| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 16 nM (LSD1)[1]
GSK-LSD1 dihydrochloride specifically targets lysine-specific demethylase 1 (LSD1), also known as KDM1A. LSD1 is a histone demethylase that removes methyl groups from histone H3 at lysine 4 (H3K4me1/2) and lysine 9 (H3K9me1/2), functioning within transcriptional co-repressor complexes. By irreversibly inhibiting LSD1, the compound alters gene expression patterns, leading to antiproliferative effects in various cancer cell lines. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK-LSD1 比其他类似的 FAD 代谢酶（例如 LSD2 和单胺氧化酶 MAO-A 和 MAO-B）具有 1000 倍以上的选择性[1]。GSK-LSD1 可以抑制 KDM1A/LSD1 的酶活性。在 U2OS 细胞中，GSK-LSD1 可刺激 LC3-II 的产生。电镜观察显示，施用 GSK-LSD1 后，自噬体得以形成。GSK-LSD1 通过改变基因表达模式，可有效抑制多种癌细胞系的增殖[2]。体外实验表明，GSK-LSD1 二盐酸盐可有效抑制 LSD1 酶活性，IC50 值为 16 nM。在 U2OS 细胞中，电镜观察显示，GSK-LSD1 可刺激 LC3-II 的产生并诱导自噬体的形成。该化合物通过调节基因表达模式，有效抑制多种癌细胞系的增殖。它表现出卓越的选择性，对LSD1的选择性比其他密切相关的FAD依赖性酶高出1000倍以上。
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| 体内研究 (In Vivo) |
为了评估LSD1抑制剂在体内的活性，将移植了1 × 10⁵个MLL-AF9原代AML细胞的二级受体小鼠用GSK-LSD1治疗。在为期14天的治疗窗口期内，每日以0.5 mg/kg的剂量给药。仅在确认外周血植入后才开始治疗（补充图1A，可在Blood网站上获取）。治疗结束后，处死部分小鼠，并使用流式细胞术检测GFP作为MLL-AF9等位基因负荷的指标进行分析。GSK-LSD1治疗的小鼠骨髓（图1A）、外周血和脾脏（补充图1B-C）中GFP+细胞的比例均较低。其他疾病负荷指标，包括脾脏重量，在GSK-LSD1治疗下也显著降低（补充图1E）。经 GSK-LSD1 治疗的小鼠血小板计数显著下降（P = 0.003；补充图 1D），这与 LSD1 耗竭的靶向效应一致18。GSK-LSD1 治疗 3 天后对骨髓细胞进行免疫表型分析显示，共表达 c-kit 和 Mac-1 的原始 GFP+ 白血病细胞减少（图 1B）。与对照组小鼠（中位生存期 39 天）相比，GSK-LSD1 治疗组小鼠的生存期也显著延长（中位生存期 78 天）（图 1C）。值得注意的是，一小部分接受治疗的小鼠在移植后 248 天仍未检测到疾病。为了验证 LSD1 抑制对生存期的影响，我们对从接受载体或 GSK-LSD1 治疗 3 天的白血病小鼠中分离的 MLL-AF9 细胞进行了连续移植。将从载体组或GSK-LSD1处理组小鼠中纯化的等量GFP+细胞注射到亚致死剂量照射的小鼠体内。与载体组小鼠相比，移植了从GSK-LSD1处理组小鼠体内分离的细胞的三级受体小鼠的存活率更高。移植载体组细胞的受体小鼠的中位生存期为23天，而移植GSK-LSD1处理组白血病细胞的小鼠的中位生存期为51天（图1D）。仅有50%移植了GSK-LSD1处理组白血病细胞的小鼠死于急性髓系白血病（AML）。其余50%移植了GSK-LSD1处理组细胞的小鼠在移植后长达308天的时间内保持健康，且未出现白血病迹象。这些数据表明，LSD1抑制剂具有强大的抗白血病活性，可提高总体生存率，并且在MLL-AF9驱动的急性髓系白血病（AML）侵袭性模型中偶尔可导致疾病完全清除。https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5897868/
在体内，GSK-LSD1二盐酸盐在小鼠模型中表现出显著的抗肿瘤活性。在移植了MLL-AF9原发性AML细胞的二级受体小鼠中，每日以0.5 mg/kg的剂量治疗14天，可降低骨髓、外周血和脾脏中GFP+白血病细胞的比例。治疗组小鼠的脾脏重量显著减轻，血小板计数显著下降，这与靶向抑制LSD1相符。生存期显著延长（中位生存期为78天，而对照组为39天），部分小鼠在248天后仍保持无病状态。 |
| 酶活实验 |
GSK-LSD1二盐酸盐的体外酶抑制试验通常采用荧光法或ELISA法测定LSD1去甲基化酶活性。将重组LSD1酶与生物素标记的组蛋白H3K4me2肽底物在不同浓度的化合物存在下孵育。加入底物启动反应，并在37°C孵育后终止反应。使用针对去甲基化产物的特异性抗体检测去甲基化，并根据剂量反应曲线计算IC50值。
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| 细胞实验 |
细胞周期分析
采用BrdU染色法对体外用GSK-LSD1处理48小时的细胞进行细胞周期分析。使用BrdU流式细胞术试剂盒（BD Biosciences）。简而言之，细胞经GSK-LSD1处理48小时后，按照制造商说明，用10 µM BrdU处理20分钟。之后，收集细胞，进行透化处理，并用APC标记的抗BrdU抗体进行染色，同时对携带pMSCV-MLL-AF9-IRES-GFP质粒的白血病细胞进行GFP+染色。DNA染色使用SYTOX™ Blue死细胞染料。SYTOX Blue信号以线性模式采集。 https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5897868/#sec12 将MLL-AF9白血病细胞在体外培养于添加了15% FBS、IL-3、IL-6和mSCF的IMDM培养基中，并分别加入溶剂或浓度为0.5 µM的GSK-LSD1，培养48小时。同样，将白血病细胞用浓度为1 µM的DOT1L抑制剂EPZ4777处理6天。克隆形成实验按照制造商的说明进行。简而言之，将500个细胞/皿接种于MC3434甲基纤维素培养基中，孵育6天后计数克隆数。每个实验组设置3个独立的培养皿，且克隆形成实验至少重复两次。在第0天，将浓度为0.5 µM的GSK-LSD1添加到MC3434半固体培养基中，并在6天后对克隆进行计数。https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC5897868/#sec12 在U2OS细胞中评估细胞活性，其中使用不同浓度的GSK-LSD1二盐酸盐。处理后，通过Western blotting分析细胞中LC3-II的产生，并使用透射电子显微镜分析自噬体的形成。使用MTT或CellTiter-Glo等标准细胞活力检测方法评估多种癌细胞系的抗增殖作用，并在处理72-96小时后确定IC50值。通过RNA测序或qPCR分析基因表达变化，以评估LSD1抑制的影响。 |
