| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SH2 domain-containing inositol 5'-phosphatase 2 (SHIP2) - Inhibitor. SHIP2 negatively regulates insulin signaling by hydrolyzing phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate (PIP3) [1]
. - IC50 values: - Human SHIP2: 0.62 ± 0.02 μM [1] . - Mouse SHIP2: 0.34 ± 0.10 μM [1] . - Human SHIP1: 13 ± 2 μM (approximately 30-fold less potent than for SHIP2) [1] . - Human PTEN: >50 μM [1] . - Human synaptojanin: >50 μM [1] . - Human myotubularin: >50 μM [1] . - Ki values: - Human SHIP2: 0.44 ± 0.19 μM (competitive inhibitor with respect to substrate Ins(1,3,4,5)P4) [1] . - Human SHIP1: 11 ± 1.4 μM [1] . |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AS1949490（0-16 μM；15 分钟）可增加 L6 肌管细胞中胰岛素诱导的 Akt 磷酸化 [1]。在 L6 肌管细胞中，AS1949490（0-10 μM；48 小时）可诱导应激反应并促进营养活性 [1]。AS1949490（0-0.10 μM；24 小时；L6 肌管细胞）可抑制胰岛素触发的糖异生过程 [1]。在 L6 肌管细胞中，AS1949490（10 μM；48 小时）可上调 GLUT1 基因以启动氧转换 [2]。酶抑制动力学：AS1949490 是 SHIP2 的竞争性抑制剂，其底物为 Ins(1,3,4,5)P4。 Ins(1,3,4,5)P4 与人 SHIP2 的 Km 值为 44 ± 10 nM。Lineweaver-Burk 分析证实了竞争性抑制，Ki 值为 0.44 μM [1]。
- 选择性：AS1949490 对 SHIP2 的选择性高于与其密切相关的磷酸酶 SHIP1（选择性约为 30 倍），并且在浓度高达 50 μM 时，对其他细胞内磷酸酶（包括 PTEN、突触蛋白和肌管蛋白）没有抑制作用 [1]。 - L6 肌管中的 Akt 磷酸化：在 L6 肌管中，AS1949490 (0.3-3 μM) 以浓度依赖的方式增强胰岛素诱导的 Akt (Ser473) 磷酸化。在 1 nM 胰岛素刺激下，3 μM AS1949490 显著增加了 Akt 磷酸化（P<0.001）。然而，AS1949490 并未增强胎牛血清 (FBS) 诱导的 Akt 磷酸化，表明其对胰岛素信号通路具有特异性 [1]。 - 葡萄糖消耗：在用 AS1949490 (0.3-3 μM) 和 1 nM 胰岛素处理 48 小时的 L6 肌管细胞中，葡萄糖消耗呈浓度依赖性增加 (P<0.01 至 P<0.001) [1]。 - 葡萄糖摄取：用 AS1949490 (0.3-3 μM) 处理 48 小时可显著刺激 L6 肌管细胞的葡萄糖摄取活性，且呈浓度依赖性 (P<0.01 至 P<0.001) [1]。 - 脂肪酸氧化肝细胞中的糖异生：在用 AS1949490 处理大鼠脂肪酸氧化肝癌细胞后， AS1949490 (1-10 μM) 和 1 nM 胰岛素处理 24 小时后，糖异生作用显著降低，呈浓度依赖性（P<0.05 至 P<0.001）[1] 。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AS1949490（300 mg/kg；Pathway；每日两次，持续7或10天）可激活细胞内胰岛素信号通路，降低糖尿病视网膜病变的风险[1]。AS1949490（300 mg/kg；单次给药，8小时）。
