规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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1mg |
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5mg |
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10mg |
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Other Sizes |
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靶点 |
SpCas9 ( IC50 = 22 μM )
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体外研究 (In Vitro) |
BRD0539 以剂量依赖性方式抑制 DNA 结合状态的发展。 BRD0539 削弱了 4PAM DNA 带来的破坏[1]。 SpCas9 和 gRNA 之间的相互作用不会被 BRD0539 破坏[1]。进一步证明了 BRD0539 的特异性,虽然它能够在 eGFP 破坏实验中抑制 SpCas9,但在同一测定中无法抑制 FnCpf1(一种结构不同的 CRISPR 相关核酸酶)[1]。
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细胞实验 |
该 eGFP 破坏测定利用 2×105 U2OS.eGFP 逆转 BRD0539 介导的 SpCas9 抑制。将 SpCas9:gRNA 复合物核转染到 PEST 细胞中。在 96 孔板中,每孔约 22,000 个转染细胞,用 15 μM BRD0539 或 DMSO 一式四份铺板。对于 AcrIIA4 可逆性实验,将预制的 SpCas9:gRNA (10 pmol) 与 AcrIIA4 (5×) 一起孵育 10 分钟后,使用先前描述的方案将其核转染到 U2OS.eGFP.PEST 细胞中。在指定的时间点(2-24 小时),用不含 BRD0539/AcrIIA4 的新培养基更换培养基,并允许细胞生长直至核转染后 24 小时。
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参考文献 |
[1]. Basudeb Maji, et al. A High-Throughput Platform to Identify Small-Molecule Inhibitors of CRISPR-Cas9. Cell. 2019 May 2;177(4):1067-1079.e19.
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分子式 |
C25H25FN2O3S
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分子量 |
452.54
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精确质量 |
452.16
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元素分析 |
C, 66.35; H, 5.57; F, 4.20; N, 6.19; O, 10.61; S, 7.08
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CAS号 |
1403838-79-8
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外观&性状 |
Solid powder
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SMILES |
CC1=CC=C(C=C1)S(=O)(=O)N2CC[C@H]3[C@@H]2C4=C(C=CC(=C4)C5=CC=CC=C5F)N[C@H]3CO
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InChi Key |
CZOIXFMISSBIJL-DCEDVJGZSA-N
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InChi Code |
InChI=1S/C25H25FN2O3S/c1-16-6-9-18(10-7-16)32(30,31)28-13-12-20-24(15-29)27-23-11-8-17(14-21(23)25(20)28)19-4-2-3-5-22(19)26/h2-11,14,20,24-25,27,29H,12-13,15H2,1H3/t20-,24+,25-/m1/s1
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化学名 |
[(3aR,4R,9bR)-8-(2-fluorophenyl)-1-(4-methylphenyl)sulfonyl-2,3,3a,4,5,9b-hexahydropyrrolo[3,2-c]quinolin-4-yl]methanol
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别名 |
BRD0539; BRD 0539; BRD-0539
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HS Tariff Code |
2934.99.9001
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溶解度 (体外) |
DMSO : 91~100 mg/mL (201.1~221 mM)
Ethanol : ~31 mg/mL (~68.5 mM) |
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溶解度 (体内) |
Solubility in Formulation 1: ≥ 2.5 mg/mL (5.52 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL PEG300 and mix evenly; then add 50 μL Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL normal saline to adjust the volume to 1 mL. Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. Solubility in Formulation 2: ≥ 2.5 mg/mL (5.52 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly. 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.2097 mL | 11.0487 mL | 22.0975 mL | |
5 mM | 0.4419 mL | 2.2097 mL | 4.4195 mL | |
10 mM | 0.2210 mL | 1.1049 mL | 2.2097 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Cell . 2019 May 2;177(4):1067-1079.e19. td> |
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