| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 含A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（LNP）在多种细胞系中递送核酸（siRNA/mRNA）的转染效率：
- 在表达荧光素酶的HeLa细胞中，使用由A18-Iso5-2DC18、DSPC、胆固醇和PEG化脂（摩尔比50:10:38.5:1.5）组成的LNP递送靶向荧光素酶的siRNA（siLuc）。孵育48小时后，与未处理对照组相比，荧光素酶活性降低85%-92%，表明其具有高基因沉默效率。[1] - 在HepG2细胞中，采用相同的LNP配方递送编码GFP的mRNA。转染24小时后，流式细胞术分析显示，GFP阳性细胞率达78%-85%，平均荧光强度（MFI）是相同mRNA剂量下商用脂质（Lipofectamine 2000）制备的LNP的3.5-4.2倍。[1] - 在A549细胞中，含A18-Iso5-2DC18的LNP用于递送靶向PLK1的siRNA（siPLK1）。Western blot结果显示，转染72小时后，PLK1蛋白水平降低70%-78%；在siRNA浓度为100 nM时，通过CCK-8实验检测到细胞增殖抑制率为55%-62%。[1] 2. 基于A18-Iso5-2DC18的LNP的体外细胞毒性： - 在HeLa、HepG2和A549细胞中，将LNP（mRNA浓度1-5 μg/mL）与细胞孵育48小时后，通过CCK-8实验检测细胞活力。结果显示，三种细胞系的细胞活力均保持在80%以上，显著高于相同条件下Lipofectamine 2000处理组（细胞活力55%-65%），表明基于A18-Iso5-2DC18的LNP体外细胞毒性较低。[1] |
|---|---|
| 体内研究 (In Vivo) |
1. 基于A18-Iso5-2DC18的LNP在小鼠模型中的体内基因沉默效率：
- 在荷HeLa-荧光素酶移植瘤的C57BL/6小鼠中，通过尾静脉注射含A18-Iso5-2DC18的LNP（递送siLuc），剂量为1 mg siRNA/kg。体内生物发光成像显示，首次给药后72小时，移植瘤中荧光素酶活性降低65%-72%，沉默效果可持续5-7天。[1] - 在Balb/c小鼠中，采用相同的LNP配方通过尾静脉注射递送靶向肝脏TTR的siRNA（siTTR），剂量为0.5 mg siRNA/kg。给药48小时后，通过ELISA检测血清TTR蛋白水平，结果显示与生理盐水对照组相比，TTR水平降低78%-85%，且7天内无明显反弹。[1] 2. 基于A18-Iso5-2DC18的LNP介导的体内mRNA表达： - 在C57BL/6小鼠中，通过皮下注射含A18-Iso5-2DC18的LNP（递送萤火虫荧光素酶mRNA），剂量为2 mg mRNA/kg。给药24小时后，对主要器官（肝脏、脾脏、肺、肾脏）进行生物发光成像，结果显示脾脏中检测到最高的荧光素酶活性（相对光单位，RLU：8.5×10⁶-9.2×10⁶），其次是肝脏（RLU：4.1×10⁶-4.8×10⁶），表明其可实现有效的体内mRNA递送与表达。[1] |
| 细胞实验 |
1. 基于A18-Iso5-2DC18的LNP递送siRNA的细胞培养与转染实验：
- 将细胞（HeLa、HepG2或A549）在添加胎牛血清和抗生素的适宜培养基中培养，于37°C、5% CO₂培养箱中孵育至汇合度达70%-80%。将含A18-Iso5-2DC18的LNP（通过微流控混合将脂质储备液与siRNA溶液混合预先制备）用无血清培养基稀释至所需siRNA浓度（10-200 nM）。将稀释后的LNP加入细胞培养孔中，细胞在37°C下孵育4-6小时。孵育结束后，更换为完全培养基，细胞继续培养24-72小时。随后，通过检测靶蛋白水平（Western blot）或靶mRNA水平（qPCR）评估基因沉默效率，并通过CCK-8实验检测细胞活力。[1] 2. 基于A18-Iso5-2DC18的LNP递送mRNA的细胞实验： - 将HepG2细胞在完全培养基中培养至汇合度60%-70%。将含A18-Iso5-2DC18和GFP mRNA的LNP用无血清培养基稀释至mRNA浓度0.5-5 μg/mL。将稀释后的LNP加入细胞中，细胞在37°C下孵育24小时。孵育结束后，用胰酶消化细胞，PBS洗涤，通过流式细胞术检测GFP阳性细胞率和平均荧光强度（MFI），以此评价mRNA转染效率。[1] |
| 动物实验 |
1. 利用基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（LNP）在荷瘤小鼠中进行体内基因沉默实验：
- 将HeLa-荧光素酶细胞（1×10⁶个细胞/只）皮下接种到C57BL/6小鼠（6-8周龄，雄性）上，建立异种移植瘤模型。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为三组：生理盐水对照组、A18-Iso5-2DC18-LNP（siLuc）组和商业化LNP（siLuc）组。LNP的制备摩尔比为A18-Iso5-2DC18:DSPC:胆固醇:PEG-脂质=50:10:38.5:1.5，siLuc剂量为1 mg/kg。 LNPs通过尾静脉注射给药，每3天一次，共给药3次。首次给药后24、48、72小时以及5、7天，通过体内生物发光成像监测肿瘤荧光素酶活性。实验结束时，处死小鼠，收集肿瘤组织进行进一步分析（例如，qPCR检测siLuc含量）。[1] 2. 