Amyloid beta-peptide(25-35)

别名: β-淀粉状蛋白 (25-35);β-淀粉状蛋白25-35;BETA-淀粉样蛋白片断25-35;beta-类淀粉蛋白肽(25-35);淀粉样Β-蛋白片段25-35
目录号: V33236 纯度: ≥98%
Beta-Amyloid (25-35)(Amyloid beta-peptide (25-35))是阿尔茨海默病淀粉样蛋白 beta 肽的 Aβ(25-35) 片段,在培养细胞中表现出神经毒性活性。
Amyloid beta-peptide(25-35) CAS号: 131602-53-4
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
β-淀粉样蛋白(25-35)(淀粉样β肽(25-35))是阿尔茨海默病淀粉样β肽的Aβ(25-35)片段,在培养细胞中显示出神经毒性活性。
淀粉样β肽(25-35)(CAS号:131602-53-4)是一种合成肽片段,对应于全长淀粉样β蛋白(Aβ)的第25至35位氨基酸。该特定片段通常缩写为Aβ(25-35),在阿尔茨海默病研究中具有极其重要的意义,因为它保留了全长肽的神经毒性和神经营养活性。它是功能上与阿尔茨海默病相关的神经毒性作用所必需的最短Aβ片段。该肽的分子式为C₄₅H₈₁N₁₃O₁₄S,分子量约为1060.3 g/mol。其序列为Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met (GSNKGAIIGLM)。Aβ(25-35)被广泛用于研究,以模拟淀粉样蛋白病理在细胞和动物模型中的神经毒性、炎症和氧化应激效应,使其成为理解阿尔茨海默病发病机制以及筛选旨在减少淀粉样斑块相关损伤的潜在治疗药物的重要工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary biological target and mechanism of action of Amyloid beta-peptide(25-35) are complex and not fully attributed to a single receptor. It is known to exert its effects by interacting with various cellular components and inducing multiple downstream pathways. One key mechanism is its ability to induce apoptotic effects on isolated brain mitochondria. The redox state of methionine-35 within the peptide plays a critical role in the induction of programmed cell death pathways and toxic events. Furthermore, Aβ(25-35) has been shown to inhibit sodium/calcium exchange activity in rat and human brain plasma membrane vesicles. This disruption of ionic homeostasis is a significant contributor to its neurotoxicity. The peptide also induces neuroinflammation and oxidative stress. Its effects are multifaceted, involving the generation of reactive oxygen species, disruption of calcium signaling, and activation of apoptotic cascades. In cultured cells, it has shown clear neurotoxic activities, which is why it is a standard tool for inducing neurodegeneration in vitro.
体外研究 (In Vitro)
Aβ(25-35)肽的氨基酸序列为NH2-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-COOH,其中第一个Gly代表第25位氨基酸,第二个Gly也代表第25位氨基酸,最后一个Met代表第35位氨基酸。本研究首次以凝胶形式对淀粉样β肽(25-35)进行了研究。此外,还利用振动吸收光谱和圆二色谱(ECD)进行了比较研究。Aβ(25-35)肽膜的结构特性也通过振动吸收光谱和VCD光谱进行了研究[1]。淀粉样β肽(25-35)能够诱导分离的脑线粒体细胞凋亡,并影响甲硫氨酸-35的氧化还原状态,在程序性细胞死亡通路和毒性事件的发生中发挥着至关重要的作用[2]。 β-淀粉样蛋白聚集建议(以下是我们推荐的方法;请根据您的具体需求进行调整,因为它仅提供指导原则)。1. 将固体Aβ肽溶解于冷的六氟异丙醇(HFIP)中。为了实现单体化和结构随机化,将肽在室温下孵育至少1小时。2. 蒸发HFIP,然后将所得肽膜储存于-20或-80°C。3. 将所得膜溶解于5 mM无水DMSO中,涡旋混匀,并用缓冲液(不含血清和酚红的培养基)稀释至适当浓度。4. 之后,将溶液在4–8°C下静置48小时。在4–8°C下以14,000 g离心10分钟后,上清液中含有可溶性寡聚体。在研究中,上清液被稀释了10-200倍。根据最终应用的不同,采用了不同的方法。
