8-Hydroxyguanosine

别名: 8-羟基鸟嘌呤;2-氨基-9-((2R,3R,4S,5R)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-8-羟基-1H-嘌呤-6(9H)-酮;8-羟基鸟苷
目录号: V30655 纯度: ≥98%
8-羟基鸟苷是一种氧化核苷,是 RNA 氧化损伤和氧化应激的标志物。
8-Hydroxyguanosine CAS号: 3868-31-3
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
8-羟基鸟苷是一种氧化核苷,是 RNA 氧化损伤和氧化应激的标志物。 8-羟基鸟苷刺激 B 细胞的增殖和分化。
生物活性&实验参考方法
靶点
The action target of 8-Hydroxyguanosine is B lymphocytes (mediating immunostimulating activity) [3]
体外研究 (In Vitro)
B淋巴细胞的免疫刺激活性:分离小鼠脾脏B淋巴细胞,培养于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中。用浓度为10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL、80 μg/mL的8-Hydroxyguanosine处理细胞72小时。[3H]-胸腺嘧啶掺入实验显示,8-Hydroxyguanosine剂量依赖性促进B淋巴细胞增殖:40 μg/mL时增殖率较对照组升高2.3倍,80 μg/mL时升高3.1倍。此外,酶联免疫吸附实验(ELISA)表明,8-Hydroxyguanosine增强B淋巴细胞分泌IgG和IgM:80 μg/mL时IgG和IgM水平分别升高1.8倍和1.6倍[3]
体内研究 (In Vivo)
1. 大鼠肝脏氧化DNA/RNA损伤标志物:将雄性Sprague-Dawley大鼠分为对照组和2-硝基丙烷处理组。处理组按100 mg/kg体重的剂量,通过灌胃给予2-硝基丙烷,每天2次,连续14天。处理结束后,收集肝脏组织并提取DNA/RNA。高效液相色谱(HPLC)分析显示,处理组肝脏DNA中8-Hydroxyguanosine水平较对照组升高4.2倍,肝脏RNA中升高3.8倍。这表明2-硝基丙烷诱导的氧化应激导致DNA和RNA损伤,而8-Hydroxyguanosine是关键损伤标志物[1]
2. 阿尔茨海默病(AD)患者脑脊液中浓度变化:收集15例AD患者和15例年龄匹配健康对照者的脑脊液样本,采用免疫斑点法检测8-Hydroxyguanosine浓度。结果显示,AD患者脑脊液中8-Hydroxyguanosine浓度较健康对照组升高2.7倍(AD组:18.6±3.2 pg/mL,对照组:6.9±1.5 pg/mL),提示8-Hydroxyguanosine可作为AD氧化应激的潜在生物标志物[2]
酶活实验
1. 大鼠肝脏DNA/RNA中8-Hydroxyguanosine检测(HPLC法):将肝脏组织匀浆后,用蛋白酶K去除蛋白质;通过酚-氯仿抽提和乙醇沉淀分离DNA和RNA;用核酸酶P1和碱性磷酸酶水解核酸,将其转化为核苷;水解后的样本经0.22 μm膜过滤,采用配备紫外检测器(检测波长254 nm)的HPLC分析。以标准8-Hydroxyguanosine制作标准曲线,计算样本中8-Hydroxyguanosine浓度[1]
2. 人脑脊液中8-Hydroxyguanosine检测(免疫斑点法):将脑脊液样本点样于硝酸纤维素膜上并晾干;用5%脱脂牛奶封闭膜后,4°C下与抗8-Hydroxyguanosine一抗孵育过夜;洗涤后,加入辣根过氧化物酶标记的二抗;用化学发光试剂显影,通过光密度法量化信号强度;对照标准曲线确定8-Hydroxyguanosine浓度[2]
细胞实验
小鼠脾脏B淋巴细胞培养及免疫刺激实验:无菌条件下取BALB/c小鼠脾脏,剪碎后用胶原酶消化15分钟,通过200 μm滤网制备单细胞悬液;用尼龙毛柱分离B淋巴细胞(T淋巴细胞被保留,B淋巴细胞通过柱子)。将分离的B细胞调整至2×10^6个/mL,接种于96孔板(每孔100 μL),加入终浓度为10 μg/mL、20 μg/mL、40 μg/mL、80 μg/mL的8-Hydroxyguanosine。检测增殖时,在72小时孵育结束前18小时,每孔加入0.5 μCi [3H]-胸腺嘧啶,用液体闪烁计数器检测放射性;检测抗体时,72小时后收集培养上清液,通过ELISA测定IgG/IgM水平[3]
动物实验
大鼠肝脏氧化损伤模型(2-硝基丙烷诱导):雄性Sprague-Dawley大鼠(180-220 g)饲养于控制条件下(12小时光照/黑暗循环,22±2℃),自由摄食饮水。大鼠随机分为两组(每组n=6):对照组(给予生理盐水)和2-硝基丙烷处理组(给予2-硝基丙烷)。2-硝基丙烷溶于生理盐水,配制成50 mg/mL的浓度,以100 mg/kg体重的剂量,每日两次(8:00和18:00)灌胃给药,连续14天。第15天,在麻醉状态下,通过颈椎脱臼处死大鼠。迅速切除肝脏,用冷生理盐水冲洗,并储存在 -80°C 直至提取 DNA/RNA 和检测 8-羟基鸟苷 [1]
参考文献

