| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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描述：AGI-24512 是一种新型、高效且选择性的 MATA2（甲硫氨酸腺苷转移酶 2A）抑制剂，可通过抑制 MTAP 缺失癌细胞的生长发挥潜在的抗癌活性。体外AGI-24512 也显示出对 MTAP 缺失肿瘤的体内抗肿瘤活性。
| 靶点 |
MAT2A (methionine adenosyltransferase 2A) – enzymatic IC50 = 8 nM (0.0089 μM), enzymatic maximal inhibition = 91% [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
AGI-24512（0-1 μM；96 小时）通过阻断 MTAP（甲基硫代腺苷磷酸化酶）抑制 HCT116 癌细胞的生长，IC50 值为 100 nM[1]。AGI-24512 抑制 MTAP-/- 细胞中 PRMT5 介导的 SDMA 标记，IC50 值为 95 nM，从而显著增加 MTAP-/- 细胞的表达。在 HCT116 MTAP 细胞中，AGI-24512 诱导 SAM 表达。 AGI-24512 的 IC50 值为 100 nM，S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 水平呈剂量依赖性下降 [2]。在 HCT116 MTAP 缺失细胞中，AGI-24512 处理 4 小时或 72 小时后，S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 水平呈剂量依赖性下降，IC50 值为 100 nM (0.100 μM)（表 3 和正文）。[2] AGI-24512 在 HCT116 工程化同源细胞模型中表现出对 MTAP 缺失细胞的选择性抗增殖活性（未提供具体的 IC50 值）。 [2] 作用机制研究证实，AGI-24512 与化合物 2 一样，对 ATP 和 L-蛋氨酸底物均不具有竞争性（见补充信息图 S2）。[2] 用 AGI-24512 处理后，观察到 MAT2A 蛋白表达上调，这与之前使用 PF-9366 的研究结果一致。然而，这种反馈机制并未抑制其抗增殖活性，这可能是由于 AGI-24512 的效力增强所致。[2]
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| 体内研究 (In Vivo) |
AGI-24512 在恶性肿瘤中显示出有限的屏障吸收和抑制半衰期 [2]。
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| 酶活实验 |
采用磷酸盐释放法测定MAT2A酶的抑制情况。将MAT2A同源二聚体稀释至1.25 μg/mL，溶于测定缓冲液（50 mM Tris pH 8.0、50 mM KCl、15 mM MgCl₂、0.3 mM EDTA、0.005% BSA）。将待测化合物配制成终浓度的50倍，溶于100% DMSO中。取1 μL化合物稀释液加入40 μL酶稀释液中，于25 °C平衡60 min。加入10 μL底物混合物（500 μM ATP pH 7.0、400 μM L-蛋氨酸，溶于1×测定缓冲液）启动反应，并于25 °C继续孵育60 min。终止反应后，使用PiColorLock Gold试剂盒测定与SAM生成量等摩尔释放的磷酸盐。通过与pH 8.0的磷酸钾缓冲液标准曲线进行比较，确定了产物的绝对含量。[2]
在研究L-蛋氨酸的作用机制时，底物浓度从6.25 μM变化至400 μM，而ATP浓度固定为100 μM。在研究ATP的作用机制时，ATP浓度从15 μM变化至1 mM，而L-蛋氨酸浓度固定为50 μM。[2] 表面等离子共振（SPR）分析：将MAT2A蛋白通过共价连接的抗His IgG固定在CMS传感器芯片上。用EDC/NHS活化芯片表面。将五聚抗His IgG稀释于pH 5.0的乙酸钠溶液中并注入芯片。用1 mM乙醇胺-HCl封闭活性位点。将MAT2A蛋白用运行缓冲液（50 mM Tris pH 8.0、150 mM NaCl、10 mM MgCl2、0.005% P20、0.5 mM TCEP）稀释后，捕获到预先制备的表面上。结合分析使用100 mM的化合物储备液，并用运行缓冲液稀释。[2] 结晶：将20 mg/mL MAT2A与2 mM SAM混合，冰上孵育2小时，生成MAT2A-SAM复合物。采用悬滴气相扩散法，将2 μL MAT2A-SAM复合物与1 μL含有0.2 M LiCl、0.1 M Tris-HCl（pH 7.8-8.4）、16-22% PEG6000和10%乙二醇的孔缓冲液混合，于18 °C下进行结晶。将 20 mg/mL MAT2A 与 2-25 mM 化合物共结晶，然后加入 2 mM SAM，冰上孵育 2 小时，得到抑制剂复合物。将晶体置于含 10% DMSO 的母液中进行冷冻保护，然后快速冷冻。MAT2A-SAM-AGI-24512 的结构以 1.10 Å 分辨率解析（PDB 编号 7KCF）。[2] |
| 细胞实验 |
本研究开发了一种基于HCT116 MTAP-null细胞的细胞检测方法，通过测量不同浓度化合物处理后MAT2A产物SAM的丰度来评估MAT2A抑制情况。细胞用AGI-24512处理4小时或72小时（如表1-3所示），并定量SAM水平以确定IC50值。[2]
在HCT116 MTAP-null和MTAP-WT同源细胞模型中评估了抗增殖活性。AGI-24512显示出对MTAP-null细胞的选择性生长抑制作用（未提供具体的IC50值）。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
AGI-24512在大鼠体内口服吸收率低，半衰期短。[2]
AGI-24512的人肝微粒体提取率（ER）为0.66（表4）。[2] AGI-24512的人血浆蛋白结合率（PPB）为99.9%，游离率为0.09%（表5）。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AGI-24512 是一种变构 MAT2A 抑制剂，对 ATP 和 L-蛋氨酸均无竞争性抑制作用。其结合通过稳定 α-螺旋门的闭合构象，将反应产物 SAM 捕获在活性位点。共晶体结构（PDB 编号 7KCF）证实，C-6 位的酚羟基取代了与 Gly215 相互作用的水分子（水-436）。C-3 位的哌啶基团被 Phe18、Phe20、Phe139、Ser331、Phe333 和 Leu315 残基构成的疏水环境所包裹。AGI-24512 被用作体外工具，以支持进一步的细胞研究，从而评估 MAT2A 的生物学特性。与之前的MAT2A抑制剂（例如PF-9366）相比，其效力增强，即使在细胞适应（MAT2A上调）的情况下，也能维持抗增殖作用。[2]
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| 分子式 |
C24H24N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
400.472965240479
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| 精确质量 |
400.189
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| CAS号 |
2201066-53-5
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| PubChem CID |
134307780
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| 外观&性状 |
White to gray solid powder
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| LogP |
4.1
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| tPSA |
68.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
779
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1C(C2C=CC(=CC=2)O)=C(C)N=C2C(=C(C3C=CC=CC=3)NN21)N1CCCCC1
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| InChi Key |
JDHPOXNOROPDTE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H24N4O2/c1-16-20(17-10-12-19(29)13-11-17)24(30)28-23(25-16)22(27-14-6-3-7-15-27)21(26-28)18-8-4-2-5-9-18/h2,4-5,8-13,25,29H,3,6-7,14-15H2,1H3
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| 化学名 |
6-(4-hydroxyphenyl)-5-methyl-2-phenyl-3-(piperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-7(4H)-one
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| 别名 |
AGI-24512 AGI 24512 AGI24512.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~312.13 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.19 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4971 mL | 12.4853 mL | 24.9707 mL | |
| 5 mM | 0.4994 mL | 2.4971 mL | 4.9941 mL | |
| 10 mM | 0.2497 mL | 1.2485 mL | 2.4971 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
