| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mpro (IC50 = 53 nM)[1]
FB2001 (also known as compound 11a) is a drug candidate that targets the main protease (Mpro, also called 3CL protease) of SARS-CoV-2. It inhibits Mpro by covalently binding to cysteine 145 (Cys145). The IC50 value of FB2001 against SARS-CoV-2 Mpro is 0.053 ± 0.005 μM. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Bofutrelvir（24 小时）展示了针对 SARS-CoV-2 及其变异体的体外作用，对 SARS-CoV-2、SARS-CoV-2（Alpha）、SARS-CoV-2（Beta）、SARS-CoV 的 EC50 值-2 (Delta) 和 SARS-CoV-2 (Omicron) 分别为 0.42、0.39、0.28、0.27 和 0.26 μM[2]。在 vero E6 细胞中，当存在人血时 (1.1–2.4 μM)，bofutrelvir 甚至可以在 EC50 值下抑制 SARS-CoV-2 复制[2]。在体外，bofutrelvir 和 remdesivi 联合治疗显示出针对 SARS-CoV-2 的附加作用[2]。
FB2001在Vero E6细胞中对多种SARS-CoV-2变异株表现出强效的抗病毒活性（通过病毒拷贝数减少测定）。其EC50值分别为：B.1.1.7 (Alpha) 0.39 ± 0.01 μM，B.1.351 (Beta) 0.28 ± 0.11 μM，B.1.617.2 (Delta) 0.27 ± 0.05 μM，B.1.1.529 (Omicron) 0.26 ± 0.06 μM。相应的EC90值分别为：Alpha 0.75 ± 0.01 μM，Beta 0.57 ± 0.21 μM，Delta 0.81 ± 0.20 μM。选择性指数（SI50）分别为704、980、1016和933。[2] 在P-糖蛋白抑制剂CP-100356存在下，FB2001对Omicron变异株的抑制活性显著增强，EC50为0.042 ± 0.007 μM，CC50为142.4 μM，表明FB2001可能是P-糖蛋白的底物。[2] 时间添加实验显示，FB2001（2 μM、10 μM和1 μM + P-糖蛋白抑制剂）在所有测试条件下均表现出强效抗病毒活性，特别是在进入后阶段和全程给药阶段，与其作为主蛋白酶抑制剂的作用机制一致。它对病毒进入过程也表现出抑制作用。[2] 可逆性研究表明，FB2001是一种可逆的Mpro抑制剂。将SARS-CoV-2 Mpro与2 μM FB2001孵育60分钟，随后进行50倍和200倍稀释后，Mpro活性恢复，与可逆抑制剂PF-07321332相似，但与不可逆抑制剂N3不同。FB2001与Mpro的解离比PF-07321332更困难。[2] 对野生型和变异株（Alpha、Beta、Delta、Omicron）Mpro的序列比对发现了两个突变：Beta株的K90R和Omicron株的P132H。X射线晶体结构分析表明，这些突变位于FB2001配体结合位点的远处，表明它们不会影响其抑制活性。[2] 在高浓度人血清存在下，FB2001仍能保持强效的抗SARS-CoV-2活性。EC50值从1.10 μM（10%血清）增加到2.40 μM（50%血清），表明人血清对其体外抑制活性无显著影响。[2] 与瑞德西韦的联合用药研究显示，两者对SARS-CoV-2具有相加作用。通过零相互作用 potency 模型计算的协同作用得分为6.947，表明为相加作用（得分在-10到10之间）。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
bofutrelvir（100 和 200 mg/kg；第 0 天每天一次，第 1、2 和 3 天每天两次，连续 4 天腹膜内注射）可有效对抗 SARS-CoV-2 δ 变异体感染[2]。
在感染SARS-CoV-2 Delta变异株的K18-hACE2小鼠模型中，腹腔注射FB2001 100 mg/kg和200 mg/kg（每日两次，持续4天）以剂量依赖性方式显著降低了病毒载量和滴度。[2] 感染后第2天，与溶媒对照组相比，200 mg/kg组肺部病毒滴度降低了3.57 log10 PFU/g。第4天，200 mg/kg组肺部和脑部的病毒滴度均低于检测下限。[2] 肺部病毒RNA载量方面，100 mg/kg和200 mg/kg组在第2天分别降低了1.02和1.60 log10拷贝/克，第4天分别降低了0.67和1.14 log10拷贝/克。脑部病毒RNA载量在第4天分别显著降低了2.37和5.26 log10拷贝/克（100 mg/kg和200 mg/kg组）。[2] 组织病理学分析显示，FB2001治疗显著改善了肺部和脑部病理变化。在肺部，它减少了间质炎性细胞浸润、肺泡间隔增厚和血管周围浸润。在脑部，它减少了神经元变性、细胞浸润，并保护脑组织免受病毒诱导的损伤。针对病毒核蛋白的免疫组织化学染色证实，肺和脑组织中的病毒抗原呈剂量依赖性减少。[2] |