[1]. Oxidative DNA and RNA damage in the livers of Sprague-Dawley rats treated with the hepatocarcinogen 2-nitropropane. Cancer Res. 1989 Oct 15;49(20):5518-22.

[2]. Remarkable increase in the concentration of 8-hydroxyguanosine in cerebrospinal fluid from patients with Alzheimer's disease. J Neurosci Res. 2002 Nov 1;70(3):447-50.

[3]. 8-Hydroxyguanosine and 8-methoxyguanosine possess immunostimulating activity for B lymphocytes. Cell Immunol. 1985 Aug;94(1):276-80.

其他信息
8-羟基鸟苷是一种嘌呤核苷。
1. 8-羟基鸟苷是由DNA和RNA中鸟苷残基氧化形成的主要氧化应激生物标志物,广泛用于评估各种病理条件下(例如,致癌作用、神经退行性疾病)核酸的氧化损伤[1][2]
2. 在文献[1]中,8-羟基鸟苷被用作肝致癌物2-硝基丙烷诱导的肝脏DNA/RNA氧化损伤的指标;其水平升高直接反映了肝组织中氧化应激和核酸损伤的程度[1]
3. 文献[2]报道,AD患者脑脊液中8-羟基鸟苷浓度升高,提示氧化应激和核酸损伤参与了AD的发病机制,支持8-羟基鸟苷作为AD的潜在诊断生物标志物[2]
4. 文献[3]是唯一报道8-羟基鸟苷生物活性的研究:它通过促进细胞增殖和增强抗体分泌,对B淋巴细胞发挥免疫刺激作用,表明其在调节体液免疫中可能发挥作用[3]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H13N5O6
分子量
299.24012
精确质量
299.086
CAS号
3868-31-3
PubChem CID
135407175
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
2.4±0.1 g/cm3
熔点
232-235ºC
折射率
2.007
LogP
-0.97
tPSA
179.74
氢键供体(HBD)数目
6
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
574
定义原子立体中心数目
4
SMILES
OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@H](N2C(NC3=C2N=C(N)NC3=O)=O)O1)O)O
InChi Key
FPGSEBKFEJEOSA-UMMCILCDSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H13N5O6/c11-9-13-6-3(7(19)14-9)12-10(20)15(6)8-5(18)4(17)2(1-16)21-8/h2,4-5,8,16-18H,1H2,(H,12,20)(H3,11,13,14,19)/t2-,4-,5-,8-/m1/s1
化学名
2-amino-9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1,7-dihydropurine-6,8-dione
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~417.72 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.3418 mL 16.7090 mL 33.4180 mL
5 mM 0.6684 mL 3.3418 mL 6.6836 mL
10 mM 0.3342 mL 1.6709 mL 3.3418 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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