7-Methoxyisoflavone

目录号: V32481 纯度: ≥98%
7-Methoxyisoflavone 是一种异黄酮类似物,也是腺苷单磷酸激活蛋白激酶 (AMPK) 的激活剂。
7-Methoxyisoflavone CAS号: 1621-56-3
产品类别: New2
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产品描述
7-Methoxyisoflavone 是一种异黄酮类似物,也是腺苷单磷酸激活蛋白激酶 (AMPK) 的激活剂。
生物活性&实验参考方法
靶点
7-Methoxyisoflavone is an isoflavone derivative and an activator of adenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK). Serum-induced reduction in AMPK phosphorylation is avoided when serum-starved cells are fed with 10% FBS in the presence of 7-methoxyisoflavone [1].
体外研究 (In Vitro)
7-Methoxyisoflavone 是一种异黄酮衍生物,也是腺苷单磷酸激活蛋白激酶 (AMPK) 的激活剂。当血清饥饿细胞在 7-甲氧基异黄酮存在的情况下用 10% FBS 喂养时,可以避免血清诱导的 AMPK 磷酸化降低 [1]。
在使用重组人AMPK(α1β1γ1)的体外激酶实验中,浓度为40 µM的7-Methoxyisoflavone使相对AMPK活性达到108%(在37个测试的异黄酮中最高,与7-羟基异黄酮并列),表明它是一种AMPK激活剂。活性是相对于100%磷酸化对照来测量的。 [1]
对血清饥饿的3T3L1前脂肪细胞进行Western blot分析以确认AMPK激活。血清饥饿24小时增加了AMPK在Thr172位的磷酸化。随后用10% FBS处理30分钟降低了这种磷酸化。然而,用10% FBS和40 µM 7-Methoxyisoflavone共同处理,阻止了血清诱导的AMPK磷酸化下降,在细胞水平证实了其AMPK激活作用。 [1]
进行了计算机模拟对接研究以阐明7-Methoxyisoflavone与AMPK的分子结合模式。使用人AMPK结构(PDB:4cfe)进行柔性对接。分析表明,7-Methoxyisoflavone-AMPK复合物涉及与Ile46(来自α2亚基)的疏水相互作用,并与Lys29(α2)、Arg83(β1)和Asn111(β1)形成三个氢键。复合物的结合能范围在-15.89至-12.77 kcal/mol之间。 [1]
酶活实验
使用商业试剂盒进行了AMPK的体外激酶实验。简言之,将0.49 nM的重组人AMPK(α1β1γ1)与50 µM ATP和肽底物(AlaMetAlaArgAlaAlaSerAlaAlaAlaLeuAlaArgArgArg)一起孵育。测试化合物,包括7-Methoxyisoflavone,测试浓度为40 µM。激酶反应使肽底物发生磷酸化。该实验采用荧光共振能量转移原理,底物肽的磷酸化会破坏香豆素和荧光素之间的FRET。在400 nm激发,445 nm(香豆素)和520 nm(荧光素)发射波长下测量荧光信号。相对于100%磷酸化对照,计算磷酸化程度(从而得到化合物存在下的AMPK活性)。所有实验进行三次重复。 [1]
细胞实验
3T3L1细胞中AMPK磷酸化的Western blot分析: 3T3L1前脂肪细胞在补充了10%胎牛血清的杜氏改良 Eagle 培养基中培养。细胞血清饥饿24小时以诱导AMPK激活(增加p-AMPK Thr172)。随后,细胞在不存在或存在40 µM 7-Methoxyisoflavone的情况下用10% FBS处理30分钟。处理后,收集细胞并在含有HEPES、Triton X-100、甘油、NaCl、亮抑酶肽和苯甲基磺酰氟的裂解缓冲液中裂解。细胞裂解物进行电泳和免疫印迹。使用特异性一抗和增强化学发光检测系统检测磷酸化的AMPK(Thr172)。 [1]
参考文献

[1]. Isoflavones as modulators of adenosine monophosphate-activated protein kinase. Applied Biological Chemistry. 2016. 59, 217-225.

其他信息
7-甲氧基异黄酮是一种甲氧基异黄酮,即在7位被甲氧基取代的异黄酮。
7-甲氧基异黄酮是一种合成的异黄酮衍生物,其特征在于异黄酮核心结构的7位被甲氧基取代。[1]
这项研究在无细胞体系中测试了37种异黄酮,发现7-甲氧基异黄酮是AMPK最有效的激活剂之一。[1]
其作用机制被认为是直接结合并激活AMPK异源三聚体复合物。计算机对接结果表明,它结合于一个涉及α和β亚基的界面,该界面不同于已知的强效抑制剂(星形孢菌素)的结合位点,但与已知的激活剂(苯并咪唑992)共享一些残基。 [1]
该研究得出结论,关于7-甲氧基异黄酮的结构-活性关系和结合模式的研究结果有助于设计新的AMPK调节剂。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C16H12O3
分子量
252.26468
精确质量
252.079
CAS号
1621-56-3
PubChem CID
638006
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.24g/cm3
沸点
421.2ºC at 760 mmHg
闪点
200.3ºC
蒸汽压
2.66E-07mmHg at 25°C
折射率
1.614
LogP
3.468
tPSA
39.44
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
19
分子复杂度/Complexity
368
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
IECSQLKWZBEUGA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C16H12O3/c1-18-12-7-8-13-15(9-12)19-10-14(16(13)17)11-5-3-2-4-6-11/h2-10H,1H3
化学名
7-methoxy-3-phenylchromen-4-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~99.10 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.9642 mL 19.8208 mL 39.6416 mL
5 mM 0.7928 mL 3.9642 mL 7.9283 mL
10 mM 0.3964 mL 1.9821 mL 3.9642 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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