| 酶活实验 |
Mpro酶活性测定： 将SARS-CoV-2 Mpro与2 μM的FB2001、可逆抑制剂PF-07321332或不可逆抑制剂N3孵育60分钟。然后将孵育混合物稀释50倍和200倍，并监测Mpro活性。与N3孵育后，抑制活性未恢复，而与FB2001和PF-07321332孵育后，Mpro活性恢复，表明FB2001是一种可逆的Mpro抑制剂。[2]
X射线晶体学： SARS-CoV-2 Mpro与FB2001复合物的晶体结构分析显示，FB2001的醛基与Mpro的Cys145形成共价键。该结构还显示，变异株中发现的K90R和P132H突变位于配体结合位点的远处。[2] |
| 细胞实验 |
Vero E6细胞抗病毒活性测定： Vero E6细胞接种于48孔板中。次日，将细胞与系列稀释的FB2001预孵育1小时，然后以0.01或0.005的感染复数感染SARS-CoV-2变异株1小时。感染后，洗涤细胞并加入含或不含P-糖蛋白抑制剂CP-100356的新鲜化合物。感染后24小时收集上清液，提取病毒RNA，通过实时荧光定量PCR测定拷贝数。从抑制曲线计算EC50值。[2]
细胞毒性测定： Vero E6细胞接种于96孔板中，与系列稀释的FB2001孵育24小时。使用CCK8试剂盒测定细胞活力，并计算CC50值。[2] 人血清蛋白结合效应测定： Vero E6细胞以感染复数0.01感染SARS-CoV-2 1小时，然后洗涤并与含10%、20%、30%、40%或50%人血清的不同浓度FB2001孵育。24小时后收集上清液，提取病毒RNA，通过RT-qPCR测定拷贝数。计算每种血清浓度下的EC50值。[2] 联合用药研究的免疫荧光测定： Vero E6细胞接种于96孔板中。细胞与FB2001和瑞德西韦的组合预孵育1小时，然后以感染复数0.01感染SARS-CoV-2。感染后24小时，固定细胞，透化，并用抗SARS-CoV-2核蛋白一抗和荧光二抗染色。测量荧光强度，计算抑制率。使用ZIP模型计算协同作用得分。[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：感染SARS-CoV-2 delta变异株的K18-hACE2小鼠[2]
剂量：100和200 mg/kg 给药途径：腹腔注射；第0天每日一次，每次100和200 mg/kg；第1、2和3天每日两次，持续4天 实验结果：显示出对肺部病毒滴度的剂量依赖性疗效。有效降低肺部病毒载量。对SARS-CoV-2 delta变异株表现出剂量依赖性的抗病毒活性，并显著降低小鼠肺部和脑部的病毒载量。 动物：使用7-8周龄的K18-hACE2转基因小鼠。 [2] 病毒攻击：小鼠于第0天经鼻内滴注感染1 × 10³ PFU的SARS-CoV-2 Delta变异株。[2] 药物制备：注射用FB2001的制备方法为：将FB2001溶于0.9%无菌生理盐水中，摇匀至完全溶解，并用0.22 μm滤膜过滤。浓度分别为11.5 mg/mL（100 mg/kg剂量）和23 mg/mL（200 mg/kg剂量）。溶剂对照组为0.9%无菌生理盐水。[2] 给药方案：小鼠分为三组（每组n=7）：溶剂对照组、FB2001 100 mg/kg组和FB2001 200 mg/kg组。给药方式为腹腔注射，每只小鼠注射0.2 mL，注射量根据平均体重（23 g）计算。第0天（感染后2小时）给药一次，第1、2、3天每天给药两次（间隔9小时）。[2] 样本采集：每组4只小鼠于第2天处死，每组3只小鼠于第4天处死。采集肺和脑组织。右肺组织在DMEM培养基中匀浆，用于病毒RNA提取和滴度测定。左肺组织用4%多聚甲醛固定，用于组织病理学检查和免疫组织化学染色。[2] 病毒载量测定：提取肺和脑组织中的病毒RNA，进行逆转录，并通过实时定量PCR定量病毒RNA的绝对拷贝数。病毒滴度通过噬斑试验（PFU/g）测定。 [2] 组织病理学和免疫组织化学：将固定的肺和脑组织包埋于石蜡中，切片，并用苏木精-伊红染色进行组织病理学分析。采用针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白的抗体进行免疫组织化学染色，以检测病毒抗原。[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-[(2S)-3-环己基-1-氧代-1-({(2S)-1-氧代-3-[(3S)-2-氧代吡咯烷-3-基]丙-2-基}氨基)丙-2-基]-1H-吲哚-2-甲酰胺是一种仲甲酰胺，由1H-吲哚-2-羧酸的羧基与3-环己基-N-{(2S)-1-氧代-3-[(3S)-2-氧代吡咯烷-3-基]丙-2-基}-L-丙氨酰胺的伯氨基缩合而成。它是SARS冠状病毒主蛋白酶的抑制剂，并能抑制细胞培养中SARS-CoV-2的复制（EC50 = 0.53 μM）。它是一种EC 3.4.22.69（SARS冠状病毒主蛋白酶）抑制剂和抗冠状病毒药物。它是一种吲哚甲酰胺类化合物，属于吡咯烷-2-酮类化合物，同时也是一种醛类化合物、仲甲酰胺类化合物和寡肽类化合物。
