Altretamine (ENT-50852)   中文名称: 六甲蜜胺

DNA (alkylation target, mediating DNA damage) [1]

六甲蜜是一种抗肿瘤药。[1]

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六甲蜜胺（Altretamine, ENT-50852）作为单独的DNA损伤剂，对人肺癌MV522细胞具有抗增殖活性。在10-100 μM浓度范围内，以剂量依赖性方式抑制MV522细胞增殖，50 μM浓度孵育72小时后，单药生长抑制率约为42%[1]
- 与irofulven（一种DNA反应性药物）联用时，在MV522细胞中表现出协同抗增殖效应。在达到50%生长抑制的有效剂量（ED50）水平，协同指数（CI）为0.72，提示强协同作用。联合处理（六甲蜜胺25 μM + irofulven 0.5 μM）的生长抑制率约为78%，显著高于单药处理的叠加效应（六甲蜜胺单药：~30%；irofulven单药：~25%）[1]
- 协同机制涉及DNA损伤增强：与六甲蜜胺单药相比，联合处理使DNA双链断裂数量（通过γ-H2AX染色检测）增加约2.3倍，导致G2/M期细胞周期阻滞和凋亡细胞增多[1]

与 IrofuLven（100, 133 mg/kg，腹膜内注射）联合使用时，MV522 细胞的抗肿瘤作用可以增强[1]。

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在MV522肺癌异种移植裸鼠模型中，六甲蜜胺（Altretamine, ENT-50852）单药及与irofulven联用均能抑制肿瘤生长。腹腔注射六甲蜜胺（100 mg/kg，每3天1次，共4个周期），与溶媒对照组相比，肿瘤体积缩小约35%，肿瘤重量减轻约32%[1]
- 六甲蜜胺（100 mg/kg，相同给药周期）与irofulven（10 mg/kg，腹腔注射，每3天1次，共4个周期）联合使用表现出更优的抗肿瘤疗效：肿瘤体积缩小约68%，肿瘤重量减轻约65%。与溶媒组相比，联合处理使小鼠中位生存期延长约28%，且毒性未较单药处理明显增加[1]
- 肿瘤组织免疫组织化学分析显示，与六甲蜜胺单药相比，联合处理使γ-H2AX阳性细胞（DNA损伤标志物）增加约2.1倍，TUNEL阳性凋亡细胞增加约1.8倍[1]

MV522细胞增殖及协同作用实验：MV522细胞以3×10³个/孔接种于96孔板，培养24小时后，分别用单独六甲蜜胺（Altretamine, ENT-50852）（0-200 μM）或与irofulven（0-2 μM）联合处理72小时。磺酰罗丹明B（SRB）染色检测细胞活力，计算生长抑制率；采用Chou-Talalay法确定协同指数（CI）以评估协同效应[1]
- DNA损伤及细胞周期实验：MV522细胞接种于6孔板，用六甲蜜胺单药（50 μM）或与irofulven（1 μM）联合处理48小时。细胞经固定、透化后，用抗γ-H2AX抗体染色（免疫荧光显微镜）检测DNA双链断裂；碘化丙啶染色后流式细胞术分析细胞周期分布，评估G2/M期阻滞情况[1]

小鼠：4周龄、体重18-22克的Balb/c nu/nu雌性小鼠皮下注射800万至1000万个MV522细胞。肿瘤植入后第10天开始，每周腹腔注射三次二甲双胍，持续三周。测量肿瘤的两个垂直直径，并使用公式w = [(宽度)² × 长度/2]估算肿瘤重量（TW）。必要时，将阿曲他明配制成浓度为1-10 mg/mL的40% DMSO/生理盐水储备液[1]，然后用10% DMSO/生理盐水稀释。

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MV522肺癌异种移植模型：将5×10⁶个MV522细胞皮下接种到裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约 150 mm³ 时，将小鼠随机分为三组（每组 n=8）：载体对照组、单独使用阿曲他明组和阿曲他明联合伊罗氟文组。阿曲他明（ENT-50852）溶于 5% DMSO + 95% 生理盐水中，以 100 mg/kg 的剂量腹腔注射，每 3 天一次，共 4 个疗程。伊罗氟文以 10 mg/kg 的剂量腹腔注射，给药方案与阿曲他明相同。每 3 天使用游标卡尺测量肿瘤体积，并在治疗结束后处死小鼠并记录肿瘤重量。收集肿瘤组织进行 γ-H2AX 和 TUNEL 染色免疫组织化学分析[1]

