| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
7α,25-OHC's primary and most well-characterized target is the G protein-coupled receptor GPR183 (EBI2). The binding of 7α,25-OHC to GPR183 is of high affinity, with a Kd of 450 pM, and it acts as a potent agonist, activating the receptor with an EC50 of 140 pM. This interaction initiates downstream signaling pathways that are critical for immune cell function. GPR183 is a GPCR that couples to Gαi proteins, and its activation leads to a decrease in intracellular cyclic AMP (cAMP) levels. This signaling cascade directs the migration of B cells, T cells, and dendritic cells towards sources of 7α,25-OHC, which is crucial for the proper organization of lymphoid organs, including the positioning of B cells in follicles and germinal centers. The physiological importance of this interaction is highlighted by the fact that 7α,25-OHC is the only oxysterol that fully recapitulates physiological EBI2 signaling. Beyond its role in immune cell trafficking, GPR183 is also expressed in other tissues, and 7α,25-OHC-GPR183 signaling has been implicated in a range of biological processes, including cholesterol metabolism, inflammatory processes, and disease pathophysiology. The specificity of 7α,25-OHC for GPR183, and its inability to induce the thymocyte apoptosis seen with 25-HC, makes it an invaluable tool for specifically studying GPR183-mediated pathways.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在半数最大有效浓度约为 500 pM 时，7α,25-二羟基胆固醇 (7α,25-OHC) 可促进表达 EBI2 的动物体内 B 细胞和 T 细胞的迁移，但对 EBI2 缺陷细胞无影响 [1]。体外研究已证实 7α,25-OHC 是一种高效且选择性的 GPR183 激动剂。其活性通常通过多种基于细胞的功能分析进行测定。最直接的活性测定方法是检测其激活 GPR183 的能力，这通常通过测量细胞内 cAMP 水平的降低来评估，因为 GPR183 是一种 Gαi 偶联受体。在这些分析中，7α,25-OHC 的 EC50 为 140 pM，证实了其皮摩尔级的效力。另一种常用的分析方法是测量受体内化或 β-arrestin 募集，这些都是 GPCR 激活的下游结果。此外，7α,25-羟基胆固醇（7α,25-OHC）还被用于趋化性实验，以证明其作为趋化剂的作用。在这些实验中，将免疫细胞（例如B细胞）置于一个腔室中，并建立7α,25-OHC的浓度梯度。然后量化细胞向高浓度氧固醇的迁移，从而证实其在引导免疫细胞运动中的作用。重要的是，体外研究也突显了7α,25-OHC的特异性。与能够诱导胸腺细胞凋亡的前体25-羟基胆固醇（25-HC）不同，7α,25-OHC不具有这种活性，因此它是一种更纯净的工具，可用于研究GPR183介导的效应，而无需考虑细胞死亡这一混杂因素。这些体外研究结果对于验证7α,25-OHC作为GPR183的主要内源性配体至关重要。
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| 体内研究 (In Vivo) |
恢复 7α,25-二羟基胆固醇 (1 μM；1.5 小时) 可降低正常或 EBI2 缺陷型 B 细胞向脾脏滤泡区域的归巢能力，使其脱敏 [1]。体内研究证实了 7α,25-二羟基胆固醇作为免疫细胞迁移和淋巴组织组织的关键调节因子的作用。该化合物是一种内源性代谢物，其生理功能可通过调节其水平或使用 GPR183 基因敲除小鼠进行研究。在体内，7α,25-二羟基胆固醇作为趋化因子，引导表达 GPR183 的 B 细胞、T 细胞和树突状细胞的迁移。这一功能对于淋巴组织的正常组织至关重要，例如 B 细胞在滤泡和生发中心的定位，这对于有效的体液免疫反应至关重要。 7α,25-OHC-GPR183轴在多种疾病模型中已证实具有重要的体内意义。研究表明，该轴参与代谢性脂肪变性、神经炎症和肺部炎症的发生发展，使其成为这些疾病的潜在治疗靶点。此外，由于7α,25-OHC缺乏其前体25-HC的胸腺细胞凋亡活性，其体内效应更特异性地指向GPR183信号通路，使研究人员能够在不受细胞死亡干扰的情况下研究该受体的功能。这些体内研究证实，7α,25-OHC-GPR183轴是免疫系统的关键调节因子，也是极具潜力的治疗靶点。
