| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HIF-1α; NLRP3 inflammasome (including NLRP3, ASC, caspase-1) [4]
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| 体外研究 (In Vitro) |
圣洁莓苷（100 μM，12–20 小时）可降低 LPS（1 μg/mL/100 ng/mL）刺激的 RAW264.7 和 HT-29 细胞中 iNOS、COX-2 和 IL-8 蛋白的表达；圣洁莓苷（0.1-2500 ng/mL，20–96 小时）随后以时间和剂量依赖的方式促进 HUVEC 细胞增殖，从而促进血管生成（EC50= 1.376 µg/mL）[3]。圣洁莓苷（3 μM，4 小时）显著降低了 LPS（10 μg/mL）刺激的成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）中 caspase-1、ASC、NLRP3、HIF-1α、IL-1β 和 IL 的表达。抑制因子-18水平[4]。
在LPS处理的大鼠成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）中，AGN（3 μM）处理24小时可显著降低LPS刺激引起的caspase-1活性升高[4]。 AGN（3 μM）可阻止LPS诱导的FLS中HIF-1α mRNA和蛋白水平的上调[4]。 AGN逆转了LPS促进的caspase-1、ASC和NLRP3 mRNA表达，并降低了pro-caspase-1和cleaved caspase-1 p10的蛋白水平[4]。 AGN显著降低了LPS处理的FLS上清液中促炎因子IL-1β和IL-18的含量[4]。 在LPS处理的FLS中，AGN（3 μM，24小时）可下调mRNA和纤维化标志物TGF-β、TIMP1和VEGF的蛋白表达[4]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
圣洁莓苷（6.25 mg/kg；口服剂量；单次给药）以剂量依赖的方式降低Balb/C小鼠体内的过敏介质水平，并具有抗过敏介质的作用[1]。圣洁莓苷（6.25 mg/kg；口服模型；单次给药）抑制Balb/C小鼠模型中的过敏反应和自噬[1]。它能减轻膝骨关节炎（KOA）的滑膜炎和纤维化[4]。
在MIA诱导的KOA模型大鼠中，口服AGN（6.25 mg/kg，连续21天）可有效缓解滑膜组织的局部缺氧，如匹莫尼达唑染色和HIF-1α免疫组化所示，HIF-1α阳性区域的百分比降低，HIF-1α mRNA水平也降低[4]。 AGN治疗降低了KOA大鼠滑膜组织中pro-caspase-1、caspase-1 p10、ASC和NLRP3的mRNA和蛋白水平[4]。 与KOA组相比，AGN治疗的KOA大鼠血清中IL-1β和IL-18水平显著降低[4]。 HE染色显示，AGN治疗的KOA大鼠滑膜内衬细胞排列有序，结缔组织疏松，炎症细胞浸润减少，根据Krenn标准，滑膜炎评分降低[4]。 解剖学观察和天狼星红染色显示，AGN治疗的KOA大鼠的胶原沉积显著减少[4]。 I型胶原的免疫组织化学染色显示，AGN组中I型胶原阳性区域的百分比显著降低[4]。 AGN治疗显著降低了KOA大鼠滑膜组织中纤维化标志物TGF-β、TIMP1和VEGF的mRNA和蛋白表达[4]。 |
| 酶活实验 |
为了解先导化合物与VEGFR2结合位点的相互作用机制，我们使用AutoDockTools进行了分子对接。我们定义了一个网格框，框内包含ATP结合位点周围10 Å范围内的所有残基。为了考虑受体的柔性，我们考虑了Glu885的侧链柔性。我们应用拉马克遗传算法，进行了50次运行，种群规模为50。我们使用AutoDock的经验结合自由能函数计算了结合能、静电能、范德华力、氢键能、去溶剂化能和总内能。结果显示，Agnuside能够对接至VEGFR2活性位点，结合能为-11.28 kcal/mol。其结合特征表现为：与Leu889和Val899侧链形成疏水网络；通过其C=O连接基团与Lys868和Asp1046形成氢键受体相互作用；以及通过羟基与Glu885形成氢键供体相互作用。 [3]
- 为评估agnuside是否能与高选择性VEGFR2抑制剂（ZM 323881 HCl，IC50 < 2 nM）竞争VEGFR2结合位点，我们进行了一项额外的血管生成实验，作为竞争性配体实验。将HUVECs细胞预先用0.1 ng/mL agnuside处理30分钟，使其占据靶受体的活性位点，随后加入1 nM ZM 323881 HCl。[3] |
| 细胞实验 |
从正常大鼠中获取原代大鼠成纤维细胞样滑膜细胞 (FLS)。将滑膜组织用 PBS 洗涤，切成 2-3 mm² 的小块，用 0.1% II 型胶原酶消化 30 分钟，通过细胞筛过滤，并在 1500 rpm 下离心 4 分钟。将细胞培养于含 10% FBS 和抗生素的 DMEM 培养基中。使用第 3-6 代细胞 [4]。