淀粉样β肽(25-35)的体外活性以其强效且已被充分证实的神经毒性作用为特征。在培养的神经元细胞中,例如原代皮层神经元或PC12或SH-SY5Y等细胞系,Aβ(25-35)会诱导细胞活力呈浓度依赖性下降。它会触发一系列神经退行性事件,包括活性氧(ROS)的产生、线粒体功能障碍、caspase(执行细胞凋亡的酶)的激活以及钙稳态的破坏。该肽还会诱导神经胶质细胞的炎症反应,导致促炎细胞因子的释放。其活性通常通过测量细胞活力(例如,通过MTT法)、ROS产生或凋亡标志物(如caspase-3活性)来量化。 Aβ(25-35)片段能非常有效地诱导这些效应,使其成为研究阿尔茨海默病分子机制和筛选神经保护化合物的首选模型。
体内研究 (In Vivo)
利用β-淀粉样蛋白(25-35)动物模型可以构建阿尔茨海默病模型。
在体内,向动物模型(通常是啮齿类动物)注射β-淀粉样蛋白(25-35)肽,可以重现阿尔茨海默病病理的关键特征。脑室内(ICV)注射该肽是诱导认知功能障碍和神经退行性变的常用方法。该模型用于研究淀粉样蛋白肽在活体系统中的神经毒性、炎症和氧化应激效应。该肽会导致学习和记忆障碍,可通过莫里斯水迷宫等行为学测试进行评估。它还会引发脑内的神经炎症、胶质细胞活化和氧化应激。该模型广泛用于评估潜在治疗化合物的体内疗效。该肽能够在相对较短的时间内诱导这些病理变化,使其成为阿尔茨海默病研究中一种实用且广泛使用的工具。
酶活实验
由于淀粉样β肽(25-35)的作用机制复杂,通常不进行体外酶或受体结合试验来测定其对单一靶点的亲和力。然而,可以通过多种生化试验来研究其作用。例如,可以通过分离脑线粒体并测量线粒体膜电位、活性氧(ROS)生成和细胞色素c释放等参数来评估其诱导线粒体功能障碍的能力。利用基于脂质体的试验可以研究该肽与细胞膜的直接相互作用,从而了解其破坏细胞膜的特性。利用质膜囊泡可以测定其抑制钠/钙交换的能力。这些无细胞系统使研究人员能够解析Aβ(25-35)发挥毒性作用的具体生化途径,从而深入了解神经退行性疾病的分子机制。
细胞实验
体外细胞实验是研究β-淀粉样蛋白(25-35)神经毒性活性的最常用方法。典型的实验中,将神经元细胞系(例如SH-SY5Y、PC12)或原代皮层神经元培养,并用不同浓度的Aβ(25-35)处理24至72小时,浓度范围通常为1至50 µM。通常,将肽段在37°C溶液中孵育数天使其预聚集,形成有毒的纤维状结构。处理后,使用MTT或CCK-8等比色法检测细胞活力,这些方法可评估线粒体功能。通过检测caspase-3/7活性或使用Annexin V等荧光染料来量化细胞凋亡。通过使用DCFH-DA等荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平来评估氧化应激。这些检测方法能够可靠且可量化地衡量肽的神经毒性,对于筛选神经保护化合物至关重要。
动物实验
体内动物实验是利用β-淀粉样蛋白(Aβ)进行研究的关键组成部分(25-35)。一种常用的实验方案是将Aβ肽脑室内(ICV)注射到啮齿动物(小鼠或大鼠)的脑内。注射前,通常将Aβ肽溶解于无菌生理盐水或人工脑脊液中并使其聚集。可单次给药或在数天内多次给药。注射后,让动物恢复一段时间,然后进行行为学测试以评估认知功能,例如用于评估空间学习和记忆的莫里斯水迷宫测试,或用于评估恐惧记忆的被动回避测试。行为学测试结束后,处死动物,并收集脑组织进行生化和组织学分析。这些分析包括测量氧化应激、神经炎症和细胞凋亡的标志物,以及进行组织病理学染色以评估神经元丢失情况。该模型对于研究Aβ毒性的体内机制和评估候选药物的治疗潜力至关重要。
药代性质 (ADME/PK)
β-淀粉样蛋白(25-35)的药代动力学特性具有肽类药物的典型特征。当通过脑室内注射直接进入脑脊液时,该肽可绕过血脑屏障,并在中枢神经系统内分布。该肽易受内源性肽酶的蛋白水解降解,这限制了其体内半衰期。其从脑内清除主要通过酶促分解和脑脊液的整体流动。该肽的口服生物利用度极低,且全身给药时难以有效穿过血脑屏障,因此在研究中,直接中枢给药是首选途径。出于实验目的,通常将该肽溶解于合适的溶剂中,例如无菌水、生理盐水或二甲基亚砜(DMSO),然后用水性缓冲液稀释。为保持其稳定性,应将其以冻干粉末的形式储存于-20°C。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
淀粉样β肽(25-35)的毒理学特征主要体现在其神经毒性上。在细胞培养中,它对神经元具有直接毒性,可通过细胞凋亡和坏死导致细胞死亡。在体内,当将其注射到大脑中时,会诱发一系列病理效应,包括神经元丢失、突触功能障碍、胶质细胞活化和认知障碍。这些效应是其被用作疾病模型的基础。作为一种研究工具,它不适用于人类治疗。为确保实验室安全,应遵循处理肽类和神经毒性化合物的标准预防措施。这包括佩戴手套和护目镜,以避免皮肤接触和吸入冻干粉末。该肽仅供研究使用。
参考文献