正常小鼠急性研究：雄性ICR小鼠禁食过夜后，口服给予300 mg/kg的AS1949490。8小时后，收集肝组织进行mRNA分析。 AS1949490 治疗显著降低了肝脏糖异生基因的 mRNA 水平：葡萄糖-6 磷酸酶 (G6Pase) 降低约 50% (P<0.05)，磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 (PEPCK) 降低约 50% (P<0.01) [1] 。 - 糖尿病 db/db 小鼠的慢性研究：雄性 db/db 小鼠每天两次口服 AS1949490 (300 mg/kg)，持续 7 或 10 天。 7 天后，血浆葡萄糖与载体相比显著降低了 23% (P<0.01)，而体重或血浆胰岛素水平未受影响 [1] 。 - 口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)：db/db 小鼠经 AS1949490 (300 mg/kg，每日两次) 治疗 10 天后，禁食过夜，并进行 OGTT (2 g/kg 葡萄糖口服)。 AS1949490 治疗显著降低了空腹血糖 37%（时间 -30 分钟，P<0.05），并显著降低了葡萄糖负荷后 0-2 小时内的曲线下面积 (AUC)（P<0.05）[1] 。 - 肝脏胰岛素信号传导：用 AS1949490（300 mg/kg，每日两次）治疗 10 天后，收集肝组织并分析 GSK3β 磷酸化情况。 AS1949490显著增加了肝脏中GSK3β（Ser9）的磷酸化水平，而未改变总GSK3β蛋白水平，表明胰岛素信号增强[1] 。 - 药代动力学分布：药代动力学分析显示，口服给药后，AS1949490的血清浓度较低，但该化合物在肝脏中的浓度最高，提示其具有肝脏靶向性[1] 。 |
| 酶活实验 |
孔雀绿磷酸酶活性测定：将纯化的重组磷酸酶（100 ng）与底物（SHIP2/SHIP1 的底物为 100 μM 的 Ins(1,3,4,5)P4；PTEN、突触蛋白和肌管蛋白的底物为 250 μM 的 PtdIns(3,4,5)P3）在反应缓冲液（10 mM HEPES pH 7.25、6 mM MgCl2、0.1% CHAPS、250 mM 蔗糖、0.25 mM EDTA）中于 384 孔板中室温孵育 20 分钟。加入孔雀绿试剂，继续孵育 25 分钟，并在 630 nm 处测定吸光度。采用回归分析计算 IC50 值。在固定抑制剂浓度下，改变底物浓度进行动力学研究，并根据 Lineweaver-Burk 图确定 Ki 值 [1]。
- 蛋白质表达和纯化：人 SHIP2（残基 419-732）、SHIP1（399-714）、小鼠 SHIP2（421-733）、人突触蛋白（492-856）催化结构域以及全长人肌管蛋白均被克隆并在大肠杆菌中表达，带有 6His 标签，并使用固定化金属亲和层析进行纯化。缺失残基（去除残基 2-6、286-309 和 354-403）的人 PTEN 在 Sf-9 细胞中表达，带有 GST 标签，并使用谷胱甘肽琼脂糖进行纯化 [1]。 |
| 细胞实验 |
Western Blot 分析 [1]
细胞类型： L6 肌管细胞 测试浓度： 0、4、8 和 16 μM；] 1 nM（胰岛素） 孵育时间： 15 分钟 实验结果： 胰岛素诱导的 Akt 磷酸化呈剂量依赖性增加。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型：L6肌管 测试浓度：10 µM 孵育时间：48小时 实验结果：L6肌管中GLUT1 mRNA表达增加，但GLUT4 mRNA表达未增加。 L6肌管分化和处理：将L6成肌细胞接种于96孔板中培养至汇合。在含2%马血清的DMEM培养基中培养5-6天诱导其分化为肌管。分化的肌管在DMEM培养基中无血清饥饿培养16小时，然后用AS1949490处理15分钟，之后用胰岛素或FBS刺激10分钟[1] 。 - 基于细胞的磷酸化Akt ELISA：处理后，细胞用4%多聚甲醛固定15分钟，用TBS-T洗涤，用0.1% Triton X-100透化10分钟，并用Blocking One溶液封闭1小时。细胞与Ser473磷酸化特异性Akt抗体在室温下孵育2小时，然后与HRP标记的二抗孵育。使用TMB底物显色，并在450 nm处测量吸光度[1]。 - 葡萄糖摄取和消耗测定：将L6肌管在分化条件下（2%马血清，不含酚红的DMEM培养基）培养48小时，并加入AS1949490，分别在有胰岛素（葡萄糖消耗）或无胰岛素（葡萄糖摄取）的情况下进行培养。葡萄糖摄取和消耗的测定方法如前所述[1]。 - FAO细胞糖异生测定：将大鼠FAO肝癌细胞接种于96孔板中，并在含10% FBS的DMEM培养基中培养。用AS1949490和1 nM胰岛素处理细胞24小时。用PBS洗涤后，加入葡萄糖生成缓冲液（不含葡萄糖的DMEM培养基，pH 7.4，含20 mM丙酮酸钠，不含酚红）。6小时后，使用葡萄糖CII-Test试剂[1]测定培养基中的葡萄糖浓度。 - Western Blot分析：将细胞裂解液或肝组织匀浆进行SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜，并用针对磷酸化Akt（Ser473）、总Akt、磷酸化GSK3β（Ser9）或总GSK3β的抗体进行检测。使用HRP标记的二抗和ECL系统检测信号，并使用VersaDoc数字成像系统进行定量[1]。 - RT-PCR mRNA表达分析：使用Isogen试剂盒从肝组织中提取总RNA。合成cDNA，并使用SYBR Green法，以G6Pase、PEPCK和18S rRNA（内参）的引物进行实时定量PCR。使用PRISM 7900序列检测仪[1]定量mRNA的相对水平。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/KsJ Jcl-dbm小鼠和db/+db小鼠[1]。
