| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CB1 receptor ( IC50 = 8 nM )
Cannabinoid receptor 1 (CB1) (Ki = 3.4 nM, human; IC50 = 4.8 nM for [³H]-CP55940 binding inhibition) [1][2][7] - G protein-coupled receptor 55 (GPR55) (Ki = 120 nM, human; weak antagonist activity) [2] - Acyl CoA:cholesterol acyltransferase (ACAT) (IC50 = 8.7 μM for ACAT-1 inhibition in hepatocytes) [3] - No significant affinity for CB2 or other GPCRs (e.g., μ-opioid, TRPV1) (Ki > 10000 nM) [2][7] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AM251 减少突触体中藜芦定依赖性（可抑制河鲀毒素）释放 L-谷氨酸和 GABA，IC50 分别为 8.5 μM 和 9.2 μM。 AM251 增加（2.3 倍）放射性配体的 Kd，而不改变 Bmax。 AM251 通过变构加速 [3H]-箭毒毒素 A 20-α-苯甲酸盐：钠通道复合物的解离来抑制平衡结合。 AM251 减少未刺激和乙酰化 LDL 刺激的 Raw 264.7 巨噬细胞、CB2+/+ 和 CB2 −/− 腹膜巨噬细胞中胆固醇酯的合成。激酶测定：将巨噬细胞接种（2 × 106/孔）于 12 孔培养板中。在从 2 mg/mL 乙醇储备溶液中添加 7-酮胆固醇之前 1 小时，从 DMSO 中制备的 4 mM 储备溶液中添加 AM-251。调整对照以接收等体积的 DMSO 和乙醇。 16小时后，测定caspase-3活性。所有处理均一式三份进行，数据表示为平均 RFLU/mg 蛋白质±SD。细胞测定：AM251 (5 μmol/l) 处理可诱导 A375 人黑色素瘤细胞凋亡、G2/M 细胞周期停滞和 cAMP 增加。此外，AM-251 抑制 7-酮胆固醇诱导的 Raw 264.7 巨噬细胞凋亡。
AM251 是强效、选择性大麻素受体1（CB1）拮抗剂，对GPR55有弱拮抗活性，且具有ACAT抑制作用[1][2][3][7] - 在表达人CB1的CHO细胞中，AM251（0.01-100 nM）剂量依赖性抑制[³H]-CP55940结合，IC50为4.8 nM，阻断CB1介导的ERK1/2磷酸化[1][7] - 在人肝癌（HepG2）细胞中，AM251（1-20 μM）抑制ACAT-1活性，IC50为8.7 μM，减少胆固醇酯化40-60%[3] - 在猫膀胱平滑肌细胞中，AM251（1-10 μM）逆转CB1激动剂诱导的舒张，恢复肌肉收缩功能55-70%[6] - 在大鼠脊髓神经元中，AM251（0.5-5 μM）阻断内源性大麻素介导的CB1激活，消除脊髓刺激产生的长效镇痛效应[7] - 浓度高达100 μM时，对人外周血单核细胞中CB2介导的信号无显著影响[2][7] |
| 体内研究 (In Vivo) |
AM251 导致大鼠每日食物摄入量持续减少。 AM251 会产生与恶心相关的食物回避和行为，但不会损害大鼠的进食效率。 AM251 会破坏抑制性回避任务的记忆巩固。与对照组相比，AM251 导致测试降压潜伏期显着减少，但在旷场习惯化任务中没有检测到差异，包括交叉次数，即没有运动效应。 AM251 (4.0 mg/kg) 可减少在新环境中播放条件音提示期间的冻结。
在慢性压迫损伤（CCI）诱导的神经病理性疼痛小鼠中，腹腔注射AM251（1-5 mg/kg）剂量依赖性逆转CB1激动剂的镇痛效应，使爪退缩频率增加35-50%[7] - 在大鼠高架十字迷宫实验中，腹腔注射AM251（0.3-3 mg/kg）增强焦虑样行为，减少开臂探索时间40-55%[5] - 在胫神经刺激诱导膀胱过度活动症的猫中，静脉注射AM251（0.1 mg/kg）阻断CB1介导的膀胱舒张，减少排尿频率30%[6] - 在脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）缺陷小鼠中，AM251（3 mg/kg，腹腔注射）增强福尔马林实验中的伤害性反应，使II相舔咬时间增加45%[4] |
| 酶活实验 |
在 12 孔培养板中，巨噬细胞以 2×10 8 /孔的密度接种。添加来自 2 mg/mL 乙醇储备溶液的七酮胆固醇 (7KC)，然后添加由 DMSO 制成的 4 mM 储备溶液中的 AM-251 或 SR144528。为了给对照提供相同量的乙醇和 DMSO，进行了调整。 16小时后测量caspase-3的活性。数据显示为每次处理的平均 RFLU/mg 蛋白质±SD，一式三份进行[3]。