吸收、分布和排泄
人体尿液代谢物为阿曲他明的N-去甲基化同系物，24小时内未代谢的阿曲他明排泄量<1%。
口服后吸收迅速且良好；然而，由于肝脏代谢迅速，血浆峰浓度存在个体差异。
……口服阿曲他明后，患者间和患者内的生物利用度差异是该药物有效临床应用的重要缺陷。这种差异似乎主要与首过效应有关，因此可以通过静脉给药来克服。过去尝试静脉给药均未成功……
由于阿曲他明具有高度脂溶性，因此会分布到脂质含量高的组织（例如，大网膜和皮下组织）。
蛋白结合率：游离分数：阿曲他明：6%；五甲基三聚氰胺：25%；四甲基三聚氰胺：50%。
有关阿曲他明（共10种）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
生物转化主要在肝脏进行。代谢是其发挥活性的必要条件。阿曲他明在细胞色素P450酶的催化下发生快速且广泛的去甲基化。
在向携带20日龄M5076/73A卵巢癌的C57Bl/6J雌性小鼠腹腔注射单次2,4,6-14C-六甲基三聚氰胺（50 mg/kg）后，研究了六甲基三聚氰胺（HMM）及其代谢物在肝脏、肿瘤、血液、肾脏、脾脏、肺、脑、心脏和小肠中的共价结合情况。 ...还研究了HMM的代谢。在三个时间点测定了五甲基三聚氰胺（PMM）、2,2,4,6-四甲基三聚氰胺（TMM）和2,4,6-三甲基三聚氰胺（TriMM）的组织分布。2小时后，药物已广泛代谢，TriMM是所测定代谢物中的主要代谢物。
...在包括人类在内的所有动物物种中，阿曲他明均发生氧化性N-去甲基化反应，生成羟甲基衍生物作为中间体。羟甲基三聚氰胺被认为是该药物细胞毒性和抗肿瘤活性的主要来源。
在大鼠中，25 mg/kg剂量的六甲基三聚氰胺或五甲基三聚氰胺有40%以代谢物的形式经尿液排出，其中超过95%为N2N4-二甲基三聚氰胺和一甲基三聚氰胺。六甲基三聚氰胺或五甲基三聚氰胺及其N-去甲基代谢物的胆汁排泄量不足给药剂量的2%。仅有3%随粪便排出，表明部分进入胆汁的甲基三聚氰胺在肠道内被重吸收。在接受六甲基三聚氰胺或五甲基三聚氰胺治疗的大鼠的尿液或胆汁中，仅检测到微量的甲基三聚氰胺与葡萄糖醛酸或硫酸盐的结合物。然而，五甲基三聚氰胺的一种性质尚不明确的结合产物是五甲基三聚氰胺治疗后的主要代谢产物。

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生物半衰期
4.7-10.2 小时
消除/半衰期/-β相：范围，4.7 至 10.2 小时。

肝毒性
阿曲他明治疗与血清酶升高发生率较低相关，但这些升高通常较轻微且可自行消退，无需调整剂量。已有少数阿曲他明引起临床表现明显的急性肝损伤的病例报道，但其临床特征尚未明确。阿曲他明尚未被明确证实与肝窦阻塞综合征相关，但它很少用于肿瘤性疾病或骨髓移植的预处理方案中，而烷化剂在这些情况下通常与该并发症相关。
可能性评分：E（不太可能，但怀疑是罕见的肝损伤原因）。

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蛋白结合率
94%

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毒性数据
人（口服）：TDL0 8 mg/kg
大鼠（口服）：LD50 350 mg/kg
大鼠（腹腔注射）：LD50 265 mg/kg
小鼠（口服）：LD50 437 mg/kg
小鼠（腹腔注射）：LD50 200 mg/kg
小鼠（静脉注射）：LD50 171 mg/kg