[1]. Solution structure of amyloid beta-peptide (25-35) in different media. J Med Chem. 2004 Aug 12;47(17):4231-8.

[2]. Abeta(31-35) and Abeta(25-35) fragments of amyloid beta-protein induce cellular death throughapoptotic signals: Role of the redox state of methionine-35. FEBS Lett. 2005 May 23;579(13):2913-8.

[3]. Cognitive improvement of compound danshen in an Aβ25-35 peptide-induced rat model of Alzheimer's disease. BMC Complement Altern Med. 2015 Oct 23;15:382.

[4]. Potent anti-angiogenic motifs within the Alzheimer beta-amyloid peptide. Amyloid. 2008;15(1):5-19.

[5]. Ropren® is a polyprenol preparation from coniferous plants that ameliorates cognitive deficiency in a rat model of beta-amyloid peptide-(25–35)-induced amnesia. Phytomedicine. 2012 Mar 15;19(5):451-6.

其他信息
β-淀粉样蛋白肽(25-35)是一种合成肽,代表β-淀粉样蛋白的关键片段,该蛋白是阿尔茨海默病病理的核心。其序列(GSNKGAIIGLM)高度保守,是复制全长肽的神经营养和神经毒性作用所需的最小片段。这使其成为阿尔茨海默病研究不可或缺的工具,使科学家能够在简化的模型中研究神经退行性变的机制。该肽可从众多化学供应商处获得,并广泛应用于从基础机制研究到潜在治疗化合物筛选的各种研究领域。值得注意的是,该肽的活性高度依赖于其聚集状态,因此制备具有毒性的寡聚体或纤维状形式的肽的方案对于实验的一致性至关重要。该肽仅供研究使用,不得用于人类治疗或诊断。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C45H81N13O14S
分子量
1060.2683
精确质量
1059.57
CAS号
131602-53-4
PubChem CID
3407255
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.249g/cm3
沸点
1517.336ºC at 760 mmHg
闪点
871.453ºC
蒸汽压
0mmHg at 25°C
折射率
1.544
LogP
1.058
tPSA
468.96
氢键供体(HBD)数目
15
氢键受体(HBA)数目
17
可旋转键数目(RBC)
37
重原子数目
73
分子复杂度/Complexity
1880
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
WIHBNMPFWRHGDF-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C45H81N13O14S/c1-9-24(5)36(43(69)50-21-35(63)52-29(17-23(3)4)40(66)55-28(45(71)72)14-16-73-8)58-44(70)37(25(6)10-2)57-38(64)26(7)51-34(62)20-49-39(65)27(13-11-12-15-46)54-41(67)30(18-32(48)60)56-42(68)31(22-59)53-33(61)19-47/h23-31,36-37,59H,9-22,46-47H2,1-8H3,(H2,48,60)(H,49,65)(H,50,69)(H,51,62)(H,52,63)(H,53,61)(H,54,67)(H,55,66)(H,56,68)(H,57,64)(H,58,70)(H,71,72)
化学名
2-[[2-[[2-[[2-[[2-[2-[[2-[[6-amino-2-[[4-amino-2-[[2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]hexanoyl]amino]acetyl]amino]propanoylamino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: (1). 该产品在溶液状态不稳定,请现配现用。  (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ≥ 3.33 mg/mL (~3.14 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (2.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中,混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.9432 mL 4.7158 mL 9.4316 mL
5 mM 0.1886 mL 0.9432 mL 1.8863 mL
10 mM 0.0943 mL 0.4716 mL 0.9432 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们