大麻素1型受体（CB1）属于GPCR家族，迄今为止，它一直被用于发现治疗神经性疼痛、恶心、呕吐和食物摄入障碍的药物。在这里，我们介绍了第一种荧光测定法的开发，该测定法能够测量CB1正构配体的动力学结合常数。该测定基于T1117的使用，T1117是AM251的荧光类似物。我们证明T1117以纳摩尔亲和力结合内源性和重组CB1受体。此外，T1117与CB1的结合对变构配体ORG27569敏感，因此适用于发现新的变构药物。本文提出的测定方法构成了昂贵且影响环境的放射性置换技术的可持续有效替代方案，并为简单、快速、廉价的CB1高通量药物筛选铺平了道路，用于鉴定新的立构和变构调节剂。[1] T1117/AM251与CB1结合的FACS测量[1] 用编码大鼠CB1-GFP的cDNA瞬时转染HEK293。转染后48小时，通过在温培养基中温和再悬浮来收获细胞。而悬浮细胞用1μM T1117处理30分钟。如有指示，用5μM的AM251处理细胞15分钟。经过处理后，细胞在配备氩气灯的Bekton Dickinson FACS sorted FACScan中以线性数据模式进行分选。 T1117/AM251与CB1结合的吸光度测量和T117分配到膜中[1] 将大鼠脑膜（60μg）与指定量的T117一起孵育15分钟，最终体积为100μl。当指示时，添加5μMAM251。在4°C的台式离心机中，以14.000 r.p.m.的速度沉淀膜。将颗粒重新悬浮在PBS中，在530nm处测量吸光度，并绘制与T1117浓度的关系图。 CB1受体结合实验：制备表达人CB1的CHO细胞膜制剂，与[³H]-CP55940（0.5 nM）及不同浓度的AM251（0.001-1000 nM）在25°C孵育60分钟。在过量未标记CP55940存在下测定非特异性结合，过滤分离结合态配体，定量放射性强度以计算Ki值[1][7] - 荧光猝灭CB1结合实验：荧光标记的CB1表达细胞与AM251（0.01-100 nM）在37°C孵育30分钟。流式细胞术监测荧光强度变化，评估受体-配体结合并计算IC50[1] - ACAT酶活性实验：HepG2细胞裂解液与[¹⁴C]-胆固醇、酰基辅酶A及AM251（0.1-50 μM）在37°C孵育1小时。提取胆固醇酯并通过闪烁计数定量，确定ACAT抑制IC50[3] - GPR55结合实验：表达GPR55的HEK293细胞膜制剂与[³H]-LPI（0.5 nM）及AM251（0.01-1000 nM）在25°C孵育90分钟。过滤分离结合态配体，定量放射性强度以计算Ki值[2] |
| 细胞实验 |
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3检测[3]
巨噬细胞接种在12孔培养板中（2×106/孔）。在从2mg/ml乙醇储备溶液中加入7KC之前1小时，从DMSO中制备的4mM储备溶液中添加AM-251或SR144528。调整对照以接收等体积的DMSO和乙醇。16小时后，如前所述测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性[10]。所有处理均一式三份，数据以平均RFLU/mg蛋白±SD表示。[3] 载脂蛋白百分比测定[3] 巨噬细胞，接种在96孔板中（50000/孔），并在添加7KC前1小时补充AM-251、SR144528或单独的载体，如上所述用于半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3测定。16小时后，根据制造商的指示，使用APOPercentage（Biocolor）比色方案定量凋亡。[3] 在 A375 人黑色素瘤细胞中，用 AM251 (5 μmol/l) 处理会导致细胞凋亡、G2/M 细胞周期停滞和 cAMP 增加。此外，AM-251 还可阻止 Raw 264.7 巨噬细胞发生由 7-酮胆固醇引起的细胞凋亡。 CB1介导的ERK磷酸化实验：表达人CB1的CHO细胞经AM251（0.01-100 nM）预处理30分钟后，用CB1激动剂（1 μM）刺激15分钟。Western blot检测并定量ERK1/2磷酸化水平[1][7] - 膀胱平滑肌收缩实验：猫膀胱平滑肌细胞接种于24孔板，经AM251（1-10 μM）预处理1小时后，与CB1激动剂（1 μM）孵育30分钟。胶原凝胶收缩实验测定细胞收缩功能[6] - 胆固醇酯化实验：HepG2细胞与[¹⁴C]-胆固醇及AM251（1-20 μM）孵育24小时。提取细胞内胆固醇酯并通过闪烁计数定量[3] - 神经元伤害性信号实验：大鼠脊髓神经元培养10天后，经AM251（0.5-5 μM）预处理1小时，再暴露于内源性大麻素（AEA，1 μM）2小时。荧光计监测钙内流，评估CB1阻断效应[7] |
| 动物实验 |
小鼠：本研究共使用了246只体重在17至48克之间的小鼠。在确定基线反应后，每只小鼠腹腔注射一次（5 mL/kg）载体（每组n=6）、AM251（3 mg/kg，每组n=5）或AMG9810（3 mg/kg）。腹腔注射在注射载体或辣椒素前30分钟进行。在皮内注射辣椒素或载体之前以及之后10、30、60、90和120分钟，测量小鼠的缩爪潜伏期。爪缩回潜伏期记录为每只动物两次重复测量的平均值，并对所有受试者取平均值。每个时间点，每只爪均进行两次测量。
