| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
T-type calcium channels (TTCCs): Ca3.1, Ca3.2, Ca3.3 - blocker; IC50 (human): Ca3.1 = 6.4 nM (95% CI: 5.8-11), Ca3.2 = 18 nM (95% CI: 16-52), Ca3.3 = 7.5 nM (95% CI: 5.4-10); IC50 (rat): Ca3.1 = 16 nM (13-20), Ca3.2 = 13 nM (10-16), Ca3.3 = 1.8 nM (1.4-2.4); IC50 (mouse): Ca3.1 = 6.4 nM (5-10), Ca3.2 = 40 nM (31-56); IC50 (dog): Ca3.1 = 20 nM (17-25), Ca3.2 = 33 nM (26-48), Ca3.3 = 3.4 nM (2.9-4.2); IC50 (cynomolgus): Ca3.2 = 19 nM (14-31). [1]
Ca1.2 - weak blocker; IC50 = 2420 nM (human). [1] hERG (hK11.1) - blocker; IC50 = 5.5 μM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Cav3.1、Cav3.2、Cav3.3 和 Cav1.2 均能被阿匹诺卡胺（化合物 66b）阻断，其 IC50 值分别为 6.4、18、7.5 和 2410 nM。重组通道 hCav3.3 能被阿匹诺卡胺有效阻断，且具有显著的电压依赖性（Kr≈1500 nM，Ki≈20 nM）。阿匹诺卡胺对 hKv11.1-hERG 通道的电流抑制作用 IC50 值为 5.5 μM [1]。此外，阿匹诺卡胺还能抑制 P450 酶；阿匹诺卡胺对 CYP2C8、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4 和 CYP2B6 的 IC50 值分别为 14、15、22、25、51 和 52 μM [1]。
阿匹诺卡胺 在 FLIPR 检测中对人 TTCC 的阻断 IC50 值分别为 6.4 nM (Ca3.1)、18 nM (Ca3.2) 和 7.5 nM (Ca3.3)；对 Ca1.2 的选择性中等 (IC50 = 2420 nM)。[1] 阿匹诺卡胺 对 hCa3.3 表现出电压依赖性阻断作用，在负向保持电压下 Kd ≈ 1500 nM，在更正的电压下 Kd ≈ 20 nM。在负向保持电压下，10 μM 浓度的阿匹诺卡胺对 Ca1.2、Ca1.3 和 Ca2.1 通道的阻断率低于 20%。[1] 阿匹诺卡胺 阻断 hERG 通道的 IC50 为 5.5 μM。除 hKv1.5 和 hKv4.3/hKChIP2 通道（10 μM 浓度下阻断率约为 30%）外，其他通道的抑制率均低于 20%。在 10 μM 浓度下，阿匹诺卡胺对大鼠皮层神经元中钠通道和钾通道的阻断率分别低于 5% 和 15%。 [1] 在针对 273 种蛋白质的脱靶筛选中，浓度为 10 μM 的阿匹诺卡胺对以下蛋白质的抑制率均超过 50%：钙敏感受体 (84%)、hERG (60%)、速激肽 2 受体 (60%)、尿张素 2 受体 (60%)、神经调素 U 受体 1 (56%)、σ 1 受体 (54%) 和 LPA3 受体 (55%)。[1] 阿匹诺卡胺的 Ames 试验结果为阴性，并且在人肝微粒体代谢活化后，其与蛋白质的共价结合能力较低 (72 pmol/mg·h)（相比之下，化合物 66e 的共价结合能力为 207 pmol/mg·h）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
阿匹诺卡胺（66b、100 和 300 mg/kg，口服，12 小时后评估）可有效减少小鼠出现失神样癫痫发作的总时间[1]。
在 WAG/Rij 大鼠失神样癫痫模型中，阿匹诺卡胺 以 10 mg/kg 口服给药，在 12 小时内显著降低了失神样癫痫发作的累积持续时间 93%（p<0.001，配对 t 检验），并在给药后前 6 小时内完全抑制了癫痫发作。Wistar 大鼠口服 10 mg/kg 给药 1 小时后脑内游离浓度：Ctotal,brain = 1529 ± 116 nM，Cubrain = 49.8 ± 3.9 nM，Cfree,plasma = 72 ± 11 nM；口服10 mg/kg剂量时，总血浆Cmax为462 nM；脑内游离浓度高于TTCC的IC50值。[1] 在听源性癫痫敏感的幼年DBA/2J小鼠模型中，口服100 mg/kg阿匹诺卡胺可显著降低给药后1小时和3小时的癫痫发作严重程度（p<0.001，Mann-Whitney检验）。给药后1小时脑内游离浓度为476 ± 121 nM。[1] 在心血管遥测研究中，阿匹诺卡胺可使大鼠和猴子的心率轻微下降，使犬的心率轻微升高，对豚鼠无影响；使大鼠和猴子的血压轻微下降，使犬和豚鼠的血压无变化；在二度房室传导阻滞（文氏型或莫氏型 II 型）发生率较低（每 15000 次心跳 1 至 5 例）的大鼠中，PR 间期增加高达 13%；在任何物种中，QTc 或 QRS 间期均未发生变化。[1] |
