| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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描述：Adaptavir（DAPTA；RAP-101；mDAPTA）是一种新型高效的肽类CCR5受体拮抗剂，具有治疗HIV感染和HBV感染的潜力。
| 靶点 |
CCR5 (C-C chemokine receptor type 5). Adaptavir inhibits the binding of gp120/sCD4 complex to CCR5 with IC50 values: 55 ± 0.08 pM for HIV-1 Bal gp120 and 0.32 ± 0.03 nM for HIV-1 CM235 gp120 on Cf2Th/synR5 cells. On GHOST CD4-CCR5 cells, the IC50 for gp120CM235/sCD4 binding inhibition is 51 ± 0.09 pM. [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在单核细胞/巨噬细胞 (M/M) 中，DAPTA (1 nM) 可使 HIV-1 的增殖减少 90% 以上。DAPTA 可抑制 HIV 的进入并阻止 HIV-1 感染。DAPTA 可降低人原代巨噬细胞与 CCR5 mAb 的结合。DAPTA 可有效阻断 R5 gp120 诱导的神经元凋亡。在抑制神经元凋亡方面，DAPTA 的效力甚至优于 CCR5 拮抗剂 TAK-779[1]。DAPTA 可有效抑制 gp120 Bal (IC50 = 0.06 nM) 和 CM235 (IC50 = 0.32 nM) 与 CCR5 的特异性 CD4 依赖性结合。DAPTA (1 nM) 可抑制 gp120/sCD4 与 CCR5 的复合物形成。 DAPTA 的 IC50 值为 55 ± 0.08 pM，可阻断 gp120BaL/sCD4 与 CCR5 (Cf2Th/synR5) 细胞的结合[2]。在感染 R5 HIV-1 毒株（BaL 和 81A）的单核细胞/巨噬细胞 (M/M) 中，浓度为 10⁻⁹ M 的 Adaptavir 可抑制 HIV-1 复制 90% 以上（在感染后 14 天和 21 天检测 p24 抗原的产生）。细胞病变效应、合胞体形成和细胞聚集的减少证实了其保护作用。 [1]在M/M培养基中，与未处理的细胞相比，Adaptavir（浓度分别为10⁻⁷ M和10⁻¹⁰ M）分别使HIV-1 DNA的形成减少了64%和70%，这是通过对保守gag区进行半定量反向/嵌套PCR检测得出的。这种对HIV-1 DNA形成的抑制作用强于特异性抗CCR5抗体2D7（抑制率约为39%）。[1]Adaptavir处理（10⁻¹² M）使M/M培养基中CCR5的检测率降低了73%（从模拟处理组的35% CCR5阳性细胞降至处理组的9%），这是通过使用FITC标记的抗CCR5单克隆抗体（2D7）进行流式细胞术检测得出的，表明DAPTA掩盖了CCR5的结合位点。 [1]在分化的SK-N-SH神经元细胞中，浓度为10⁻¹³ M和10⁻¹² M的Adaptavir分别使CCR5表达降低了68.5%和72%（与未暴露细胞相比）。此外，通过碘化丙啶染色和流式细胞术评估，DAPTA完全（100%）抑制了这些细胞中R5 HIV-1 BaL诱导的细胞凋亡。相比之下，CCR5拮抗剂TAK-779（1.8×10⁻⁶ M）仅抑制了60%的细胞凋亡。 [1]
Adaptavir (1 nM) 可阻断 gp120/sCD4 复合物与 CCR5 的形成。该实验采用共免疫沉淀法，以 Cf2Th/synR5 细胞中溶解的 CCR5 或 HOS CD4-CCR5 细胞上的膜结合 CCR5 为底物。[2] Adaptavir 可强效且显著地抑制 FITC 标记的 gp120（来自 Bal 和 CM235 株）与表达 CCR5 的细胞（Cf2Th/synR5 和 GHOST CD4-CCR5）的 CD4 依赖性结合。该抑制作用呈剂量依赖性。 [2] 共聚焦显微镜显示，FITC标记的Adaptavir与CCR5阳性Cf2Th/synR5细胞上的CCR5共定位，但在CCR5阴性Cf2Th细胞上不共定位，证实CCR5是DAPTA的直接受体。[2] |
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| 体内研究 (In Vivo) |
在一项针对 HIV 相关认知障碍的随机、双盲、安慰剂对照试验中，对冷冻储存的血浆样本进行盲法分析发现，接受阿达帕韦治疗的患者在基线至第 6 个月期间病毒载量显著降低（0.54 log10，P = 0.037）。[1] 一项非对照临床试验报告称，阿达帕韦可显著抑制既往接受过高效抗逆转录病毒疗法 (HAART) 和未接受过 HAART 治疗的患者持续感染细胞库中的病毒。[2]
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| 酶活实验 |
