| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of AR-7 is retinoic acid receptor alpha (RARα), acting as an antagonist of this receptor. [1]
- AR-7 targets retinoic acid receptor alpha (RARα) as an antagonist, and it functions as a specific activator of chaperone-mediated autophagy (CMA) by inhibiting RARα signaling. [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 WT 和 LRRK2R1441G KI 突变 MEF 中，用 RARA 拮抗剂 AR7（20 μM；16 小时）治疗可增强溶酶体活性[1]。在 NIH 3T3 细胞中，AR7（10、20、30 uM；12 小时）对巨自噬没有影响[2]。通过选择性降解溶酶体中的胞质蛋白，伴侣介导的自噬 (CMA) 支持细胞质量控制和细胞对应激的反应。 CMA 活性降低是衰老和年龄相关疾病的一个共同特征。 CMA 受到视黄酸受体 α (RARα) 信号传导的抑制。带有 AR7 的小鼠成纤维细胞表现出 CMA 活性显着增加。 GR1 和 AR7 的结合导致 CMA 激活效力显着增加，证实了它们的协同影响。 AR7 对 CMA 的刺激作用在转录抑制因子放线菌素 D 处理后部分减弱，这与导致 CMA 上调的转录修饰一致[3]。
以20μM的浓度预孵育AR-7，可显著提高表达SNCA或KFERQ肽的野生型（WT）和LRRK2^{R1441G}基因敲入（KI）小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的总溶酶体活性。LRRK2^{R1441G} KI MEFs的整体溶酶体降解活性低于WT对照组，而AR-7处理可有效提升这些突变细胞的溶酶体活性（N = 4，p < 0.05、p < 0.01）。此外，AR-7可诱导MEFs中神经元LAMP2A的转录，且用AR-7处理24小时能以剂量依赖的方式上调WT和KI细胞中Lamp2a mRNA的表达（N = 3）[1] - 在小鼠成纤维细胞中，当细胞稳定表达PAmCherry-KFERQ-NE时，20μM的AR-7可促进溶酶体中CMA底物的积累（表现为点状结构形成）。在完全培养基中用AR-7处理16小时，可诱导CMA底物在溶酶体中积累，与血清剥夺（已知的CMA诱导剂）的作用相似。同时，AR-7能提高小鼠成纤维细胞中长寿命蛋白的降解速率，且该效应依赖于RARα和LAMP2A；在LAMP2A敲低的成纤维细胞中，AR-7对蛋白降解的刺激作用消失。AR-7还能保护小鼠成纤维细胞免受百草枯（PQ）诱导的氧化应激：暴露于2mM PQ时，经AR-7处理的对照成纤维细胞比未处理细胞具有更高的细胞活力；在暴露于0.5mM PQ的LAMP2A敲低成纤维细胞中，AR-7也能提高细胞活力（N = 3）。此外，20μM的AR-7可降低1mM PQ处理的小鼠成纤维细胞中α-突触核蛋白过表达的毒性，并减少这些细胞中α-突触核蛋白寡聚体的水平[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
成年雄性Wistar大鼠在处死前禁食48小时用于从肝脏中分离溶酶体。所有动物工作均根据阿尔伯特·爱因斯坦医学院机构动物护理和使用委员会制定的指南获得批准和执行。
在来自LRRK2^{R1441G} KI小鼠的原代皮质神经元中，从DIV9到DIV21用10μM和20μM的AR-7处理，能以剂量依赖的方式减少细胞内和细胞外SNCA寡聚体的积累（通过ELISA检测）。LRRK2^{R1441G} KI原代神经元在所有时间点（DIV9、14、21）的SNCA寡聚体水平均显著高于WT神经元，而AR-7处理可有效阻止这些寡聚体的进行性积累（p < 0.05、p < 0.01）。此外，与溶媒处理的对照组相比，AR-7处理能显著降低WT和LRRK2^{R1441G} KI神经元中总细胞内SNCA的水平（N = 4），但在DIV21时，AR-7处理并未使两种细胞中LAMP2A和HSPA8的蛋白水平发生显著变化[1] |
| 酶活实验 |
开展分子对接实验以研究AR-7与RARα结合口袋的结合模式，AR-7以对接构象I的最低能量构象结合到由螺旋h3、h10和h12形成的RARα结合口袋疏水区域。对接分析揭示了AR-7与RARα的相互作用方式，但未测定具体的结合亲和力值（如Ki、Kd）。此外，通过荧光素酶报告基因实验评估AR-7对RARα转录活性的影响：将小鼠成纤维细胞共转染hRARα受体、报告基因荧光素酶质粒和海肾荧光素酶质粒（作为转染对照），检测不同浓度的AR-7单独或与100nM全反式维甲酸（ATRA）联合处理后的荧光素酶活性，发现AR-7可抑制ATRA诱导的RARα转录活性，并测定了该抑制作用的Ki值（n = 4–6）[3]
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| 细胞实验 |
MEFs溶酶体活性检测实验：将表达SNCA或KFERQ肽的WT和LRRK2^{R1441G} KI MEFs用20μM的AR-7预孵育一定时间，基于自淬灭溶酶体底物的降解，通过酶促试剂盒结合流式细胞术检测总溶酶体活性，检测底物的荧光强度以量化溶酶体活性，并比较AR-7处理组与未处理组的数据[1]
- Lamp2a mRNA表达检测实验：用不同浓度（0、10、20μM）的AR-7处理WT和LRRK2^{R1441G} KI MEFs 24小时，提取细胞总RNA，通过反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增Lamp2a mRNA，对Lamp2a mRNA的表达水平进行定量并归一化至内参基因，分析AR-7对Lamp2a转录的剂量依赖效应[1] - 原代皮质神经元SNCA寡聚体检测实验：将来自WT和LRRK2^{R1441G} KI小鼠的原代皮质神经元从DIV9到DIV21用0、10或20μM的AR-7培养，在DIV9、14和21收集总细胞裂解物和条件培养基，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）结合纯化的重组SNCA寡聚体标准品生成的标准曲线，测定SNCA寡聚体水平，量化并比较AR-7处理组与未处理组的细胞内和细胞外SNCA寡聚体水平[1] - CMA底物积累检测实验：将稳定表达PAmCherry-KFERQ-NE的小鼠成纤维细胞在完全培养基中用20μM的AR-7处理16小时，设置血清剥夺的对照组以诱导CMA。处理后，用UV-A（405nm）对细胞进行5分钟的光激活以诱导mCherry荧光发射，在荧光显微镜下观察荧光点状结构（指示CMA底物在溶酶体中的积累）的形成，并在至少4个不同视野中对超过50个细胞的每细胞点状结构数量进行量化[3] - 长寿命蛋白降解检测实验：用放射性氨基酸标记小鼠成纤维细胞（对照、RARα敲低或LAMP2A敲低）的长寿命蛋白，然后用20μM的AR-7处理细胞12小时，测定放射性氨基酸的释放量以确定蛋白降解速率，计算蛋白水解百分比，并比较AR-7对不同细胞组蛋白降解的影响[3] - 氧化应激下细胞活力检测实验：将对照和LAMP2A敲低的小鼠成纤维细胞分别暴露于2mM和0.5mM的百草枯（PQ），在PQ处理前或后12小时向培养基中加入AR-7，采用标准的细胞活力检测方法（如MTT或CCK-8法）评估细胞活力，测定吸光度值以计算细胞活力百分比[3] - α-突触核蛋白毒性检测实验：将小鼠成纤维细胞转染不同浓度的α-突触核蛋白表达质粒，然后用1mM PQ单独或联合20μM AR-7处理细胞，检测细胞活力，并通过蛋白质印迹法检测α-突触核蛋白（包括单体和寡聚体）的水平，对蛋白条带的强度进行密度定量，分析AR-7对α-突触核蛋白诱导毒性的影响[3] |
