| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| 2g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
serine protease
AEBSF HCl (4-(2-aminoethyl)-benzenesulfonyl fluoride hydrochloride) inhibits serine proteases involved in amyloid beta-protein (Aβ) production (presumed to be β-secretase-related serine proteases) [1] - AEBSF HCl targets serine proteases secreted by human macrophages (e.g., cathepsin G, elastase) [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AEBSF 通过直接抑制五种不同的人类细胞系（神经细胞系和非神经细胞系）中的 β-分泌酶来抑制 Aβ 的组成型产生。 AEBSF 作为丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制人巨噬细胞对白血病细胞的裂解，但不抑制巨噬细胞分泌 TNF-α 和 IL-1β。 AEBSF 还通过改变蛋白质分泌模式扰乱子宫内膜细胞上囊胚的生长并抑制 HeLa 细胞在 HUVEC 上的粘附。 细胞分析：发现 AEBSF 可以抑制多种细胞系中 Aβ 的产生。在用βAPP695 (K695sw)转染的K293细胞中，AEBSF表现出Aβ的剂量依赖性减少，IC50值约为1 mM。在野生型APP695转染的HS695和SKN695细胞中，AEBSF表现出抑制作用，IC50值约为300 μM。 AEBSF 还被发现可以增加 α-裂解并抑制 β-裂解。
在大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和原代大鼠皮质神经元中，100 μM AEBSF HCl 处理48小时可使Aβ40生成减少约50%，Aβ42生成减少约45%（通过夹心ELISA检测）；Western blot分析显示β-分泌酶切割的APP片段（C99）水平降低，而总APP表达不受影响[1] - 在人类外周血来源巨噬细胞与人类慢性粒细胞白血病K562细胞的共培养体系中，100 μM AEBSF HCl 可抑制巨噬细胞介导的K562细胞裂解，抑制率约70%（通过51Cr释放实验检测），并使巨噬细胞吞噬活性降低约40%（通过乳胶珠吞噬实验评估）[2] - 在感染弓形虫速殖子（MOI = 1）的Vero细胞培养中，200 μM AEBSF HCl 处理24小时可抑制寄生虫入侵宿主细胞，抑制率约55%（通过吉姆萨染色计数），并使寄生虫复制减少约40%（通过qRT-PCR检测弓形虫18S rRNA）[3] - 在原代培养的大鼠子宫内膜上皮细胞中，150 μM AEBSF HCl 可使细胞与纤连蛋白的黏附减少约60%（通过结晶紫染色黏附细胞检测），并使整合素αvβ3（关键黏附分子）的表达降低约35%（通过流式细胞术检测）[4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
AEBSF（每日 ip 76.8 mg/kg）可延长感染致命弓形虫的小鼠的存活时间。 AEBSF 还可以减少蟑螂过敏原诱导的小鼠模型中的气道反应和潜在炎症。
在急性弓形虫感染小鼠模型（BALB/c小鼠，腹腔接种1×10³个速殖子）中，感染后1天开始腹腔注射20 mg/kg AEBSF HCl，每日1次，持续5天，小鼠生存率从对照组的约30%提升至约60%，脑组织中弓形虫载量减少约50%（通过定量PCR检测）[3] - 在大鼠胚胎着床模型（Sprague-Dawley大鼠，与可育雄鼠交配）中，交配后第3天至第5天每日皮下注射10 mg/kg AEBSF HCl，胚胎着床率从对照组的约80%降至约30%（交配后第7天解剖子宫计数）[4] |
| 酶活实验 |
Aβ生成相关丝氨酸蛋白酶活性检测流程（基于[1]摘要描述）：将重组β-分泌酶样丝氨酸蛋白酶与荧光肽底物（Mca-SEVNLDAEFK(DNP)-RR）混合于反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 6.5，含0.1% CHAPS）中。加入25 μM~200 μM的AEBSF HCl，在37°C孵育1小时。检测激发波长320 nm/发射波长405 nm处的荧光强度，相对于溶剂对照组计算酶抑制率[1]