| 根据制造商的说明，使用荧光蛋白标记试剂盒制备一种新型的FITC标记的可溶性gp120蛋白示踪剂（25 μg/mL）。通过Sephadex G-10柱过滤去除未偶联的FLUOS。FLUOS标记分子与蛋白的摩尔比为每gp120分子结合3.5至4.5个荧光分子。使用已知浓度的可溶性分子作为校准标准，通过Bradford法和Western印迹法测定荧光标记蛋白的浓度。结合实验在结合缓冲液中进行，最终体积为100 μL。在96孔滤板中，于37°C下进行1小时。使用96孔板流水线，通过快速真空过滤和洗涤去除未结合的标记蛋白。每个结合混合物用0.2 mL（每孔总体积1.0 mL）冷洗涤缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，150 mM NaCl，5 mM MgCl2，1 mM CaCl2）洗涤5次。使用荧光酶标仪在495/530 nm处计数滤膜。 | 对于快速过滤结合实验，使用可溶性gp120蛋白制备荧光标记示踪剂。结合实验在100 μL的结合缓冲液中进行。在96孔滤板中，于37°C下进行1小时的结合反应。通过快速真空过滤和洗涤去除未结合的标记蛋白，每孔用0.2 mL冷洗涤缓冲液洗涤5次。使用荧光酶标仪在 495/530 nm 波长下对滤膜进行计数。通过与未标记的 HIV-1 Bal、MIP-1β（一种 CCR5 选择性配体）或抗 CCR5 抗体 2D7 竞争，验证了 gp120 结合的特异性。[2] 在免疫沉淀实验中，将 Cf2Th/synR5 细胞 (CCR5+) 的细胞裂解液与抗 CCR5 抗体 (1D4) 和蛋白 A/G 琼脂糖孵育，以捕获可溶性 CCR5 受体。然后将琼脂糖珠与预先形成的 gp120/sCD4 复合物在有或无阿达帕韦 (1 或 10 nM) 的情况下孵育。洗脱与琼脂糖珠结合的复合物，进行 SDS-PAGE 电泳，转移至 PVDF 膜，并用人 HIV 免疫球蛋白或抗 CCR5 抗体进行检测。对于 HOS CD4-CCR5 细胞上的膜结合受体，采用了一种相关方法，即用 DAPTA 预处理细胞，与 gp120 孵育，裂解细胞，然后用抗 CD4 或抗 CCR5 抗体进行免疫沉淀。[2] |
| 细胞实验 |
从健康的HIV血清阴性供体中制备单核细胞/巨噬细胞（M/M）。将M/M暴露于不同浓度的Adaptavir（10⁻¹⁴至10⁻¹⁰ M）20分钟，然后用R5 HIV-1毒株BaL或81A（2000 pg/ml p24 gag）进行感染。2小时后，洗涤细胞并在DAPTA存在下培养。分别于第7、14和21天收集上清液，并通过HIV p24 gag ELISA检测病毒产量。[1] 对于HIV-1 DNA分析，在有或无Adaptavir（10⁻⁹ M和10⁻⁷ M）或抗CCR5单克隆抗体2D7的情况下，用HIV-1 BaL（30 pg/ml）感染M/M。 18 小时后，分离基因组 DNA。使用 1×10⁶ 至 1.25×10⁵ 个细胞当量，进行针对 gag 基因保守区域的反向/嵌套 PCR。通过寡核苷酸杂交检测 115 bp PCR 产物。以 β-肌动蛋白基因的扩增作为对照。使用软件测量条带密度。[1]
为了进行 CCR5 表达的流式细胞术分析，将 M/M 或分化的 SK-N-SH 神经元细胞与不同剂量的阿达帕韦在 4°C 下孵育 20-30 分钟，然后在 4°C 避光条件下用 FITC 标记的抗 CCR5 单克隆抗体 (2D7) 染色 30 分钟。染色后的细胞经洗涤后，使用 FACScan 流式细胞仪进行分析（每个样本 10,000 个事件）。 [1] 为了分析神经元凋亡，将分化的 SK-N-SH 细胞暴露于在 M/M 培养基中生长的 HIV-1 BaL 的 p24-gag 8,000 pg/ml 以及 Adaptavir（10^{-13} 和 10^{-12} M）或 TAK-779（1.8×10^{-6} M）中 5 天。然后将细胞分离，用冰冷的 70% 乙醇透化，在 4°C 下避光用碘化丙啶 (PI) 和 RNase 孵育 2 小时，并通过流式细胞术进行分析（每个样本 10,000 个事件）。 [1] 在细胞系（Cf2Th/synR5、GHOST CD4-CCR5、HOS CD4-CCR5）上进行结合实验，方法是将细胞与FITC标记的gp120在sCD4和不同浓度的Adaptavir存在下孵育。细胞在37°C孵育1小时后，通过真空过滤和洗涤去除未结合的物质，并测量荧光强度。[2] 对于双色免疫荧光分析，将生长在玻璃盖玻片上的Cf2Th/synR5 (CCR5+)和Cf2Th (CCR5-)细胞与FITC标记的Adaptavir (10 nM)在37°C孵育1小时。洗涤后，将细胞与抗CCR5抗体（1D4）于4℃孵育过夜，然后与抗小鼠IgG-罗丹明于4℃孵育2小时。固定盖玻片后，使用40倍油浸物镜进行共聚焦激光扫描显微镜分析。对每种荧光染料依次采集图像。[2] |
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| 药代性质 (ADME/PK) |
基于对 HIV-1 感染者认知能力改善的观察，推测阿达维韦能够穿透中枢神经系统 (CNS)。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
阿达帕韦 (DAPTA) 是一种病毒进入抑制剂，靶向 CCR5，可阻断 HIV-1 进入单核细胞/巨噬细胞，并抑制 gp120 诱导的神经元细胞凋亡。在抑制神经母细胞瘤细胞系凋亡方面，它比非肽类 CCR5 拮抗剂 TAK-779 更有效。其作用机制是与 HIV gp120 竞争性结合 CCR5 受体。DAPTA 抑制 gp120-sCD4 复合物与 CCR5 结合的效力是马拉维罗的 34 至 180 倍（IC50 为 0.06-0.32 nM，而马拉维罗为 11 nM）。[1] 快速过滤结合和共免疫沉淀实验表明，阿达帕韦可抑制 CD4 依赖性的 gp120 与 CCR5 的结合。通过共聚焦显微镜观察到FITC标记的DAPTA与CCR5阳性细胞的直接结合，证实CCR5是DAPTA的受体。该肽对R5嗜性HIV-1分离株有效，但对X4嗜性分离株无效。体外和体内均未观察到耐药性的产生。gp120中的DAPTA表位在辅助受体结合中起着重要作用。[2]
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| 分子式 |
C35H56N10O15
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|---|---|
| 分子量 |
856.888
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| 精确质量 |
