LLO (91-99) (Listeriolysin O (91-99)) 中文名称: 李斯特菌溶血素O

别名: LLO (91-99); 137856-41-8; AKOS-040756703; MS-31906; AKOS040756703; MS31906

目录号: V53012 纯度: =99.04%

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LLO (91-99)（李斯特菌溶血素 O (91-99)）是一种外毒素，是李斯特菌溶血素 (LLO) 的 MHC I 类限制性 T 细胞表位。

LLO (91-99) (Listeriolysin O (91-99)) CAS号: 137856-41-8
产品类别: Bacterial

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

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纯度: ≥98%

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产品描述

LLO (91-99)（李斯特菌溶血素 O (91-99)）是一种外毒素，是李斯特菌溶血素 (LLO) 的 MHC I 类限制性 T 细胞表位。 LLO (91-99) 是体内诱导 T 细胞介导的免疫的重要抗原。

生物活性&实验参考方法

靶点	Immunology; class I MHC-restricted T-cell epitope
体外研究 (In Vitro)	使用沙门氏菌疫苗李斯特菌细胞内感染模型，我们研究了携带单核细胞增多性李斯特菌溶素（LLO）T细胞表位的减毒沙门氏菌菌株引发表位特异性T细胞反应的能力。将LLO的II类（LLO 215-226）或I类（LLO91-99）MHC限制性T细胞表位插入减毒的德尔塔aroA沙门氏菌dublin菌株的鞭毛蛋白的中心高变结构域内。来自李斯特菌免疫小鼠的T细胞被表达LLO 215-226表位的沙门氏菌构建体的裂解物或热杀制剂激活，表明LLO 215/226在作为鞭毛蛋白表位融合蛋白的一部分提供给抗原呈递细胞时被处理并呈递给T细胞。将嵌合的鞭毛蛋白基因整合到鞭毛蛋白阴性的杜布菌菌株的染色体中，以获得稳定的表位表达。用携带LLO 215-226表位的活的染色体整合沙门氏菌构建体免疫，作为鞭毛蛋白的一部分，产生与相应LLO肽反应的T细胞，表明这种嵌合体可以在体外刺激类特异性免疫反应。使用表达嵌合鞭毛蛋白的沙门氏菌疫苗株研究侧翼残基对MHC I类LLO 91-99表位加工和呈递的影响，所述鞭毛蛋白包含三个LLO 91--99插入物之一：91-99（作为侧翼残基的正常鞭毛蛋白氨基酸）；KK91-99KK（Lys-Lys侧翼残基）；和AAA91-99AAA（Ala-Ala-Ala侧翼残基）[1]。
体内研究 (In Vivo)	来自用KK91–99KK鞭毛蛋白嵌合沙门氏菌菌株免疫的小鼠的脾细胞显示出更大的CTL反应，这表明赖氨酸-赖氨酸侧翼残基与增强的免疫原性有关，可能是通过促进抗原呈递细胞内涵体区室中表位的蛋白水解切除。在用表达MHC II类LLO 215–226或I类LLO KK91–99KK鞭毛蛋白嵌合体的沙门氏菌构建体免疫的小鼠中，李斯特菌攻击后，肝和/或脾细菌的数量在统计学上显著减少，这表明这些构建体的免疫原性与表位特异性的抗感染性增加有关[1]。
酶活实验	DNA技术[1] 重组DNA的常规方法如Maniatis等人所述。质粒通过Birnboim和Daly的碱性裂解法纯化”。使用Dower等人18开发的方法通过电穿孔转化细菌菌株。DNA测序采用Sanger~1.’~双脱氧链终止法。为了在克隆的鞭毛蛋白基因中插入指定T细胞表位的非单核核苷酸，将互补寡核苷酸退火、激酶化并钝端连接到经磷酸酶处理的pLS408’的EcoRV消化的DNA上。质粒pLS408在S.muendren的friC（HI-d）基因的鞭毛蛋白编码序列的中心可变区有一个48bp的缺失（EcoRV片段）。pLS408独特的EcoRV位点允许寡核苷酸的钝端插入。将连接的产物用于转化缺乏鞭毛蛋白的E.co/i菌株CL447’，并在氨苄青霉素平板上选择转化体。使用位于插入点上游78bp和下游69bp的18bp引物对携带嵌合鞭毛蛋白基因的重组质粒进行测序。
细胞实验	本报告中使用的细菌菌株如表1所示。菌株在37°C下生长在补充了适当抗生素的Luria Bertani肉汤（Difco Laboratories）上。最小培养基是根据MilIer15制成的。对于全细菌@sats，对数期生长培养物通过ce~t~离心沉淀并用无菌PBS洗涤两次。细菌悬浮液通过使用Sonifier 250超声细胞破碎器超声裂解1分钟，每次约10s。使用Bradford蛋白质分析试剂测定蛋白质浓度。对于热杀制剂，将Iog期生长培养物离心并在无菌PBS中洗涤两次。通过测定吸光度将细胞密度调整为1 x IO9 ml-’。将细菌悬浮液在80°C下加热1小时，并通过将等分试样电镀到LB琼脂上检查其活力[1]。