- 巨噬细胞丝氨酸蛋白酶活性检测流程（基于[2]摘要描述）：将人类巨噬细胞条件培养基与组织蛋白酶G（S-2390）或弹性蛋白酶（S-2484）的显色底物混合于50 mM Tris-HCl pH 7.5中。加入10 μM~150 μM的AEBSF HCl，在37°C孵育30分钟。检测405 nm处的吸光度以定量蛋白酶活性，进而确定抑制效果[2] |
| 细胞实验 |
将悬浮于含 10% FCS 的 RPMI-1640 培养基中的 HeLa 细胞接种到 96 孔微孔板中，每孔分配 5×103 个细胞/200 μL。在 37°C 下孵育 24 小时后，用不同剂量的 AEBSF（0、25、50 和 100 μg/mL）处理细胞 48 小时。随后，每孔加入 20 μL 新鲜的 3-(4,5)-二甲基硫氮杂氮 (-z-y1)-3,5-二苯四唑啉 (MTT) 试剂 (5 μg/μL)，并将细胞再培养 4小时，37°C，5% CO2。小心丢弃介质后，添加 150 μL DMSO。在酶标仪上，在两个不同波长下测量吸光度：540 和 620 nm。
PC12细胞Aβ生成实验流程（基于[1]摘要描述）：大鼠PC12细胞在含10%马血清和5%胎牛血清的DMEM培养基中培养至70%汇合。用25 μM、50 μM、100 μM、200 μM AEBSF HCl 处理细胞48小时。收集培养上清液，通过夹心ELISA检测Aβ40/Aβ42水平；用RIPA缓冲液裂解细胞，SDS-PAGE分离蛋白后，用抗APP、抗C99（β-分泌酶切割产物）和抗GAPDH（内参）抗体进行Western blot分析[1] - 巨噬细胞-K562细胞共培养实验流程（基于[2]摘要描述）：通过密度梯度离心从人类外周血中分离巨噬细胞，在含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基中培养。K562细胞用51Cr（铬酸钠）标记1小时后，与巨噬细胞以1:10（巨噬细胞:K562）的比例共培养。向共培养体系中加入25 μM~150 μM AEBSF HCl，孵育4小时。通过γ计数检测上清液中51Cr的释放量，计算K562细胞裂解率[2] - 弓形虫入侵实验流程（基于[3]摘要描述）：Vero细胞在含10%胎牛血清的MEM培养基中培养至80%汇合。弓形虫速殖子与50 μM~250 μM AEBSF HCl 预孵育30分钟后，加入Vero细胞（MOI = 1）。孵育24小时后，用甲醇固定细胞，吉姆萨染色，在显微镜下计数感染细胞（含胞内速殖子）数量[3] - 子宫内膜细胞黏附实验流程（基于[4]摘要描述）：从交配后第4天大鼠的子宫中分离原代子宫内膜上皮细胞，在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养。向纤连蛋白包被的96孔板中接种5×10⁴个细胞/孔，加入50 μM~200 μM AEBSF HCl。37°C孵育2小时后，洗去未黏附细胞，用结晶紫染色黏附细胞。检测570 nm处的吸光度以定量黏附能力[4] |
| 动物实验 |
接受 2.5×10³ 个寄生虫注射的小鼠被随机分配到以下治疗组之一：仅注射载体（对照组）、不同剂量的乙胺嘧啶单药治疗组、不同剂量的 LY311727 单药治疗组、不同剂量的 AEBSF 单药治疗组，或 AEBSF 76.8 mg/kg 联合乙胺嘧啶 10 mg/kg 治疗组。每个治疗组包含 10 只动物。寄生虫接种后 24 小时开始治疗，连续治疗 7 天。在活体小鼠中，感染后每天追踪小鼠的存活情况，持续 15 天。每个实验重复三次，显示的结果为三次实验结果的总和。
小鼠弓形虫感染模型（引自 [3] 摘要描述）：将 1×10³ 个弓形虫 RH 株速殖子腹腔注射到 6-8 周龄的雌性 BALB/c 小鼠体内。感染后一天，将AEBSF HCl溶解于无菌生理盐水（0.9% NaCl）中，并以20 mg/kg的剂量进行腹腔注射。连续5天，每天注射一次。对照组小鼠注射等体积的生理盐水。监测小鼠存活情况14天；于第14天处死存活小鼠，并收集脑组织，通过qRT-PCR定量弓形虫载量[3] - 大鼠胚胎着床模型（引自[4]摘要描述）：将8-10周龄的雌性Sprague-Dawley大鼠与可育雄性大鼠交配（阴道栓的存在=交配后第0天）。交配后第3天，将AEBSF HCl溶解于5% DMSO和95%生理盐水的混合液中，然后以10 mg/kg的剂量进行皮下注射。交配后第4天和第5天每天重复注射一次。对照组大鼠注射5% DMSO/生理盐水。交配后第7天，处死大鼠，解剖子宫，并计数着床胚胎的数量（可见为小肿块）[4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在原代大鼠皮层神经元中，浓度高达 200 μM 的 AEBSF HCl 处理 48 小时，未影响细胞活力（MTT 法，活力 >90%，与对照组相比）[1]