| 酶活实验 |
FLIPR（荧光成像板读数仪）钙离子流测定：该测定方法测量化合物对T型钙通道（Ca3.1、Ca3.2、Ca3.3）和Ca1.2的抑制效力。IC50值通过浓度-效应曲线确定，并计算95%置信区间。对于最终化合物阿匹诺卡胺，我们测定了其在人、大鼠、小鼠、犬和食蟹猴钙通道中的IC50值。数据通过FLIPR测定获得；详情请参见补充信息。 [1]
重组通道的膜片钳电生理学研究：采用膜片钳技术，评估了阿匹诺卡胺对一系列人类心脏和神经元离子通道（hCa3.3、hCa1.2、hCa1.3、hCa2.1；hKv1.5、hKv4.3/hKChIP2、hKv7.1/minK、hKv7.2/7.3、hKv11.1-hERG、hHCN4、hKir2.1、hKir3.1/3.4；hNav1.1、hNav1.2、hNav1.5、hNav1.6）的阻断作用。评估了阿匹诺卡胺对hCa3.3通道的阻断作用的电压依赖性（负向保持电压下Kd ≈ 1500 nM，去极化电压下Kd ≈ 20 nM）。 hERG阻断的IC50值为5.5 μM。[1] 脱靶筛选：使用放射性配体结合试验和功能性FLIPR试验，在10 μM 阿匹诺卡胺浓度下筛选了273种脱靶蛋白，包括GPCR、酶、转运蛋白和核受体。对7个靶点的抑制率>50%。[1] CYP450抑制试验：测试了阿匹诺卡胺对主要P450酶（1A2、2A6、2B6、2C8、2C9、2C19、2D6、3A4）的抑制作用，并测定了IC50值。未观察到P450抑制作用随时间的变化。[1] |
| 细胞实验 |
FLIPR钙流测定：使用表达TTCC（Ca3.1、Ca3.2、Ca3.3）或Ca1.2的重组细胞系。将细胞加载钙敏感荧光染料，并加入不同浓度的化合物。在膜去极化后测量钙内流。IC50值由浓度-反应曲线计算得出。对于阿匹诺卡胺，在多种物种（人、大鼠、小鼠、犬、食蟹猴）中测定了IC50值。[1]
膜片钳电生理学：在哺乳动物细胞中表达重组离子通道。进行全细胞或膜片钳内侧朝外记录，以测量阿匹诺卡胺的电流阻断作用。评估了hCa3.3阻断的电压依赖性。在10 μM浓度下评估了对其他钙通道（Ca1.2、Ca1.3、Ca2.1）和钾/钠通道的选择性。 [1] CYP450抑制试验：将阿匹诺卡胺与人肝微粒体和特定的CYP同工酶底物孵育。测定了8种CYP同工酶的IC50值。通过30分钟预孵育评估了时间依赖性抑制。[1] Ames试验：在有或无代谢活化（苯巴比妥/β-萘黄酮诱导的大鼠肝脏S9组分）的情况下，对阿匹诺卡胺在鼠伤寒沙门氏菌TA98和TA100菌株中进行了测试。如果与溶剂对照组相比，回复突变体的数量增加超过阈值2倍，则认为该化合物为阳性。阿匹诺卡胺为阴性。[1] 共价结合试验：将阿匹诺卡胺与人肝微粒体和NADPH孵育；测得与蛋白质的共价结合率为（72 pmol/mg·h）。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性幼年DBA/2J小鼠（22-24日龄）[1]
剂量：100、300 mg/kg，刺激前1小时或3小时给药。 给药途径：口服，持续12小时。 实验结果：在接下来的12小时内，失神发作的累积持续时间减少了93%。 WAG/Rij大鼠失神样癫痫模型：雄性WAG/Rij大鼠先前已植入遥测发射器，可在自由活动且未受干扰的动物中连续记录自发性癫痫发作的脑电图。在夜间活动期开始时，以10 mg/kg的剂量通过灌胃给予阿匹诺卡胺或赋形剂（10% PEG400 + 90% MC 0.5%）。分别在6小时和12小时内测量失神发作的累积持续时间。数据以平均值±标准误（SEM）表示（每组n=6-8）；采用配对t检验进行统计分析。[1] 听源性癫痫敏感性幼年DBA/2J小鼠模型：将幼年DBA/2J小鼠暴露于最长60秒的听觉刺激，或直至小鼠出现后肢强直性伸展。在口服阿匹诺卡胺（100 mg/kg）或赋形剂后1小时或3小时进行测试。癫痫发作严重程度通过行为评分进行评估：0 级 = 正常，1 级 = 狂奔，2 级 = 阵挛性发作，3 级 = 后肢强直伸展。采用 Mann-Whitney U 检验进行统计分析（每组 n=8-10）。