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药物相互作用
引起血液疾病的药物（白细胞减少症）如果同时或近期接受的药物治疗也会引起血小板减少症，则阿曲他明引起的血小板减少症可能会加重；如有必要，应根据血细胞计数调整阿曲他明的剂量。
放射治疗可能会加重骨髓抑制；当同时或先后使用两种或两种以上骨髓抑制剂（包括放射线）时，可能需要减少阿曲他明的剂量。
阿曲他明与单胺氧化酶 (MAO) 抑制剂（包括呋喃唑酮、丙卡巴肼和司来吉兰）同时使用可能会导致严重的体位性低血压。
由于阿曲他明治疗可能会抑制正常的免疫防御机制，因此患者对灭活疫苗的抗体反应可能会降低。停用引起免疫抑制的药物与患者恢复对疫苗的反应能力之间的时间间隔取决于所用免疫抑制药物的强度和类型、基础疾病以及其他因素。估计持续时间为 3 个月至 1 年）
有关 ALTRETAMINE（共 6 种）的更多相互作用（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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非人类毒性值
大鼠口服 LD50 350 mg/kg
豚鼠口服 LD50 255 mg/kg

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体内试验表明，在测试剂量下，Altretamine (ENT-50852) 与 irofulven 联合用药未引起小鼠体重（与对照组相比体重减轻 < 10%）或器官指数（肝脏、肾脏、脾脏）的显著变化。主要器官（H&E 染色）未观察到明显的组织学异常[1]

[1]. Synergy of irofulven in combination with other DNA damaging agents: synergistic interaction with altretamine, alkylating, and platinum-derived agents in the MV522 lung tumor model. Cancer Chemother Pharmacol. 2008 Dec;63(1):19-26.

根据州或联邦政府的标签要求，阿曲他明可能引起发育毒性和男性生殖毒性。
六甲基三聚氰胺是一种无色结晶固体，不溶于水。(NTP, 1992)
六甲基三聚氰胺是一种三氨基-1,3,5-三嗪类化合物。
它是一种烷化剂，曾被提议用作抗肿瘤药物。它还可以作为雄性家蝇和其他昆虫的化学绝育剂。
阿曲他明是一种烷化剂。阿曲他明的作用机制是烷化活性。
阿曲他明是一种口服烷化剂，曾被称为六甲基三聚氰胺，目前用作晚期卵巢癌的二线治疗药物。阿曲他明治疗期间血清酶升高发生率较低，且极少发生急性、临床上明显的损伤。
阿曲他明是一种合成的细胞毒性三嗪衍生物，其结构与烷化剂三乙烯三胺类似，具有抗肿瘤活性。尽管阿曲他明发挥细胞毒性作用的确切机制尚不清楚，但阿曲他明的N-去甲基化可能产生活性中间体，这些中间体与DNA共价结合，导致DNA损伤。 (NCI04)
1,3,5-三嗪的六甲基-2,4,6-三胺衍生物。

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药物适应症
用于一线顺铂和/或烷化剂联合化疗后持续性或复发性卵巢癌患者的姑息治疗，可作为单一药物使用。

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作用机制
尽管阿曲他明被归类为烷化抗肿瘤药物，但其发挥细胞毒性作用的确切机制尚不清楚。该药物通过N-去甲基化代谢为烷化剂。这些烷化剂随后损伤肿瘤细胞。
确切的作用机制尚不清楚。尽管阿曲他明的结构与烷化剂相似，但尚未发现其具有体外烷化活性。有证据表明它可能抑制DNA和RNA的合成。
六甲基三聚氰胺类似物曲美拉莫（三羟甲基[三甲基]三聚氰胺）及其等细胞毒性的稳定类似物CB 7547、CB 7639和CB 7669已被用于阐明N-(羟甲基)三聚氰胺作为抗肿瘤药物的作用机制。目前已提出并研究了两种主要机制：(i) 形成活性亚胺离子，与DNA形成共价加合物；(ii) 局部释放甲醛导致细胞毒性损伤。³²P标记和热变性实验表明，这些化合物与胞嘧啶和鸟嘌呤相互作用。曲美拉莫可在裸露的质粒DNA和培养的细胞系中产生DNA链间交联，而其类似物在多种实验条件下均未产生此作用。结合我们观察到的对N-(羟甲基)三聚氰胺产生耐药性的细胞系对经典双功能烷化剂没有明显的交叉耐药性，DNA交联可能在其作用机制中仅起次要作用。在培养的细胞系中，用甲醛、三甲酚和CB 7639处理后，DNA-蛋白质交联水平升高，并在24小时内逐渐消失。结合先前观察到的对三甲酚的耐药性与对甲醛的交叉耐药性同时出现，研究人员得出结论，甲醛的释放可能是其细胞毒性的一个重要因素。此外，谷胱甘肽耗竭并不影响三甲酚或甲醛对人卵巢癌细胞的细胞毒性。 N-(羟甲基)三聚氰胺/