| 动物实验 |
在体内治疗实验中，GSK-LSD1以0.5 mg/kg的剂量每日腹腔注射给药。仅在确认MLL-AF9白血病细胞在小鼠外周血中成功植入后才开始治疗，嵌合率最低要求为：同源小鼠MLL-AF9白血病细胞中GFP阳性细胞比例为0.1-1%，异种移植实验中hCD45阳性细胞比例为12.3% ± 2.7%。小鼠分别接受3天（图1B）、2周（图1C）或6周（图1G）的治疗。使用Deep Quick Stain试剂盒对体外培养的悬浮细胞（图1E、5E、6D+F）或小鼠外周血（图1J）的细胞涂片进行细胞学染色。在体内疗效模型中，将1 × 10⁵个MLL-AF9原代AML细胞移植到二级受体小鼠体内。确认外周血植入后，每天通过腹腔注射或口服给予0.5 mg/kg的GSK-LSD1二盐酸盐，持续14天。通过流式细胞术检测骨髓、外周血和脾脏中GFP阳性细胞来评估疾病负荷。记录脾脏重量作为疾病负荷的次要指标，并监测小鼠的生存情况。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
公开文献中尚未对GSK-LSD1二盐酸盐的药代动力学特性进行详尽描述。该化合物为小分子，分子量为289.24 g/mol（游离碱），预计口服生物利用度中等。该化合物在DMSO中的溶解度≥62.5 mg/mL (216.08 mM)。在体内研究中，通常将其配制成合适的溶剂进行给药。诸如半衰期、清除率和分布容积等详细的药代动力学参数需要进行专门的研究，而这些研究在公开文献中报道较少。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
GSK-LSD1二盐酸盐的毒性数据主要来源于体内疗效研究。在小鼠模型中，该化合物在研究剂量0.5 mg/kg/天、连续给药14天后耐受性良好。治疗组小鼠的血小板计数显著下降，这与LSD1耗竭的靶向效应相符，而非脱靶毒性。这些研究中未报告其他主要毒性。与所有研究化合物一样，GSK-LSD1二盐酸盐仅供研究使用，不得用于人体治疗。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
另见：Gsk-lsd1（评论已移至此处）。
GSK-LSD1 二盐酸盐是一种不可逆的、基于机制的 LSD1 抑制剂，它通过共价修饰酶活性位点中的 FAD 辅因子发挥作用。该化合物通过 LC3-II 的产生和自噬体的形成诱导癌细胞自噬。它已在急性髓系白血病 (AML) 和其他 LSD1 失调的恶性肿瘤中进行了研究。该化合物以二盐酸盐的形式提供，以提高溶解度和稳定性，仅供研究用途，不得用于临床。 |
| 分子式 |
C14H22CL2N2
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|---|---|
| 分子量 |
289.243881702423
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| 精确质量 |
288.116
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| CAS号 |
2102933-95-7
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| 相关CAS号 |
GSK-LSD1;1431368-48-7
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| PubChem CID |
91663353
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| tPSA |
24.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
217
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
C1(N[C@H]2[C@H](C3=CC=CC=C3)C2)CCNCC1.Cl.Cl
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| InChi Key |
PJFZOGMSPBHPNS-WICJZZOFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H20N2.2ClH/c1-2-4-11(5-3-1)13-10-14(13)16-12-6-8-15-9-7-12;;/h1-5,12-16H,6-10H2;2*1H/t13-,14+;;/m0../s1
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| 化学名 |
N-[(1R,2S)-2-phenylcyclopropyl]piperidin-4-amine;dihydrochloride
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| 别名 |
GSK-LSD1 Dihydrochloride; 2102933-95-7; GSK-LSD1 2HCl; GSK-LSD1; GSK LSD1 Dihydrochloride; GSK-LSD1 (dihydrochloride); 1821798-25-7; 1431368-48-7;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 62.5 mg/mL (216.08 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (7.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4573 mL | 17.2867 mL | 34.5734 mL | |
| 5 mM | 0.6915 mL | 3.4573 mL | 6.9147 mL | |
| 10 mM | 0.3457 mL | 1.7287 mL | 3.4573 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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