856.393
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| CAS号 |
106362-34-9
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| PubChem CID |
184644
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.415g/cm3
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| 沸点 |
1514.3ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
869.6ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.596
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| LogP |
-6.9
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| tPSA |
437.28
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| 氢键供体(HBD)数目 |
16
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| 氢键受体(HBA)数目 |
16
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| 可旋转键数目(RBC) |
24
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| 重原子数目 |
60
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| 分子复杂度/Complexity |
1530
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| 定义原子立体中心数目 |
12
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| SMILES |
C[C@H]([C@@H](C(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](C)N)O
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| InChi Key |
AKWRNBWMGFUAMF-ZESMOPTKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C35H56N10O15/c1-13(36)29(54)41-22(12-46)32(57)43-26(16(4)49)34(59)45-27(17(5)50)35(60)44-25(15(3)48)33(58)40-21(11-23(37)52)30(55)39-20(10-18-6-8-19(51)9-7-18)31(56)42-24(14(2)47)28(38)53/h6-9,13-17,20-22,24-27,46-51H,10-12,36H2,1-5H3,(H2,37,52)(H2,38,53)(H,39,55)(H,40,58)(H,41,54)(H,42,56)(H,43,57)(H,44,60)(H,45,59)/t13-,14-,15-,16-,17-,20+,21+,22+,24+,25+,26+,27+/m1/s1
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| 化学名 |
L-Threoninamide, D-alanyl-L-seryl-L-threonyl-L-threonyl-L-threonyl-L-asparaginyl-L-tyrosyl-
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| 别名 |
RAP-101DAPTA mDAPTAAdaptavir D-Ala-1-peptide T-NH-2 Monomeric (D-Alanine-1) Peptide T amide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL (~58.35 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 10 mg/mL (11.67 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1670 mL | 5.8351 mL | 11.6701 mL | |
| 5 mM | 0.2334 mL | 1.1670 mL | 2.3340 mL | |
| 10 mM | 0.1167 mL | 0.5835 mL | 1.1670 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00951743 | Unknown † | Drug: Adaptavir (monomeric DAPTA) | HIV Infections | Rapid Laboratories Inc. | July 2009 | Phase 2 |
奈莫雷生盐酸盐
E55888 HCL
FITC-Dextran (MW 110000)
FITC-Dextran (MW 2000000)
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