞接种到合适的培养皿（例如共聚焦培养皿）中，并培养至所需密度。 2. 标记分子处理：用预先用 5-FAM 标记的目标分子（例如 siRNA、肽或抗体）处理细胞。通常可在 4 小时内观察到荧光信号。 3. 孵育：在细胞培养箱中孵育 1-24 小时，具体时间取决于目标分子的摄取速率。 4. 洗涤和固定（可选）：用 PBS 洗涤细胞以去除未结合或游离的标记物。如果需要成像，则用 4% 多聚甲醛固定。 5. 检测：使用荧光显微镜（FITC 通道）、流式细胞仪或荧光酶标仪进行观察。使用约 490-495 nm 的激发波长，并检测约 520 nm 的绿色发射光。 |
| 动物实验 |
主要用于研究药物递送系统的药代动力学，而非评估其直接体内活性。以皮下注射为例：
1. 动物准备：选择合适的实验小鼠品系。 2. 给药：通过皮下注射给药含有 5-FAM 标记药物的制剂（例如，5-FAM-TP5 溶液或 VPGs 凝胶）。 3. 样品采集：在预定的时间点（例如，注射后 0.5 小时至数天）采集血样或解剖组织。 4. 样品处理：处理血样以获得血浆，并使用蛋白质沉淀等方法提取 5-FAM 标记化合物。 5. 检测和分析：使用荧光分光光度计或液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 定量样品中标记化合物的浓度。生成浓度-时间曲线并计算药代动力学参数。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
5-FAM 自身的药代动力学常被用作评价其药物递送系统的参考。研究表明，5-FAM 通常清除迅速。一项在小鼠体内比较游离 5-FAM-TP5 溶液与囊泡磷脂凝胶 (VPGs) 制剂的研究中，游离 5-FAM-TP5 溶液表现出快速的药代动力学特征，达峰时间 (Tmax) 为 0.5 小时，半衰期 (t₁/₂) 为 2.69 小时。相比之下，VPGs 制剂实现了显著的缓释，将半衰期延长至 114 小时，并将平均滞留时间 (MRT) 增加至 190 小时以上。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据供应商提供的安全数据表，5-FAM 被归类为有害物质 (Xn)。然而，文献报道，在常用浓度（例如，用于细胞标记的 1-10 µM）下，其细胞毒性较低。虽然它具有刺激性，需要采取标准的实验室安全预防措施（例如，佩戴手套、实验服和护目镜），但它并非急性毒性化合物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
5-羧基荧光素是一种单羧酸，可用作荧光染料，其结构与荧光素（内酯形式）类似。
5-FAM（5-羧基荧光素）作为FRET肽底物中的荧光供体。该肽序列为Pro-Leu-Gly-Cys-His-Ala-Arg-Lys，其中5-FAM连接在赖氨酸残基上，QXL520（受体）连接在N端。MMP-9可特异性地在Gly-Cys键处切割该肽，导致供体和受体分离，从而增强5-FAM的荧光强度。[1] |
| 分子式 |
C21H12O7
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|---|---|
| 分子量 |
376.32
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| 精确质量 |
376.058
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| CAS号 |
76823-03-5
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| 相关CAS号 |
5-FAM SE;92557-80-7
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| PubChem CID |
123755
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
725.2±60.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
368-372°C
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| 闪点 |
266.9±26.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.816
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| LogP |
2.62
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| tPSA |
113.29
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
637
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
NJYVEMPWNAYQQN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H12O7/c22-11-2-5-15-17(8-11)27-18-9-12(23)3-6-16(18)21(15)14-4-1-10(19(24)25)7-13(14)20(26)28-21/h1-9,22-23H,(H,24,25)
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| 化学名 |
5-Carboxyfluorescein 3',6'-Dihydroxy-3-oxo-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene]-5-carboxylic acid
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| 别名 |
5-FAM 5-Carboxyfluorescein 5 Carboxyfluorescein 5Carboxyfluorescein5 FAM 5FAM
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 31 mg/mL (~82.38 mM)
H2O : ~1 mg/mL (~2.66 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6573 mL | 13.2866 mL | 26.5731 mL | |
| 5 mM | 0.5315 mL | 2.6573 mL | 5.3146 mL | |
| 10 mM | 0.2657 mL | 1.3287 mL | 2.6573 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03850132 | COMPLETED | Behavioral: FAM-SOTC-PL | Bereavement | University of Iceland | 2014-07-27 | Not Applicable |
| NCT02815462 | WITHDRAWN | Other: FAMFACESG Other: Control Other: FAMFACESG |
Patient Readmission | Singapore General Hospital | 2016-08 | Not Applicable |
| NCT03901027 | COMPLETED | Behavioral: Therapeutic Conversation Interventions | Chronic Illnesses | University of Iceland | 2015-03-01 | Not Applicable |
| NCT06114186 | RECRUITING | Device: FAM intervention consisting of a Follower of glucose data, Action Plan, and Remote Monitoring of glucose data Other: standard of care |
Type 1 Diabetes | University of Minnesota | 2024-01-16 | Early Phase 1 |
| NCT04339465 | UNKNOWN STATUS | Behavioral: CARE-FAM Behavioral: WEP-CARE |
Rare Diseases | Silke Wiegand-Grefe, Prof. Dr. | 2019-01-01 | Not Applicable |
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