博夫特雷韦是一种小分子抑制剂，可抑制严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (SARS-CoV-2) 的主蛋白酶（Mpro；3C样蛋白酶；3CL蛋白酶；3CLpro；nsp5蛋白酶），具有潜在的抗SARS-CoV-2病毒活性。静脉注射或吸入肺部后，博夫特雷韦可选择性地靶向、结合并抑制SARS-CoV-2 Mpro的活性。该药物抑制病毒多聚蛋白的蛋白水解切割，从而抑制包括解旋酶、单链RNA结合蛋白、RNA依赖性RNA聚合酶、20-O-核糖甲基转移酶、核糖核酸内切酶和核糖核酸外切酶在内的多种病毒蛋白的形成。这可阻止病毒的转录和复制。博福瑞韦可能具有脑部抗病毒活性。 |
| 分子式 |
C25H32N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
452.55
|
| 精确质量 |
452.242
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| 元素分析 |
C, 66.35; H, 7.13; N, 12.38; O, 14.14
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| CAS号 |
2103278-86-8
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| PubChem CID |
145343771
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
836.8±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
459.9±31.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.592
|
| LogP |
2.7
|
| tPSA |
120
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
723
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
C1CCC(CC1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2CCNC2=O)C=O)NC(=O)C3=CC4=CC=CC=C4N3
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| InChi Key |
HPKJGHVHQWJOOT-ZJOUEHCJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H32N4O4/c30-15-19(13-18-10-11-26-23(18)31)27-24(32)21(12-16-6-2-1-3-7-16)29-25(33)22-14-17-8-4-5-9-20(17)28-22/h4-5,8-9,14-16,18-19,21,28H,1-3,6-7,10-13H2,(H,26,31)(H,27,32)(H,29,33)/t18-,19-,21-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(2S)-3-cyclohexyl-1-oxo-1-[[(2S)-1-oxo-3-[(3S)-2-oxopyrrolidin-3-yl]propan-2-yl]amino]propan-2-yl]-1H-indole-2-carboxamide
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| 别名 |
Bofutrelvir; 2103278-86-8; Mpro inhibitor 11A; T5UX5SKK2S; MPI-10;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 100 mg/mL (220.97 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.52 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2097 mL | 11.0485 mL | 22.0970 mL | |
| 5 mM | 0.4419 mL | 2.2097 mL | 4.4194 mL | |
| 10 mM | 0.2210 mL | 1.1049 mL | 2.2097 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SARS-CoV-2-IN-116
MolPort-010-778-422
SARS-CoV-2-IN-118
RLA-3107
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463611831