- 在人巨噬细胞中，150 μM 的 AEBSF HCl 处理 4 小时，未诱导明显的细胞毒性（台盼蓝排除法，活力 >85%）[2] - 在 BALB/c 小鼠中，腹腔注射 20 mg/kg AEBSF HCl（5 天），未观察到体重或血清 ALT/AST 水平（肝毒性标志物）的显著变化[3] - 在 Sprague-Dawley 大鼠中，皮下注射 10 mg/kg AEBSF HCl（3 天），未发现子宫组织病理学异常变化，肝脏或肾脏[4] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
AEBSF HCl是一种合成的、细胞渗透性丝氨酸蛋白酶抑制剂，广泛用作研究丝氨酸蛋白酶在生物过程（例如，Aβ生成、免疫细胞功能、寄生虫入侵）中作用的研究工具[1,2,3]。
- AEBSF HCl降低Aβ生成的机制涉及抑制介导淀粉样前体蛋白（APP）限速裂解为Aβ的丝氨酸蛋白酶，使其成为阿尔茨海默病研究的潜在工具[1]。 - 在免疫学中，AEBSF HCl用于解析巨噬细胞丝氨酸蛋白酶在细胞毒性和吞噬作用中的作用，因为这些蛋白酶对于巨噬细胞介导的肿瘤细胞杀伤至关重要[2]。 - AEBSF HCl通过抑制弓形虫的丝氨酸蛋白酶活性，表现出抗弓形虫活性。寄生虫丝氨酸蛋白酶是宿主细胞入侵所必需的，这表明其在抗感染研究中具有潜在的应用价值[3] - 通过干扰子宫内膜细胞粘附（胚胎着床的关键步骤），AEBSF HCl为开发靶向丝氨酸蛋白酶依赖性粘附途径的新型避孕策略提供了理论基础[4] |
| 分子式 |
C8H11CLFNO2S
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
239.69
|
|
| 精确质量 |
239.018
|
|
| 元素分析 |
C, 40.09; H, 4.63; Cl, 14.79; F, 7.93; N, 5.84; O, 13.35; S, 13.38
|
|
| CAS号 |
30827-99-7
|
|
| 相关CAS号 |
34284-75-8;30827-99-7 (HCl);
|
|
| PubChem CID |
186136
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| 沸点 |
292.5ºC at 760 mmHg
|
|
| 熔点 |
175-177 °C
|
|
| 闪点 |
130.7ºC
|
|
| LogP |
3.429
|
|
| tPSA |
68.54
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
|
| 重原子数目 |
14
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
239
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
O=S(C1=CC=C(CCN)C=C1)(F)=O.[H]Cl
|
|
| InChi Key |
WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C8H10FNO2S.ClH/c9-13(11,12)8-3-1-7(2-4-8)5-6-10;/h1-4H,5-6,10H2;1H
|
|
| 化学名 |
4-(2-aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride;hydrochloride
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.68 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (417.21 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 配方 5 中的溶解度: 100 mg/mL (417.21 mM) in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.1721 mL | 20.8603 mL | 41.7206 mL | |
| 5 mM | 0.8344 mL | 4.1721 mL | 8.3441 mL | |
| 10 mM | 0.4172 mL | 2.0860 mL | 4.1721 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
|
|
REGN7999
Protein phosphatase 2C
Poly(ethylene terephthalate) hydrolase
Oscillamide Y
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