| 动物实验 |
成年雄性Wistar大鼠被用于从肝脏中分离溶酶体 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在LRRK2^{R1441G} KI小鼠原代皮层神经元的长期培养中，从第9天到第21天用浓度为10 μM和20 μM的AR-7处理，未引起严重的细胞形态变化或细胞毒性，这通过细胞形态观察和乳酸脱氢酶（LDH）释放试验评估得出（原始文献中的图S7）[1]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AR-7（7-氯-3-(4-甲基苯基)-2H-1,4-苯并恶嗪）是一种分子伴侣介导的自噬（CMA）特异性激活剂，同时也是视黄酸受体α（RARα）的拮抗剂。它通过激活CMA发挥治疗作用，从而增强错误折叠蛋白（例如SNCA/α-突触核蛋白）的降解，而SNCA/α-突触核蛋白是帕金森病（PD）的关键致病蛋白。AR-7激活CMA代表了一种可行的PD疾病修饰治疗策略，因为它能减少大脑中与年龄相关的致病性SNCA寡聚体的积累[1]。AR-7是全反式视黄酸（ATRA）的合成衍生物，通过基于结构的化学修饰设计，旨在特异性地中和RARα信号对CMA的抑制作用。与ATRA（抑制CMA）不同，AR-7通过阻断RARα激活CMA，从而增强细胞蛋白质质量控制。AR-7对CMA的化学增强作用可保护细胞免受氧化应激和蛋白毒性损伤，这使其有望成为治疗以CMA功能受损为特征的年龄相关疾病（如神经退行性疾病（如帕金森病和阿尔茨海默病）和糖尿病）的药物[3]。
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| 分子式 |
C15H12CLNO
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|---|---|---|
| 分子量 |
257.72
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| 精确质量 |
257.061
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| CAS号 |
80306-38-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
44250175
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.597
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| tPSA |
21.59
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
323
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
MVOZLTFXYGHZPM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H12ClNO/c1-10-2-4-11(5-3-10)14-9-18-15-8-12(16)6-7-13(15)17-14/h2-8H,9H2,1H3
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (9.70 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (9.70 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.8802 mL | 19.4009 mL | 38.8018 mL | |
| 5 mM | 0.7760 mL | 3.8802 mL | 7.7604 mL | |
| 10 mM | 0.3880 mL | 1.9401 mL | 3.8802 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Effect of knockdown of RARα on autophagic pathways.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
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Effect of ATRA on autophagy.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
Design, synthesis and molecular docking of RARα-targeting compounds.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
Effect of the chemical activators of CMA on RARα activity.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
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Characterization of the effect of the retinoid derivatives on CMA.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
Effect of the retinoid derivatives in the cellular response against different stressors.Nat Chem Biol.2013 Jun;9(6):374-82. |
RXR agonist 2
LE-540
R-116010
MDI-403
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