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| 酶活实验 |
7α,25-OHC 的体外受体结合和功能分析旨在确认其与 GPR183 的高亲和力相互作用，并表征其激动剂活性。标准的受体结合分析使用过表达 GPR183 的细胞膜。使用放射性标记的 7α,25-OHC 或标记的竞争剂来测定结合亲和力 (Kd)。在典型的实验方案中，将递增浓度的未标记 7α,25-OHC 与受体膜和固定浓度的放射性标记配体一起孵育。孵育后，分离结合的配体和游离的配体，并测量放射性。然后使用 Scatchard 或非线性回归分析分析数据以确定 Kd 值，7α,25-OHC 的 Kd 值为 450 pM。功能分析则使用表达 GPR183 的细胞。一种常用的方法是测量福斯克林刺激的 cAMP 积累的抑制情况，因为 GPR183 是一种 Gαi 偶联受体。将细胞预先与不同浓度的 7α,25-OHC 孵育，然后用福斯克林刺激以提高 cAMP 水平。之后使用竞争性免疫测定法定量 cAMP 的含量。该反应的 EC50 为 140 pM。另一种功能性测定方法是利用生物发光共振能量转移 (BRET) 或酶片段互补等技术测量受体内化或 β-arrestin 募集。这些测定方法能够可靠且定量地测量 7α,25-OHC 对 GPR183 的效力和功效。
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| 细胞实验 |
体外细胞实验用于研究7α,25-羟基胆固醇（7α,25-OHC）在免疫细胞功能中的作用，特别是其趋化特性。趋化性实验是研究7α,25-OHC活性的主要方法，它直接测量7α,25-OHC诱导细胞迁移的能力。在典型的实验方案中，分离出原代人或鼠B细胞、T细胞或树突状细胞，并将其置于Transwell小室的上室。下室含有不同浓度梯度的7α,25-OHC培养基。经过设定的孵育时间（例如2-4小时）后，使用流式细胞仪或细胞计数器定量迁移至下室的细胞数量。该实验表明，7α,25-OHC是表达GPR183的免疫细胞的趋化因子。另一种用于研究其活性的方法是测量细胞内钙离子流。当7α,25-羟基胆固醇（7α,25-OHC）激活GPR183时，某些细胞类型中可导致细胞内钙离子瞬时升高。将钙敏感染料（例如Fluo-4）加载到细胞中，并在加入7α,25-OHC后测量荧光强度。这可以实时检测受体激活情况。此外，为了验证反应的特异性，可以预先用GPR183拮抗剂或siRNA处理细胞，以敲低GPR183的表达。这些基于细胞的检测方法对于在生理相关环境下理解7α,25-OHC-GPR183相互作用的功能后果至关重要。
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| 动物实验 |
7α,25-OHC 的体内动物实验通常使用小鼠模型来研究其在免疫细胞迁移和疾病中的作用。标准实验方案包括给小鼠注射 7α,25-OHC，然后评估免疫细胞的迁移情况。例如，可以将标记的 B 细胞过继转移到受体小鼠体内，然后注射 7α,25-OHC 或载体对照。之后，通过流式细胞术分析标记细胞在各种淋巴器官中的分布，以确定它们是否迁移到 7α,25-OHC 的给药部位。或者，也可以使用 GPR183 基因敲除小鼠来研究其功能丧失。在这些模型中，通过检查脾脏和淋巴结的结构以及测量对特定抗原的免疫反应来评估 7α,25-OHC 在淋巴组织组织中的作用。此外，还会研究该化合物在疾病模型中的作用。例如，在神经炎症或肺部炎症模型中，研究人员会测量7α,25-OHC的水平，并评估调节其信号通路（例如，使用GPR183拮抗剂）对疾病严重程度的影响。这些体内研究对于验证7α,25-OHC-GPR183轴的生理和病理作用至关重要。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
7α,25-羟基胆固醇（7α,25-OHC）的药代动力学特性是典型的内源性氧固醇。它是一种分子量为418.7 g/mol、分子式为C27H46O3的小型亲脂性分子，预计会与血浆蛋白和脂蛋白高度结合。其生物合成受到CH25H和CYP7B1酶的严格调控，其水平主要受局部生成和代谢而非膳食摄入的控制。7α,25-OHC是GPR183的强效选择性激动剂，EC50为140 pM，Kd为450 pM，表明其在极低浓度下即可发挥活性。用于研究的7α,25-OHC通常以固体粉末形式提供，可溶于DMSO。建议短期使用（数天至数周）时，应在干燥、避光条件下于0-4°C保存；长期使用（数月至数年）时，应在-20°C保存。由于其代谢和清除迅速，预计其在血液循环中的半衰期较短，这与其作为信号分子的作用相符。作为一种研究工具，其稳定性及操作方法均已明确，以确保实验的可重复性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
作为一种内源性代谢产物，7α,25-羟基胆固醇（7α,25-OHC）通常不被认为具有毒性。它是一种天然存在的分子，在免疫系统中发挥着关键作用。与能够诱导胸腺细胞凋亡的前体25-羟基胆固醇（25-HC）不同，7α,25-OHC 的显著特点是缺乏这种活性，因此它是一种更具选择性的工具，可用于研究GPR183信号通路而不诱导细胞死亡。这表明，在生理浓度下，7α,25-OHC 具有良好的耐受性，不会引起普遍的细胞毒性。然而，该化合物的作用高度依赖于具体环境，因为它能够调控免疫细胞的迁移。7α,25-OHC-GPR183轴的失调与多种疾病相关，包括代谢性脂肪变性、神经炎症和肺部炎症。这表明，虽然该分子本身并非传统意义上的毒素，但其过量产生或异常信号传导可能导致病理发生。用于研究用途时，应按照标准实验室化学品进行处理，并采取适当的预防措施，避免吸入、摄入或皮肤接触。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