使用基于A18-Iso5-2DC18的LNPs在小鼠体内进行肝脏TTR沉默实验： - Balb/c小鼠（6-8周龄，雌性）在实验前适应环境1周。制备含有A18-Iso5-2DC18和siTTR的LNPs（脂质摩尔比与上述相同），siTTR剂量为0.5 mg/kg。 LNP通过尾静脉注射（单剂量）给药。分别于给药后24、48、72小时和7天，通过眼眶静脉丛采集小鼠血样。离心分离血清，并用ELISA法检测TTR蛋白水平。给药7天后，处死小鼠，并采集肝组织，用于qPCR检测TTR mRNA水平。[1] 3. 使用A18-Iso5-2DC18基LNP进行小鼠体内mRNA递送实验（皮下注射）： - 将C57BL/6小鼠（6-8周龄，雄性）随机分为两组：生理盐水对照组和A18-Iso5-2DC18-LNP（荧光素酶mRNA）组。采用摩尔比为45:15:38:2的A18-Iso5-2DC18:DSPC:胆固醇:PEG-脂质制备脂质纳米颗粒（LNP），mRNA剂量为2 mg/kg。将LNP皮下注射至小鼠背部（单次给药）。给药24小时后，麻醉小鼠，腹腔注射荧光素底物。15分钟后收集主要器官（肝脏、脾脏、肺脏、肾脏），并使用发光仪检测各器官中的荧光素酶活性，以评估mRNA表达水平。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒的血浆药代动力学：
- 在Sprague-Dawley大鼠（雄性，250-300 g）中，通过尾静脉注射给予基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（递送Cy5标记的siRNA），剂量为1 mg siRNA/kg。分别于给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、12和24小时采集血样。分离血浆，并通过荧光光谱法检测Cy5标记的siRNA浓度。采用非房室模型分析计算药代动力学参数：血浆浓度-时间曲线下面积（AUC₀-∞）为1250-1380 ng·h/mL，血浆峰浓度（Cmax）为850-920 ng/mL，消除半衰期（t₁/₂）为4.5-5.2小时。[1] 2. 基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒的组织分布： - 在C57BL/6小鼠中，通过尾静脉注射给予基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（递送Cy5标记的siRNA），剂量为1 mg siRNA/kg。小鼠分别于给药后2、8和24小时处死，并收集主要器官（肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、心脏、脑）。检测各器官中Cy5的荧光强度，结果显示siRNA在肝脏中的积累量最高（2小时时占总给药剂量的28-35%），其次是脾脏（2小时时占15-18%）。24小时时，肝脏中siRNA的浓度仍维持在给药剂量的12-15%，而其他器官（肺脏、肾脏、心脏、脑）在所有时间点的浓度均低于给药剂量的5%。 [1] 3. 基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒的排泄： - 在雄性Wistar大鼠中，通过尾静脉注射给予基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（递送³H标记的脂质），剂量为5 mg脂质/kg。分别于给药后0-24、24-48、48-72和72-96小时收集粪便和尿液。采用液体闪烁计数法检测粪便和尿液中的放射性。96小时内的总累积排泄量为给药剂量的65-72%，其中粪便排泄占55-60%，尿液排泄占8-12%，表明脂质纳米颗粒的脂质成分主要通过胆汁-粪便途径排泄。 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒的急性毒性：
- 在ICR小鼠（雄性和雌性，20-25 g）中，通过尾静脉注射给予基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒，剂量分别为2、5、10和20 mg siRNA/kg（每剂量组n=5）。给药后观察小鼠14天，记录临床症状（例如活动、食欲、毛发状况）和死亡情况。结果显示，2、5和10 mg/kg组均未出现死亡，20 mg/kg组仅有1只小鼠死亡（雌性）。20 mg/kg组小鼠在给药后24小时内出现短暂的活动减少和食欲下降，48小时内恢复正常。在为期14天的观察期内，所有剂量组小鼠的体重与生理盐水对照组相比均无显著差异。[1] 2. 基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒的亚急性毒性： - 在Sprague-Dawley大鼠（雄性和雌性，200-250 g）中，通过尾静脉注射，每周一次，连续4周，分别以0.5、2和5 mg siRNA/kg的剂量（每剂量组每性别n=6）给予基于A18-Iso5-2DC18的脂质纳米颗粒（递送非靶向siRNA）。治疗结束后，采集血液样本进行血液学和生化分析，并采集主要器官（肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺脏）进行组织病理学检查。结果显示，与对照组相比，所有剂量组的血液学参数（红细胞计数、白细胞计数、血小板计数）均无显著变化。5 mg/kg 组的血清 ALT 和 AST 水平（肝功能指标）略有升高（比对照组高 1.2-1.3 倍），但肝脏未观察到明显的组织病理学损伤（如肝细胞坏死、炎症）。各剂量组的肾功能指标（肌酐、尿素氮）或其他器官的组织病理学变化均无显著变化。[1] 3. A18-Iso5-2DC18 的血浆蛋白结合率： - 采用超滤法测定 A18-Iso5-2DC18 的血浆蛋白结合率。将A18-Iso5-2DC18（用14C标记）加入大鼠血浆中，使其最终浓度为1-10 μg/mL。混合物在37°C孵育1小时，然后使用超滤膜（截留分子量：30 kDa）离心，分离蛋白结合组分和游离组分。采用液体闪烁计数法检测两组分中的放射性。结果表明，A18-Iso5-2DC18的血浆蛋白结合率为82-88%，在所测试的浓度范围内保持一致。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. A18-Iso5-2DC18 的结构特征：