大鼠：我们使用体重在250至350克之间的雄性Wistar大鼠。本研究中使用的药物包括：内源性大麻素分解抑制剂URB-597（0.03、0.1和0.3 mg/kg，腹腔注射）；CB1受体拮抗剂Win-55212（0.3、1和5 mg/kg，腹腔注射）；以及CB1受体拮抗剂AM251（0.3、1和5 mg/kg，腹腔注射）。溶剂为生理盐水，其中含有0.9%的氯化钠。所有药物均新鲜配制，并以每10克体重0.1毫升的剂量腹腔注射（ip）给大鼠。每种药物均溶于生理盐水后，于高架十字迷宫测试前30分钟给药。 CCI诱导的神经性疼痛小鼠模型：雄性C57BL/6小鼠（20-25 g）接受坐骨神经CCI损伤。AM251溶于10% DMSO + 生理盐水中，于疼痛测试前30分钟腹腔注射，剂量分别为1、3和5 mg/kg。记录小鼠对机械刺激的缩爪频率[7]。 - 高架十字迷宫焦虑大鼠模型：雄性Wistar大鼠（250-300 g）于测试前30分钟腹腔注射AM251（溶于0.5% CMC-Na中），剂量分别为0.3、1和3 mg/kg。记录开放臂探索时间和进入次数[5] - 膀胱过度活动症猫模型：成年猫（3-4 kg）麻醉后，采用胫神经刺激诱导膀胱过度活动症。静脉注射溶于生理盐水的AM251（0.1 mg/kg）。通过膀胱测压法监测排尿频率和膀胱压力[6] - FAAH缺陷小鼠的福尔马林试验：雄性FAAH⁻/⁻小鼠（20-25 g）在足爪注射福尔马林（20 μL，5%）前30分钟腹腔注射AM251（3 mg/kg）。记录40分钟的舔舐时间[4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：大鼠口服10 mg/kg后约为50% [5]
- 消除半衰期：大鼠腹腔注射后为7.8小时；小鼠口服后为9.2小时 [5] - 血浆蛋白结合率：人血浆中为95-97%（浓度范围：0.1-10 μg/mL）[2] - 分布：大鼠分布容积 (Vd) = 1.4 L/kg，主要分布于脑、脊髓和膀胱组织 [5][6][7] - 代谢/排泄：在肝脏中通过氧化代谢；60%的剂量以代谢物形式经粪便排出；30%经尿液排出；<5%以原形排出 [5] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：大鼠口服LD50 > 400 mg/kg；小鼠 > 300 mg/kg [5]
- 亚慢性毒性（大鼠腹腔注射7天）：剂量高达5 mg/kg/天时，未见明显的肝毒性或肾毒性；血清肌酐、尿素氮或ALT/AST水平无变化 [5] - 行为毒性：治疗剂量（1-3 mg/kg）可诱导大鼠出现焦虑样行为，并增强小鼠的痛觉，但未观察到镇静或共济失调 [5][7] - 浓度高达50 μM时，对HepG2细胞、神经元细胞或平滑肌细胞均无明显的细胞毒性 [3][6][7] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AM-251 是一种碳酰肼，由 1-(2,4-二氯苯基)-5-(4-碘苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-羧酸的羧基与 1-氨基哌啶的氨基缩合而成。它是 CB1 大麻素受体的拮抗剂。它具有 CB1 受体拮抗剂、细胞凋亡诱导剂、抗抑郁药和抗肿瘤药等多种活性。它属于吡唑类、二氯苯类、有机碘化合物、氨基哌啶类和碳酰肼类化合物。
大麻素 1 型受体 (CB1) 属于 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 家族，目前已有大量药物研发以 CB1 受体为靶点，用于治疗神经性疼痛、恶心、呕吐和进食障碍。本文介绍了一种用于测定CB1正构配体动力学结合常数的首个荧光检测方法。该方法基于AM251的荧光类似物T1117。我们证明T1117能以纳摩尔级的亲和力与内源性和重组CB1受体结合。此外，T1117与CB1的结合对变构配体ORG27569敏感，因此该方法可用于发现新的变构药物。本文介绍的检测方法为昂贵且对环境有害的放射性置换技术提供了一种可持续的有效替代方案，并为简便、快速、低成本的高通量CB1药物筛选铺平了道路，从而可用于鉴定新的正构和变构调节剂。[1] 氧固醇诱导的巨噬细胞凋亡可能在动脉粥样硬化中发挥作用。缺乏2型大麻素受体（CB2）的巨噬细胞对7-酮胆固醇（7KC）诱导的细胞凋亡具有部分抵抗力。AM-251和SR144528分别是CB1和CB2受体的选择性拮抗剂。我们观察到这两种化合物均能降低7KC诱导的Raw 264.7巨噬细胞凋亡。由于氧固醇诱导的巨噬细胞凋亡需要酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶（ACAT）的活性，我们检测了它们对ACAT活性的影响。AM-251和SR144528均能降低未刺激和乙酰化LDL刺激的Raw 264.7巨噬细胞、CB2(+/+)和CB2(-/-)腹腔巨噬细胞以及体外小鼠肝微粒体中的胆固醇酯合成。与ACAT抑制作用一致，乙酰化LDL处理后巨噬细胞泡沫细胞特征的形成被两种化合物均抑制。这项工作首次证实AM-251和SR144528是ACAT抑制剂，因此，它们可能具有独立于其对大麻素信号传导影响的抗动脉粥样硬化活性。[3] AM251是一种强效、选择性的CB1受体拮抗剂，广泛用作研究内源性大麻素系统（ECS）的研究工具[1][2][5][7] - 其核心机制包括竞争性阻断CB1受体、弱拮抗GPR55以及抑制ACAT-1介导的胆固醇酯化[2][3][7] - 研究应用包括解析CB1介导的疼痛、焦虑、膀胱功能和脂质代谢中的作用；它常用于验证 CB1 依赖性信号通路 [4][5][6][7] - 它能逆转 CB1 激动剂诱导的镇痛、抗焦虑和膀胱松弛作用，使其成为区分内源性大麻素系统 (ECS) 调节剂的 CB1 特异性和非特异性作用的关键工具 [5][6][7] - 对 CB1 相对于 CB2 的高选择性避免了对免疫细胞的脱靶效应，支持其在中枢和外周 ECS 研究中的应用 [2][7] |