试验结束时采集血液和脑组织样本用于浓度测定。[1] 心血管遥测研究：在清醒自由活动的大鼠（正常血压的 Wistar 大鼠和自发性高血压的 SHR 大鼠）、Dunkin-Hartley 豚鼠、比格犬和食蟹猴中，单次口服给予 10-30 mg/kg 剂量的阿匹诺卡胺（剂量取决于物种）后，进行心电图/血压遥测。监测 24 小时平均动脉压 (MAP)、心率 (HR)、PR 间期、QRS 间期和 QTc 间期。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在Wistar大鼠中，静脉注射阿匹诺卡胺（1 mg/kg）：清除率 (CL) = 2.2 mL/min/kg，半衰期 (t1/2) = 4 h；口服（10 mg/kg）：峰浓度 (Cmax) = 462 nM，结合率 (F) = 75%。[1] 在小鼠中，游离分数 (fu) = 0.01；肝微粒体清除率 (CLint) = 181 μL/min/mg 蛋白；预测清除率 (CL) = 1.1 mL/min/kg；实测清除率 (CL) = 13 mL/min/kg。[1] 在大鼠中，游离分数 (fu) = 0.03；肝微粒体清除率 (CLint) = 159 μL/min/mg 蛋白；预测清除率 (CL) = 2.2 mL/min/kg；实测清除率 (CL) = 29 mL/min/kg。 [1]
阿匹诺卡胺在犬体内：fu = 0.04；CLint（肝微粒体）= 1.8 μL/min/mg 蛋白；预测 CL = 0.08 mL/min/kg；观察 CL = 0.9 mL/min/kg。[1] 阿匹诺卡胺在猴体内：fu = 0.047；CLint（肝微粒体）= 9.0 μL/min/mg 蛋白；预测 CL = 0.5 mL/min/kg；观察 CL = 5.5 mL/min/kg。[1] 人体药代动力学预测：fu = 0.026；CLint（肝微粒体）= 3.7 μL/min/mg 蛋白；根据小鼠、大鼠、犬和猴的实测清除率（CL）值，并校正血浆蛋白结合的物种差异，通过异速缩放法预测CL = 0.21 mL/min/kg。[1] 溶解度：阿匹诺卡胺在pH 7时的水溶液溶解度为10 mg/L；FaSSIF = 103 mg/L；FeSSIF = 104 mg/L。[1] MDR1-MDCK通透性：PappA→B = 18×10⁻⁶ cm/s，PappB→A = 54×10⁻⁶ cm/s，B→A/A→B比值为3.0（浓度为1 μM）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
未观察到时间依赖性CYP450抑制。CYP抑制的IC50值：1A2 >100 μM，2A6 >100 μM，2B6 = 52 μM，2C8 = 14 μM，2C9 = 22 μM，2C19 = 5 μM，2D6 = 5 μM，3A4 = 1 μM。[1]
心血管效应：在大鼠中，阿匹诺卡胺（30 mg/kg 口服）导致平均动脉压（MAP）降低7%，心率（HR）降低10%，脉率（PR）升高13%；在自发性高血压大鼠（SHR）（30 mg/kg）中：MAP降低8%，HR降低13%，PR升高13%；在豚鼠（30 mg/kg）中：对MAP、HR、PR、QRS波群、QTc间期无显著影响；在犬（10 mg/kg）中：心率增加 15%，平均动脉压、PR 间期、QRS 波群和 QTc 间期无变化；在食蟹猴（100 mg/kg）中：平均动脉压降低 13%，心率增加 17%。在大鼠中，PR 间期增加高达 13%，二度房室传导阻滞发生率较低（每 15000 次心跳中 1 至 5 例）；所有物种的 QTc 间期和 QRS 波群间期均无变化。[1] 低共价结合：经人肝微粒体代谢活化后为 72 pmol/mg·h。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
阿匹诺卡胺是一种仲酰胺，由{4-[1-(三氟甲基)环丙基]苯基}乙酸的羧基与6-[(3-氨基-1H-吡唑-1-基)甲基]吡啶-3-腈的氨基缩合而成。它是一种选择性、口服有效的T型钙通道阻滞剂，目前正在研究其作为新型癫痫治疗药物的潜力。它具有抗惊厥和T型钙通道阻滞的双重作用。阿匹诺卡胺属于吡唑、仲酰胺、环丙烷、有机氟、腈、吡啶和苯类化合物。阿匹诺卡胺目前正在临床试验NCT03239691中进行研究（该试验旨在评估ACT-709478治疗光敏性癫痫患者的疗效）。