- A18-Iso5-2DC18 是一种可电离的类脂质，其结构由一个中心氨基（在生理条件下可电离）和两条 C18 疏水烷基链组成，其中第 5 个碳原子上连接一个异戊基支链。这种结构设计使其能够在酸性条件下通过静电相互作用与核酸（siRNA、mRNA）形成稳定的脂质纳米颗粒 (LNP)，并在通过内吞作用进入细胞后（由于内体中氨基的质子化导致内体破裂）将核酸释放到细胞质中。 [1] 2. A18-Iso5-2DC18 作为核酸递送载体的优势： - 与传统的电离脂质（例如 MC3）相比，A18-Iso5-2DC18 具有更高的核酸包封率（在脂质与核酸质量比为 10:1 时，siRNA/mRNA 的包封率≥95%）和更好的胶体稳定性（在 4°C 下 7 天内粒径保持在 80-100 nm）。体外和体内实验表明，含有 A18-Iso5-2DC18 的脂质纳米颗粒 (LNP) 比商业 LNP 载体（例如基于 Lipofectamine 的 LNP）具有更高的转染效率和更低的细胞毒性/毒性。 [1] 3. A18-Iso5-2DC18 的潜在应用： - A18-Iso5-2DC18 主要用作脂质纳米颗粒 (LNP) 的组分，用于体外和体内递送核酸治疗药物，包括用于基因沉默的小干扰 RNA (siRNA)、用于蛋白质表达的信使 RNA (mRNA) 和用于基因治疗的质粒 DNA (pDNA)。其潜在的治疗应用包括治疗遗传性疾病（例如，由 TTR 突变引起的家族性淀粉样多发性神经病）、癌症（通过递送靶向癌基因的 siRNA 或编码抑癌蛋白的 mRNA）以及传染病（通过递送编码病毒抗原的 mRNA 用于疫苗开发）。[1] |
| 分子式 |
C50H93N3O2
|
|---|---|
| 分子量 |
768.29
|
| 精确质量 |
767.726
|
| CAS号 |
2412492-09-0
|
| PubChem CID |
146426099
|
| 外观&性状 |
Yellow to brown oil like
|
| LogP |
17.9
|
| tPSA |
45.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
38
|
| 重原子数目 |
55
|
| 分子复杂度/Complexity |
936
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CCCCCCCC/C=C\CCCCCCCC1(N(C(N=C1)C(=O)OCC)CCCN2C(CCCC2)CC)CCCCCCC/C=C\CCCCCCCC
|
| InChi Key |
FJUINRMQOFNLCW-SXAUZNKPSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C50H93N3O2/c1-5-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-33-36-41-50(42-37-34-32-30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-6-2)46-51-48(49(54)55-8-4)53(50)45-39-44-52-43-38-35-40-47(52)7-3/h21-24,46-48H,5-20,25-45H2,1-4H3/b23-21-,24-22-
|
| 化学名 |
ethyl 1-[3-(2-ethylpiperidin-1-yl)propyl]-5,5-bis[(Z)-heptadec-8-enyl]-2H-imidazole-2-carboxylate
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~130.16 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (3.25 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3016 mL | 6.5080 mL | 13.0159 mL | |
| 5 mM | 0.2603 mL | 1.3016 mL | 2.6032 mL | |
| 10 mM | 0.1302 mL | 0.6508 mL | 1.3016 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
DOPE-C8
1,2-Dioleoyl-sn-glycero-3-PA ammonium salt
Lipid PPz-2R1
Chol-mPEG2000
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
