| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
NLRP3 inflammasome inhibitor. [1]
Farnesyltransferase inhibitor. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
阿格拉宾通过阻断法尼基转移酶发挥抗肿瘤作用。法尼基转移酶可激活RAS原癌基因，而RAS原癌基因被认为是20-30%人类癌症的主要致病因素。事实上，阿格拉宾可阻止法尼基转移酶（FTase）将法尼基焦磷酸掺入人H-ras蛋白中[2]。
阿格拉宾以浓度依赖的方式抑制脂多糖（LPS）预处理和胆固醇晶体（CC）激活的小鼠腹腔巨噬细胞中IL-1β和IL-18的分泌。在浓度约为50 nmol/L时观察到最大抑制效果，两种细胞因子的EC50值均约为10 nmol/L。在整个治疗过程中，细胞活力保持在95%以上。 [1] Arglabin对LPS/Arglabin处理的巨噬细胞中IL-6和IL-12的产生没有显著影响，表明其并非普遍抑制NF-κB依赖性细胞因子，而是特异性抑制NLRP3激活依赖性细胞因子。[1] Arglabin在50 nmol/L浓度下对NLRP1、AIM2和NLRC4炎症小体的活性没有显著抑制作用，这些炎症小体分别被炭疽杆菌、双链DNA或鞭毛蛋白特异性激活。[1] Arglabin以剂量依赖的方式降低了LPS预处理和CC激活的小鼠腹腔巨噬细胞中IL-1α的分泌（测试浓度为10、25和50 nmol/L）。 [1]在用LPS预处理并用ATP（5 mmol/L，一种已知的NLRP3激活剂）激活的巨噬细胞中，arglabin以剂量依赖的方式抑制IL-1β的产生。[1] 在LPS/CC激活的巨噬细胞中，arglabin（50 nmol/L）对IL-1β和IL-18产生的抑制作用是可逆的。在暴露后72小时观察到最大抑制作用，此后抑制作用逐渐消失。[1] 对LPS预处理、CC激活的巨噬细胞全细胞裂解物的Western blot分析表明，用arglabin（50 nmol/L）处理可完全消除成熟的caspase-1。同时，arglabin降低了NLRP3和pro-IL-1β的表达。上清液分析证实了活性17 kDa IL-1β分泌减少。[1] arglabin诱导小鼠巨噬细胞自噬。无论是否存在炎症小体激活剂（LPS和CCs），它都能强烈诱导LC3 II型蛋白的积累。共聚焦显微镜显示，arglabin诱导LC3-II在自噬体膜上聚集，呈现点状分布。这种作用与已知的自噬诱导剂（如氨基酸缺乏培养基（EBSS）和巴弗洛霉素A1）的作用相似。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在喂食高脂饮食的 ApoE2.Ki 动物中，Arglabin 可降低炎症和血浆脂质水平，增强自噬，并使组织巨噬细胞向抗炎表型转变 [1]。
在喂食高脂饮食 (HFD) 13 周的雌性 ApoE2.Ki 小鼠中，腹腔注射 Arglabin（2.5 ng/g 体重，每日两次）可显著降低血浆中 IL-1β 的水平，与载体对照组相比（5.2 ± 1.0 pg/mL vs. 11.7 ± 1.1 pg/mL）。[1] 在同一小鼠模型中，Arglabin 治疗显著提高了抗炎细胞因子 IL-10 的血浆水平（29.7 ± 1.1 pg/mL vs. 对照组的 12.1 ± 0.3 pg/mL）。血浆中TNF-α水平基本未受影响。[1] Arglabin治疗显著降低了喂食高脂饮食（HFD）的ApoE2.Ki小鼠的血浆总胆固醇水平59%，甘油三酯水平42%。这种降低在所有不同的脂蛋白颗粒组分（LDL、IDL和VLDL）中均有观察到。在喂食高脂饮食并接受arglabin治疗的ApoE2.Ki/Nlrp3-/-小鼠中，未观察到对血浆脂质的影响。[1] Arglabin治疗显著降低了喂食高脂饮食的ApoE2.Ki小鼠血浆中针对氧化低密度脂蛋白（oxLDL）的自身抗体浓度约44%。在即使喂食高脂饮食，ApoE2.Ki/Nlrp3-/-小鼠的抗oxLDL抗体基线水平也较低，arglabin治疗对这些抗体水平没有影响。 [1] 在喂食高脂饮食的ApoE2.Ki小鼠中，arglabin治疗降低了脾脏中促炎性Ly-6Chi单核细胞/巨噬细胞的数量，并增加了Ly-6Clo细胞的数量。在接受类似治疗的ApoE2.Ki/Nlrp3-/-小鼠中未观察到这种效应。