7α,25-二羟基胆固醇是一种7α-羟基类固醇、25-羟基类固醇、氧固醇和3β-羟基-Δ5-类固醇。它是人体代谢产物，功能上与胆固醇相关。已有报道和数据表明人体内存在7α,25-二羟基胆固醇。7α,25-二羟基胆固醇是一种研究工具，尚未获准用于任何临床或治疗用途。它是孤儿G蛋白偶联受体GPR183（EBI2）的同源高亲和力配体，被认为是唯一能够完全重现生理性EBI2信号传导的氧固醇。其主要应用领域是免疫学研究，用于研究B细胞、T细胞和树突状细胞的迁移。7α,25-二羟基胆固醇通过激活GPR183来调控免疫细胞的迁移，这对于淋巴器官的正常组织和有效体液免疫反应的产生至关重要。除了免疫学领域，它还可用作研究工具，用于研究其在胆固醇代谢、炎症过程和疾病病理生理学中的作用。它在代谢性脂肪变性、神经炎症和肺部炎症中的作用使其成为药物研发的重点靶点。该化合物以高纯度试剂（HPLC 纯度≥98%）的形式商业化供应，并在冷链运输条件下确保其稳定性。其在这些通路中的验证性应用使其成为研究免疫功能及相关疾病的研究人员的重要工具。
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| 分子式 |
C27H46O3
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|---|---|
| 分子量 |
418.652348995209
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| 精确质量 |
418.344
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| CAS号 |
64907-22-8
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| PubChem CID |
11954197
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
548.5±35.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
235 - 236 °C
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| 闪点 |
230.5±20.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±3.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.550
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| LogP |
5.75
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| tPSA |
60.69
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
669
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| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
C[C@H](CCCC(C)(C)O)[C@H]1CC[C@@H]2[C@@]1(CC[C@H]3[C@H]2[C@@H](C=C4[C@@]3(CC[C@@H](C4)O)C)O)C
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| InChi Key |
BQMSKLCEWBSPPY-IKVTXIKFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H46O3/c1-17(7-6-12-25(2,3)30)20-8-9-21-24-22(11-14-27(20,21)5)26(4)13-10-19(28)15-18(26)16-23(24)29/h16-17,19-24,28-30H,6-15H2,1-5H3/t17-,19+,20-,21+,22+,23-,24+,26+,27-/m1/s1
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| 化学名 |
(3S,7S,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-17-[(2R)-6-hydroxy-6-methylheptan-2-yl]-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthrene-3,7-diol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~4.55 mg/mL (~10.87 mM)
Ethanol :< 1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (11.94 mM) in 15% Cremophor EL 85% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3886 mL | 11.9432 mL | 23.8863 mL | |
| 5 mM | 0.4777 mL | 2.3886 mL | 4.7773 mL | |
| 10 mM | 0.2389 mL | 1.1943 mL | 2.3886 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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