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治疗用途
抗肿瘤药
阿曲他明适用于一线顺铂和/或烷化剂联合化疗后持续性或复发性上皮性卵巢癌患者的姑息治疗。/美国产品标签包含/
阿曲他明联合治疗在小细胞肺癌的某些治疗阶段被认为是合理的药物治疗（证据等级：IA）。/美国产品标签未包含/

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药物警告
继发性恶性肿瘤是许多抗肿瘤药物潜在的迟发性副作用，但尚不清楚这种副作用是与其致突变作用还是免疫抑制作用相关。剂量和疗程的影响也未知，但长期使用似乎会增加风险。尽管信息有限，但现有数据似乎表明，烷化剂的致癌风险最高。
阿曲他明的骨髓抑制作用可能导致微生物感染发生率增加、伤口愈合延迟和牙龈出血。牙科治疗应尽可能在开始治疗前完成，或推迟到血细胞计数恢复正常后再进行。应指导患者在治疗期间保持良好的口腔卫生，包括谨慎使用普通牙刷、牙线和牙签。
发生频率较高的不良事件……提示需要就医：贫血（异常疲倦）；白细胞减少症（发热或寒战；咳嗽或声音嘶哑；腰背部或侧腹疼痛；排尿疼痛或困难）；神经毒性，包括中枢神经系统（CNS）影响（焦虑；笨拙；意识混乱；头晕；精神抑郁；虚弱；癫痫发作）。神经毒性，包括周围神经病变（手臂或腿部麻木）；血小板减少症（异常出血或瘀伤；黑便、柏油样便；尿血或便血；皮肤上出现针尖大小的红点）。发生率/罕见。肝毒性；皮疹或瘙痒。
对已知对阿曲他明过敏的患者禁用阿曲他明。
有关阿曲他明（共11条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药效学
阿曲他明是一种新型抗肿瘤药物。阿曲他明发挥细胞毒性作用的确切机制尚不清楚，尽管已研究了多种理论可能性。从结构上看，阿曲他明与烷化剂三乙烯三聚氰胺相似，但体外试验表明，阿曲他明及其代谢产物不具有烷化活性。阿曲他明已被证实对某些对传统烷化剂耐药的卵巢肿瘤有效。阿曲他明的代谢是其发挥细胞毒性的必要条件。合成的单羟甲基三聚氰胺以及阿曲他明代谢产物，在体外和体内均可与包括DNA在内的组织大分子形成共价加合物，但这些反应与抗肿瘤活性的相关性尚不清楚。

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阿曲他明（ENT-50852）是一种烷化剂类化疗药物，通过烷基化DNA、诱导DNA损伤以及抑制肿瘤细胞增殖和DNA修复发挥抗肿瘤作用[1]。
- 它与伊罗氟文的协同作用归因于互补的DNA损伤途径：阿曲他明主要诱导DNA烷基化，而伊罗氟文介导DNA交联和链断裂，从而增强细胞毒性并降低肿瘤细胞耐药性[1]。
- 该药物在体外和体内均显示出对MV522肺癌细胞的单药抗肿瘤活性，与伊罗氟文联合使用时疗效更佳，这支持了……在肺癌联合化疗中的潜在应用[1]

C9H18N6

210.28

210.159

C, 51.41; H, 8.63; N, 39.97

645-05-6

2123

White to off-white solid powder

1.1±0.1 g/cm3

339.4±25.0 °C at 760 mmHg

171-175 °C(lit.)

159.1±23.2 °C

0.0±0.7 mmHg at 25°C

1.610

2.42

48.39

0

6

3

15

148

0

N(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C1N=C(N=C(N=1)N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]

UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C9H18N6/c1-13(2)7-10-8(14(3)4)12-9(11-7)15(5)6/h1-6H3

2-N,2-N,4-N,4-N,6-N,6-N-hexamethyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (3.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。