[1] 对喂食高脂饮食的ApoE2.Ki小鼠的动脉粥样硬化病变进行免疫组织化学分析表明，arglabin治疗使病变巨噬细胞从促炎性M1表型（F4/80+IL-1β+）向抗炎性M2表型（F4/80+CD206+）转变。 [1] Arglabin治疗显著降低了喂食高脂饮食（HFD）的ApoE2.Ki小鼠主动脉窦的中位动脉粥样硬化病变面积54%（P = 0.02），并降低了整个主动脉（正面观察）的中位动脉粥样硬化病变面积41%（P = 0.02）。这种抑制作用与喂食高脂饮食的未经治疗的ApoE2.Ki/Nlrp3-/-小鼠的病变大小相当。用arglabin治疗ApoE2.Ki/Nlrp3-/-小鼠并未进一步降低病变面积。[1] |
| 细胞实验 |
IL-1β、IL-18、IL-6、IL-12 细胞因子检测：从 C57Bl/6 小鼠中分离出腹腔巨噬细胞，以 0.5 × 10⁶ 个细胞/mL 的密度接种，并用 LPS (10 ng/mL) 预处理 4 小时。然后用不同浓度的精氨酸酶处理 1 小时，最后用胆固醇晶体 (1 mg/mL) 激活。24 小时后，采用 ELISA 法定量培养上清液中 IL-1β、IL-18、IL-6 和 IL-12 的水平。 [1] NLRP3依赖性检测：从Nlrp3+/+、Nlrp3+/-或Nlrp3-/-小鼠（C57BL/6背景）中分离腹腔巨噬细胞，用LPS（10 ng/mL）预处理，并用胆固醇晶体（1 mg/mL）激活。然后通过ELISA检测上清液中IL-1β和IL-18的水平，以确认NLRP3的特异性作用。[1] IL-1α细胞因子检测：用LPS（10 ng/mL）预处理小鼠腹腔巨噬细胞，并在不同剂量的arglabin（10、25和50 nmol/L）存在下用胆固醇晶体（1 mg/mL）激活。检测分泌到上清液中的IL-1α水平。 [1]
ATP诱导的NLRP3激活实验：细胞用LPS（10 ng/mL）预处理4小时。然后加入不同浓度的Arglabin或溶剂对照。1小时后，用ATP（5 mmol/L）激活细胞24小时。采用ELISA法检测IL-1β的产生。[1] 炎症小体特异性实验：培养的巨噬细胞用特异性激活剂刺激：炭疽杆菌激活NLRP1，双链DNA激活AIM2，鞭毛蛋白激活NLRC4。然后评估50 nmol/L的Arglabin对这些炎症小体活性的影响。[1] 可逆性实验：首先用LPS（10 ng/mL）处理腹腔巨噬细胞。在用胆固醇晶体（1 mg/mL）激活前 1 小时加入 Arglabin（50 nmol/L）。在激活后的不同时间点，通过 ELISA 检测上清液中 IL-1β 和 IL-18 的水平。[1] 蛋白质印迹分析（细胞蛋白）：细胞用 LPS（10 ng/mL）预处理 2 小时，然后用 Arglabin（50 nmol/L）处理或不处理。1 小时后，向所有样品中加入胆固醇晶体（1 mg/mL），并将细胞继续孵育 6 小时。然后通过蛋白质印迹分析全细胞裂解液中 NLRP3、pro-IL-1β、procaspase-1 和活性 caspase-1 的表达，以肌动蛋白作为上样对照。 [1] 蛋白质印迹分析（分泌型IL-1β）：细胞按上述方法处理24小时。收集上清液，并使用特异性识别IL-1β裂解活性形式（17 kDa）的抗体进行蛋白质印迹分析。[1] 自噬分析（LC3-II积累）：细胞用arglabin处理24小时。使用阻断自噬体-溶酶体融合的巴弗洛霉素A1（30 nmol/L）作为阳性对照。使用针对LC3 II型的抗体进行蛋白质印迹分析全细胞裂解液。在另一项实验中，细胞预先用LPS处理2小时，然后用arglabin（50 nmol/L）处理或不处理1小时，最后用胆固醇晶体激活6小时。在已知可诱导自噬的氨基酸缺乏培养基（EBSS）中培养的细胞作为阳性对照。再次分析裂解液中LC3-II的形成。[1] 自噬的共聚焦显微镜观察：将细胞与精氨酸蛋白（arglabin）孵育24小时。然后进行细胞透化处理，用LC3-II抗体（绿色荧光）和DAPI（蓝色荧光）染色细胞核，并在630倍原始放大倍率下通过共聚焦显微镜进行分析，以观察含有LC3-II的细胞自噬体斑点的形成。[1] |
| 动物实验 |