阿匹诺卡胺（ACT-709478）被选为治疗全身性癫痫的候选药物，并已进入I期临床试验。[1] T型钙通道由三个基因（CACNA1G、CACNA1H和CACNA1I）编码，分别产生Ca3.1、Ca3.2和Ca3.3通道。Ca3.1和Ca3.2在心脏和大脑中表达；Ca3.3仅在大脑中表达。[1] T型钙通道在参与产生棘慢波放电（失神发作的标志）的神经元网络中表达。在失神性癫痫或其他特发性全身性癫痫的人类和动物模型中，已发现Ca3.1或Ca3.2基因突变；大多数Ca3.2突变是功能获得性突变。[1] 米贝地尔(1)是典型的TTCC阻滞剂，但不能穿透血脑屏障，且阻断多种通道（IC50：Ca3.1=64 nM，Ca3.2=130 nM，Ca3.3=130 nM，Ca1.2=250 nM，hERG=580 nM）。MK-8998(2a)和Z-944(2b)是选择性、可穿透血脑屏障的TTCC阻滞剂，已进入临床试验。[1] 阿匹诺卡胺(57k)的氨基吡唑代谢物被鉴定为Ames试验阴性；其他几种氨基吡唑代谢物（57a、14b、57b、57d）的Ames试验结果均为阳性。[1]化合物66b（ACT-709478）在人肝微粒体代谢活化后，其共价结合能力（72 pmol/mg·h）低于化合物66e（207 pmol/mg·h），因此被选作进一步表征的对象。[1] |
| 分子式 |
C22H18F3N5O
|
|---|---|
| 分子量 |
425.40643453598
|
| 精确质量 |
425.146
|
| CAS号 |
1838651-58-3
|
| PubChem CID |
118560618
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
3.3
|
| tPSA |
83.6
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
693
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
LSYANGLAZUZYFX-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H18F3N5O/c23-22(24,25)21(8-9-21)17-4-1-15(2-5-17)11-20(31)28-19-7-10-30(29-19)14-18-6-3-16(12-26)13-27-18/h1-7,10,13H,8-9,11,14H2,(H,28,29,31)
|
| 化学名 |
N-[1-[(5-cyanopyridin-2-yl)methyl]pyrazol-3-yl]-2-[4-[1-(trifluoromethyl)cyclopropyl]phenyl]acetamide
|
| 别名 |
ACT709478 ACT 709478ACT-709478
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 125 mg/mL (~293.83 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.89 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3507 mL | 11.7534 mL | 23.5067 mL | |
| 5 mM | 0.4701 mL | 2.3507 mL | 4.7013 mL | |
| 10 mM | 0.2351 mL | 1.1753 mL | 2.3507 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT04123288 | COMPLETED | Drug: ACT-709478 Drug: ACT-709478 |
Healthy Subjects | Idorsia Pharmaceuticals Ltd. | 2019-12-16 | Phase 1 |
| NCT03165097 | COMPLETED | Drug: ACT-709478 Drug: Placebo Drug: Midazolam Drug: ACT-709478 combined with midazolam |
Healthy Subjects | Idorsia Pharmaceuticals Ltd. | 2017-07-07 | Phase 1 |
| NCT03239691 | COMPLETED | Drug: ACT-709478 for oral use Drug: Placebo |
Photosensitive Epilepsy | Idorsia Pharmaceuticals Ltd. | 2017-10-06 | Phase 2 |
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