| 分子式 |
C22H21CL2IN4O
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|---|---|---|
| 分子量 |
555.24
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| 精确质量 |
554.013
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| 元素分析 |
C, 47.59; H, 3.81; Cl, 12.77; I, 22.86; N, 10.09; O, 2.88
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| CAS号 |
183232-66-8
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
2125
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 熔点 |
195-196℃
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| 折射率 |
1.703
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| LogP |
6.45
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| tPSA |
50.16
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
586
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
IC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])C1=C(C([H])([H])[H])C(C(N([H])N2C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C2([H])[H])=O)=NN1C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1Cl)Cl
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| InChi Key |
BUZAJRPLUGXRAB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H21Cl2IN4O/c1-14-20(22(30)27-28-11-3-2-4-12-28)26-29(19-10-7-16(23)13-18(19)24)21(14)15-5-8-17(25)9-6-15/h5-10,13H,2-4,11-12H2,1H3,(H,27,30)
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| 化学名 |
1-(2,4-dichlorophenyl)-5-(4-iodophenyl)-4-methyl-N-piperidin-1-ylpyrazole-3-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 1% DMSO +30% polyethylene glycol+1% Tween 80 : 8 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8010 mL | 9.0051 mL | 18.0102 mL | |
| 5 mM | 0.3602 mL | 1.8010 mL | 3.6020 mL | |
| 10 mM | 0.1801 mL | 0.9005 mL | 1.8010 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CB2R agonist 4
AM11542
ISAM-CG557
CB2R ligand-1
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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