ApoE2.Ki 小鼠体内疗效：** 6 周龄雌性 ApoE2.Ki 小鼠喂食高脂饮食 13 周。随机分为两组。第一组（对照组，n=4）每日两次腹腔注射 5 µL 二甲基亚砜（溶剂）。第二组（arglabin 组，n=4）每日两次腹腔注射 2.5 ng/g 体重的 arglabin。13 周后，在异氟烷麻醉下，采集 EDTA 抗凝血，用于血浆细胞因子、脂质和抗氧化低密度脂蛋白（oxLDL）抗体的分析。同时，切取心脏和降主动脉进行组织学和免疫组织化学研究。 [1]
* **Nlrp3-/- 小鼠体内研究：** 6 周龄雌性 ApoE2.Ki/Nlrp3-/- 小鼠喂食高脂饮食 13 周。一组小鼠接受载体处理，另一组小鼠按照上述相同方案接受 arglabin（2.5 ng/g 体重，每日两次）处理，以评估 arglabin 对 NLRP3 的影响。[1] * **动脉粥样硬化病变分析：** 处死小鼠后，沿瓣叶下方平行切开心脏。将上部组织包埋于最佳切割温度 (OCT) 包埋剂中。从左心室上部制备 100 张连续冰冻切片，每张切片厚度为 10 µm。将间隔 90 µm 的 10 张切片用油红 O 染色以显示脂质，并用哈里斯苏木素复染。取这10个切片中病变的平均大小，用于评估每只动物主动脉窦的病变大小。对于整个主动脉（正面观察），将降主动脉和腹主动脉进行清洗、处理，并用油红O染色。采用计算机辅助组织形态计量学评估动脉粥样硬化的程度。[1] * **巨噬细胞表型免疫组织化学：** 对喂食高脂饮食（HFD）的对照组和arglabin处理的ApoE2.Ki小鼠的近端主动脉进行连续冷冻切片（10 µm），并进行免疫组织化学分析。该方法包括使用针对巨噬细胞标志物F4/80的抗体与M1标志物IL-1β或M2标志物CD206的抗体进行双重免疫染色。对高倍视野内的阳性细胞数量进行定量。 [1] ApoE2.Ki 小鼠体内疗效：6 周龄雌性 ApoE2.Ki 小鼠喂食高脂饮食 13 周。随机分为两组。第一组（对照组，n=4）每日两次腹腔注射 5 µL 二甲基亚砜（溶剂）。第二组（arglabin 组，n=4）每日两次腹腔注射 2.5 ng/g 体重的 arglabin。13 周后，在异氟烷麻醉下，采集 EDTA 抗凝血，用于血浆细胞因子、脂质和抗氧化低密度脂蛋白（oxLDL）抗体的分析。同时，切取心脏和降主动脉进行组织学和免疫组织化学研究。 [1] Nlrp3-/- 小鼠体内研究：6 周龄雌性 ApoE2.Ki/Nlrp3-/- 小鼠喂食高脂饮食 13 周。一组小鼠接受载体处理，另一组小鼠按照上述相同方案接受 arglabin（2.5 ng/g 体重，每日两次）处理，以评估 arglabin 对 NLRP3 的影响。[1] 动脉粥样硬化病变分析：处死小鼠后，沿瓣叶下方平行切开心脏。将上部组织包埋于最佳切割温度 (OCT) 包埋剂中。从左心室上部制备 100 张连续冰冻切片，每张切片厚度为 10 µm。将间隔 90 µm 的 10 张切片用油红 O 染色以显示脂质，并用哈里斯苏木素复染。取这10个切片中病变的平均大小，用于评估每只动物主动脉窦的病变大小。对于整个主动脉（正面观察），将降主动脉和腹主动脉进行清洗、处理，并用油红O染色。采用计算机辅助组织形态计量学评估动脉粥样硬化的程度。[1] 巨噬细胞表型免疫组织化学：对喂食高脂饮食的对照组和arglabin处理的ApoE2.Ki小鼠的近端主动脉冷冻连续切片（10 µm）进行免疫组织化学分析。该方法包括使用针对巨噬细胞标志物F4/80的抗体与M1标志物IL-1β或M2标志物CD206的抗体进行双重免疫染色。对高倍视野内的阳性细胞数量进行定量。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在用arglabin（浓度高达50 nmol/L）处理的培养小鼠腹腔巨噬细胞中，整个实验期间细胞活力均保持在95%以上，表明在所用浓度下未观察到急性细胞毒性。[1]
arglabin处理并未导致喂食高脂饮食的ApoE2.Ki小鼠与未处理小鼠之间肝脏脂肪变性出现任何可观察到的差异。[1] arglabin未显示对肝细胞内胆固醇生物合成的抑制作用，也未影响这些细胞中LDL受体的表达。[1] 该研究指出，arglabin与helenalin类似，具有可被亲核试剂开环的γ-丁内酯环，提示其作用机制涉及与生物亲核试剂形成加合物。这种化学反应性被认为是其生物活性的组成部分。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