动物实验	小鼠和免疫方案[1] 6-8周龄的Balb/cByJ和C3Heb/Hej雌性小鼠购自Jackson Laboratories。小鼠腹腔注射单剂量1×10⁶菌落形成单位（CFU）的重组沙门氏菌菌株进行免疫。注射8周后，取出免疫小鼠的脾脏。每组取3-4只小鼠的脾脏混合，用于IL-2和CTL检测。体内保护试验[1] Balb/cByJ小鼠腹腔注射1×10⁶ CFU的重组沙门氏菌菌株进行免疫。8周后，免疫小鼠腹腔注射2×10⁴ CFU的单核细胞增生李斯特菌（ATCC43251）进行攻击。该菌株对Balb/cByJ小鼠的LD50为<5×10⁶ CFU/只。感染72小时后，收集小鼠肝脏和脾脏，并在含0.5% NP40的无菌PBS中匀浆。将匀浆液进行系列稀释，并涂布于BHI琼脂平板上。平板于37℃培养24小时，并测定各器官的总菌落形成单位数。结果分析采用Mann-Whitney U检验。
参考文献	[1]. N K Verma, et al. Delivery of class I and class II MHC-restricted T-cell epitopes of listeriolysin of Listeria monocytogenes by attenuated Salmonella. Vaccine. 1995 Feb;13(2):142-50.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C47H67N11O17
分子量	1058.09839177132
精确质量	1057.471
CAS号	137856-41-8
PubChem CID	25103379
序列	Gly-Tyr-Lys-Asp-Gly-Asn-Glu-Tyr-Ile
短序列	GYKDGNEYI
外观&性状	Typically exists as white to off-white solids at room temperature
LogP	-7.5
tPSA	480Å²
氢键供体(HBD)数目	16
氢键受体(HBA)数目	19
可旋转键数目(RBC)	34
重原子数目	75
分子复杂度/Complexity	1980
定义原子立体中心数目	8
SMILES	CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)CN
InChi Key	YDTMLXJRXDDANX-YTJLKFQJSA-N
InChi Code	InChI=1S/C47H67N11O17/c1-3-24(2)40(47(74)75)58-46(73)32(19-26-9-13-28(60)14-10-26)56-43(70)30(15-16-38(64)65)55-45(72)33(20-35(50)61)53-37(63)23-51-41(68)34(21-39(66)67)57-42(69)29(6-4-5-17-48)54-44(71)31(52-36(62)22-49)18-25-7-11-27(59)12-8-25/h7-14,24,29-34,40,59-60H,3-6,15-23,48-49H2,1-2H3,(H2,50,61)(H,51,68)(H,52,62)(H,53,63)(H,54,71)(H,55,72)(H,56,70)(H,57,69)(H,58,73)(H,64,65)(H,66,67)(H,74,75)/t24-,29-,30-,31-,32-,33-,34-,40-/m0/s1
化学名	(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-methylpentanoic acid ; glycyl-L-tyrosyl-L-lysyl-L-alpha-aspartyl-glycyl-L-asparagyl-L-alpha-glutamyl-L-tyrosyl-L-isoleucine
别名	LLO (91-99); 137856-41-8; AKOS-040756703; MS-31906; AKOS040756703; MS31906
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意：请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO : ≥ 100 mg/mL (94.51 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More* 配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO : ≥ 100 mg/mL (94.51 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	0.9451 mL	4.7255 mL	9.4509 mL
	5 mM	0.1890 mL	0.9451 mL	1.8902 mL
	10 mM	0.0945 mL	0.4725 mL	0.9451 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。