为了模拟 KOA 的炎症环境并激活 NLRP3 炎症小体，将 FLS 在 DMEM 培养基中用 LPS (10 μg/ml) 刺激 6 小时，作为 KOA 组。LPS+AGN 组在 LPS 刺激后用 AGN (3 μM) 处理 24 小时 [4]。 使用 caspase-1 活性检测试剂盒测定 caspase-1 活性。处理后，收集FLS细胞，并使用酶标仪在405 nm处测量吸光度。计算caspase-1活性相对于正常组的相对变化[4]。 蛋白质印迹：将FLS细胞与RIPA裂解液混合，研磨10-15分钟。采用BCA法定量蛋白水平。将样品进行SDS-PAGE电泳，转移至PVDF膜，用5%脱脂奶粉封闭2小时，4℃下与一抗（1:1000）孵育过夜，再与二抗孵育2小时。采用ECL法显色，以肌动蛋白为内参定量灰度值[4]。 定量实时PCR：使用TRIzol提取总RNA，并使用PrimeScript RT试剂盒进行逆转录。使用ABI PRISM 7300 qPCR仪，采用SYBR Green PCR法进行qPCR。mRNA水平以GAPDH为内参进行标准化，并采用2^(-ΔΔCT)法计算[4]。 ELISA：使用商业化的鼠ELISA试剂盒，按照制造商的说明[4]测定培养基中IL-1β和IL-18的水平。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： Balb/C雌性小鼠模型[1]
剂量： 30 mg/kg，60 mg/kg 给药途径： 灌胃（po）（Bao）；单次给药； 实验结果： LC3B表达降低，Beclin1/p62表达升高（LC3B和Beclin1/p62是自噬标志物）。以剂量依赖的方式降低IgE和IL-4/IL-10水平。（IgE和IL-4/IL-10是过敏性炎症介质） 动物/疾病模型： KAO大鼠模型[4] 剂量： 6.25 mg碘乙酸钠（MIA）：1 mg 给药途径： 灌胃（po）；单剂量 实验结果：降低大鼠滑膜组织局部缺氧程度，显著降低滑膜组织中促纤维化物质的水平。抑制HIF-1α积累和NLRP3炎症小体活化。 24只2月龄SD雄性大鼠（体重210-250 g）随机分为三组：正常组、KOA组和KOA+AGN组（每组n=8）。第1天，通过双膝关节内注射1 mg碘乙酸钠（MIA）构建KOA模型。14天后（第14天），开始给药[4]。 将6.25 mg AGN配制成0.5% (w/v)羧甲基纤维素钠的悬浮液，溶于10 ml无菌生理盐水中。 KOA+AGN 组通过灌胃给予口服剂量（1 ml/100 g 体重/天），持续 21 天（直至第 35 天）。另外两组大鼠接受了等体积的羧甲基纤维素钠溶液[4]。 第35天，所有大鼠均用戊巴比妥钠麻醉，然后收集腹主动脉血清和滑膜组织[4]。 为了进行匹莫尼达唑染色以研究滑膜组织缺氧，在处死前45分钟，大鼠被注射60 mg/kg的盐酸匹莫尼达唑[4]。 滑膜组织用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片进行HE染色（根据Krenn评分标准）、天狼星红染色和免疫组织化学染色[4]。 24只2月龄SD雄性大鼠（体重210-250 g）随机分为三组：正常组、KOA组和KOA+AGN组（每组n=8）。在第1天，通过向双膝关节内注射1 mg碘乙酸钠（MIA）构建KOA模型。14天后（第14天），开始给药[4]。 将AGN（6.25 mg）配制成悬浮液，溶于10 ml无菌生理盐水中，并加入0.5% (w/v)羧甲基纤维素钠。KOA+AGN组通过灌胃给予口服剂量（1 ml/100 g体重/天），持续21天（至第35天）。另外两组大鼠接受等体积的羧甲基纤维素钠溶液[4]。 第35天，所有大鼠均用戊巴比妥钠麻醉，然后收集腹主动脉血清和滑膜组织[4]。 为了进行匹莫尼达唑染色以研究滑膜组织缺氧，在处死前45分钟，大鼠注射60 mg/kg的盐酸匹莫尼达唑[4]。 将滑膜组织固定于10%中性福尔马林溶液中，石蜡包埋，切片进行HE染色（根据Krenn评分标准）、天狼星红染色和免疫组织化学染色[4]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
圣洁莓苷（Agnuside）被描述为一种无毒的天然小分子提取物，提取自圣洁莓（Vitex agnus-castus）。[3]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
牡荆苷（Agnuside）是一种苯甲酸酯，由4-羟基苯甲酸的羧基与桃叶珊瑚苷的伯羟基缩合而成。它是一种环烯醚萜苷，存在于多种牡荆属植物中，包括牡荆（Vitex agnus-castus）。牡荆苷具有多种功能，包括作为植物代谢产物、抗炎剂、血管生成剂和环氧合酶2抑制剂。它是一种萜类糖苷、环烯醚萜单萜、苯甲酸酯、酚类化合物、β-D-葡萄糖苷、环戊烷和单糖衍生物。其功能与桃叶珊瑚苷相关。牡荆苷已在黄荆（Vitex negundo）、细花毛蕊花（Castilleja tenuiflora）和其他一些具有相关数据的生物体中被报道。另见：牡荆果实（部分）。黄荆叶。