阿格拉宾（Arglabin）是一种有机杂四环化合物，属于愈创木烯倍半萜内酯家族。其结构为丙烯酸在2位被4-羟基-3,8-二甲基-1,3a,4,5,6,7-六氢嗪-5-基取代，七元环上的双键发生环氧化反应，羟基和羧基发生缩合反应生成相应的γ-内酯。它存在于蒿属植物中。阿格拉宾-DMA HCl是二甲胺与烯基内酯加合物的盐酸盐，已在哈萨克斯坦成功用于治疗乳腺癌、结肠癌、卵巢癌和肺癌。它既是一种抗肿瘤药物，也是一种代谢产物。它是一种有机杂四环化合物，具有γ-内酯、环氧化物和倍半萜内酯的特征。据报道，艾蒿（Artemisia argyi）和五倍子（Pentzia eenii）中均含有艾蒿素（Arglabin），且已有相关数据。
艾蒿素是一种天然愈创木脂素倍半萜内酯，主要由仅生长于哈萨克斯坦的艾蒿（Artemisia glabella）合成。[1] 其化学结构包含一个环戊烷环，该环具有5个相邻的立体中心，并与多个五元环发生环化反应。[1] 它具有抗炎和抗肿瘤活性。目前，哈萨克斯坦正在研究艾蒿素的二甲氨基盐酸盐衍生物，用于治疗乳腺癌、结肠癌、卵巢癌和肺癌。 [1] 本研究发现，arglabin是一种有前景的新型候选药物，可通过抑制NLRP3炎症小体、降低血浆脂质、诱导自噬以及使巨噬细胞极化为抗炎的M2表型来治疗炎症和动脉粥样硬化。[1] 在ApoE2.Ki小鼠中，arglabin的抗动脉粥样硬化作用与Nlrp3基因缺陷小鼠的效果相当，表明其主要作用机制是通过抑制NLRP3炎症小体。[1] arglabin降低血浆胆固醇和甘油三酯水平是一个意想不到的发现。作者推测这可能是由于其抑制了caspase-1，而caspase-1与肠道脂质吸收和肝脏脂质代谢有关。[1] |
| 分子式 |
C15H18O3
|
|---|---|
| 分子量 |
246.31
|
| 精确质量 |
246.125
|
| CAS号 |
84692-91-1
|
| PubChem CID |
5574924
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
404.6±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
102 °C
|
| 闪点 |
171.3±23.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.9 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.571
|
| LogP |
1.74
|
| tPSA |
38.83
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
18
|
| 分子复杂度/Complexity |
506
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
|
| SMILES |
CC1=CC[C@@]23[C@H]1[C@@H]4[C@@H](CC[C@@]2(O3)C)C(=C)C(=O)O4
|
| InChi Key |
UVJYAKBJSGRTHA-CUZKYEQNSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H18O3/c1-8-4-7-15-11(8)12-10(9(2)13(16)17-12)5-6-14(15,3)18-15/h4,10-12H,2,5-7H2,1,3H3/t10-,11+,12-,14-,15+/m0/s1
|
| 化学名 |
(1R,3S,6S,10S,11R)-3,12-dimethyl-7-methylidene-2,9-dioxatetracyclo[9.3.0.01,3.06,10]tetradec-12-en-8-one
|
| 别名 |
Arglabin (+)-Arglabin
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~406.01 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.0599 mL | 20.2996 mL | 40.5992 mL | |
| 5 mM | 0.8120 mL | 4.0599 mL | 8.1198 mL | |
| 10 mM | 0.4060 mL | 2.0300 mL | 4.0599 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
