Acetylalkannin (Alkannin acetate)   中文名称: 乙酰阿卡宁

Natural isohexenylnaphthazarin pigment

紫草愈伤组织和细胞悬浮培养物正己烷提取物的植物化学研究。结果分离出九种异己烯基萘二甲素：脱氧烷素（1）、烷素（2）、乙酰烷素（3）、异丁酰基烷素（4）、946；-羟基异戊酰基链烷素（5），2'-（S）-#945；-甲基丁酰基烷烃（6）、丙酰基烷烃（7）、四丙烯酰基烷烃（8）和乙酰紫草素（9）。通过质谱和核磁共振波谱确定了它们的结构。颜料2；其中8个是首次从紫草属植物的体外培养物中分离出来的，4个和7个是紫草属植物中的新代谢产物，而9个是紫草天然根和体外培养物的已知成分。此外，茉莉酸甲酯和1-单甘醇酯、棕榈酸酯和硬脂酸酯在紫草科中首次被报道。测试了所有分离的色素化合物的抗菌和细胞毒性活性，揭示了一个非常有趣的特征[1]。

抗菌检测[1]
通过测量抑制区，使用圆盘扩散法评估抗菌活性。分别使用标准抗生素奈替米星和5-氟胞嘧啶来控制受试细菌和真菌的敏感性。将测试化合物溶解在甲醇中。对于每个实验，使用纯溶剂的对照盘作为盲对照。所有纸盘的直径为6mm，并沉积在接种了胰蛋白酶的大豆琼脂培养皿的表面上。将平板接种感兴趣的生物体，使最终细胞浓度为107个细胞/mL，并在37°C下孵育48小时。真菌在25°C的沙氏琼脂上生长48小时。实验重复三次，结果（直径单位为毫米）表示为平均值。

细胞培养[1]
人白血病细胞CCRF-CEM和癌症细胞MDA-MB-231在RPMI 1640培养基、2mM L-谷氨酰胺、10%热灭活胎牛血清和1%Pen/Strep中培养。人胶质母细胞瘤细胞U251和结肠癌细胞HCT 116在Dulbecco改良的Eagle培养基、2 mM L-谷氨酰胺、10%FBS和1%Pen/Strep中生长。所有细胞都保持在37°C的5%二氧化碳气氛中。在90%融合时，细胞传代。

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XTT活性测定[1]
细胞增殖试剂盒II（XTT）购自罗氏诊断公司。将5×104个细胞/mL的MDA-MB-231、U251和HCT 116细胞的等分试样（100µL）接种在96孔板（平底）中，在37°C、5%CO2的加湿气氛中生长18小时，然后加入物质。对照细胞用0.5%DMSO处理，对其生长和存活率没有影响。对于CCRF-CEM细胞，将1×105个细胞/mL的等分试样（100µL）接种在96孔平板（平底）中，并立即加入物质。在加入XTT溶液之前，所有细胞与感兴趣的物质一起孵育72小时。长春花碱作为阳性对照。XTT是一种黄色的四唑盐（3'-[1-（苯氨基羰基）-3,4-四唑钠]-双（4-甲氧基-6-硝基）苯磺酸水合物），被代谢活性细胞切割成橙色甲偶氮染料。这种颜色变化仅发生在活细胞中，可以使用扫描多孔分光光度计直接定量。活细胞的数量用以下公式确定，表示为对照的百分比：（处理细胞的吸光度/未处理细胞的吸光率）×100。使用SigmaPlot 11.0和四参数逻辑斯谛曲线计算IC50值。

[1]. Antimicrobial and cytotoxic isohexenylnaphthazarins from Arnebia euchroma (Royle) Jonst. (Boraginaceae) callus and cell suspension culture. Molecules. 2012 Dec 3;17(12):14310-22.

The n-hexane extract from cell suspension culture of A. euchroma yielded after several chromatographic separations the compounds deoxyalkannin (1), alkannin (2), acetylalkannin (3), isobutyrylalkannin (4), β-hydroxyisovalerylalkannin (5), 2''-(S)-α-methylbutyrylalkannin (6), propionylalkannin (7) and teracrylalkannin (8) along with methyl jasmonate (10), methyl linoleate, linoleic acid, β-sitosterol, a triglyceride mixture of palmitic, stearic and 8-Ζ- or 9-Ζ- or 11-Ζ or 9-Ε-octadecenoic acid and also a mixture of 1-monoglycerides of palmitic, stearic and oleic acid. Likewise from the n-hexane extract of callus culture of A. euchroma the isohexenylnaphthazarins deoxyalkannin (1), isobutyrylalkannin (4), 2''-(S)-α-methylbutyrylalkannin (6) and acetylshikonin (9) were obtained after several separations. In addition linoleic acid and β-sitosterol were identified after GC-MS analysis of some fractions. Among them 4 and 9 are novel for the Arnebia genus while naphthoquinones 2–8 are isolated from A. euchroma in vitro cultures for the first time. Furthermore 10 and the 1-monoglycerides of palmitic, stearic and oleic acid are probably reported for the first time within Boraginaceae family. As regards the tested antimicrobial activity of 1–9, 2, 4, 5 and 9 where the most active against all the assayed microorganisms while acetylshikonin (9) was found much more active than its enantiomer acetylalkannin (3). Compound 6 exhibited the most potent cytotoxic activity against the tested cancer cell lines while it was estimated that the structure of the side chain or its chirality have a minor effect on their cytotoxic activity. [1]

C18H18O6

330.332

34232-27-4

Brown to red solid powder

CC(=CCC(C1=CC(=O)C2=C(C=CC(=C2C1=O)O)O)OC(=O)C)C

Acetylalkannin; 34232-27-4; (S)-1-(5,8-dihydroxy-1,4-dioxo-1,4-dihydronaphthalen-2-yl)-4-methylpent-3-enyl acetate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : 100 mg/mL (302.73 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 3.91 mg/mL (11.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 39.1 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.57 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。