AGN（牡荆苷）是一种无毒的天然小分子，从黄荆（Vitex negundo L.，马鞭草科）提取物中分离得到，属于环烯醚萜苷类化合物[4]。 AGN已被证实具有抗氧化、抗炎、镇痛等多种功效[4]。 本研究首次揭示了HIF-1α和NLRP3炎症小体是AGN的有效干预靶点[4]。 AGN通过抑制HIF-1α的积累和NLRP3炎症小体的激活，减轻实验性膝骨关节炎（KOA）的滑膜炎和纤维化，表明其在治疗人类KOA方面具有潜在价值[4]。 |
| 分子式 |
C22H26O11
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|---|---|
| 分子量 |
466.4352
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| 精确质量 |
466.147
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| CAS号 |
11027-63-7
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| PubChem CID |
442416
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
785.5±60.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
134-136ºC
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| 闪点 |
273.5±26.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.681
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| LogP |
-1.24
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| tPSA |
175.37
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
747
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| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
O(C1([H])C([H])(C([H])(C([H])(C([H])(C([H])([H])O[H])O1)O[H])O[H])O[H])C1([H])C2([H])C(C([H])([H])OC(C3C([H])=C([H])C(=C([H])C=3[H])O[H])=O)=C([H])C([H])(C2([H])C([H])=C([H])O1)O[H]
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| InChi Key |
GLACGTLACKLUJX-QNAXTHAFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H26O11/c23-8-15-17(26)18(27)19(28)22(32-15)33-21-16-11(7-14(25)13(16)5-6-30-21)9-31-20(29)10-1-3-12(24)4-2-10/h1-7,13-19,21-28H,8-9H2/t13-,14+,15+,16+,17+,18-,19+,21-,22-/m0/s1
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| 化学名 |
[(1S,4aR,5S,7aS)-5-hydroxy-1-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-1,4a,5,7a-tetrahydrocyclopenta[c]pyran-7-yl]methyl 4-hydroxybenzoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~214.39 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1439 mL | 10.7195 mL | 21.4390 mL | |
| 5 mM | 0.4288 mL | 2.1439 mL | 4.2878 mL | |
| 10 mM | 0.2144 mL | 1.0719 mL | 2.1439 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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