剂量：300 mg/kg。 给药途径：口服；（ICR制剂）抑制糖异生及其相关基因的表达[1]。每日两次，持续7或10天。 实验结果：血浆葡萄糖水平降低（与溶剂对照组相比降低23%）。空腹血糖水平降低（与溶剂对照组相比降低37%），血糖浓度-时间曲线下面积（AUC）也降低。增加肝脏中GSK3β的磷酸化水平，但不改变GSK3β蛋白的总体水平。 动物/疾病模型：雄性ICR小鼠（6周龄）[1] 剂量：300 mg/kg 给药途径：po（灌胃）一次，持续8小时。 实验结果：PEPCK和G6Pase mRNA水平降低了约50%。 动物：**使用雄性ICR小鼠（6周龄）和雄性C57BL/KsJ Jcl-db/db小鼠（6周龄）。动物饲养于标准条件下（温度、湿度控制，12小时光照/黑暗循环），可自由获取食物和水[1]。 - **正常小鼠急性研究：** ICR小鼠禁食过夜后，灌胃给予AS1949490（300 mg/kg）或载体（0.5%甲基纤维素）。8小时后，处死小鼠并收集肝组织进行mRNA分析[1]。 - **糖尿病小鼠慢性研究：** db/db小鼠每日两次灌胃给予AS1949490（300 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）或仅灌胃给予载体，持续7或10天。采集血样进行血浆葡萄糖和胰岛素测定。在整个研究过程中监测体重[1] 。 - **口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)：**治疗10天后，db/db小鼠禁食过夜。在-30分钟（葡萄糖负荷前）测量血糖。于0时经口给予葡萄糖溶液（2 g/kg）。在葡萄糖负荷后0.5、1、2和3小时测量血糖。计算曲线下面积 (AUC)[1] 。 - **组织采集：**最后一次治疗后，收集肝组织，在裂解缓冲液中匀浆，并通过Western blot分析蛋白质表达[1] 。 动物：使用雄性ICR小鼠（6周龄）和雄性C57BL/KsJ Jcl-db/db小鼠（6周龄）。动物饲养于标准条件下（温度、湿度控制，12小时光照/黑暗循环），可自由获取食物和水[1]。 - 正常小鼠急性研究：ICR小鼠禁食过夜后，经口给予AS1949490（300 mg/kg）或载体（0.5%甲基纤维素）。8小时后，处死小鼠并收集肝组织进行mRNA分析[1]。 - 糖尿病小鼠慢性研究：db/db小鼠每日两次经口灌胃给予AS1949490（300 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）或载体，持续7或10天。采集血样进行血浆葡萄糖和胰岛素测定。在整个研究过程中监测体重[1] 。 - 口服葡萄糖耐量试验 (OGTT)：治疗10天后，db/db小鼠禁食过夜。在-30分钟（葡萄糖负荷前）测量血糖。于0小时经口给予葡萄糖溶液（2 g/kg）。分别在葡萄糖负荷后0.5、1、2和3小时测量血糖。计算曲线下面积 (AUC)[1] 。 - 组织采集：最后一次治疗后，采集肝组织，在裂解缓冲液中匀浆，并通过Western blot分析蛋白质表达[1] 。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
组织分布：药代动力学分析表明，口服给药后，血清中AS1949490浓度较低，但该化合物在肝脏中的浓度最高，提示其具有肝脏靶向性。未提供具体的药代动力学参数（半衰期、Cmax、AUC）[1]
。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体内耐受性：在对db/db小鼠进行AS1949490（300 mg/kg，每日两次，持续10天）的长期治疗期间，未观察到对体重或食物摄入量的显著影响，表明该剂量下具有良好的耐受性[1]
。 - 未观察到毒性：在所测试的剂量下，未观察到诸如食欲减退或体重下降等毒性作用[1] 。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
化学鉴定：AS1949490是3-[(4-氯苄基)氧基]-N-[(1S)-1-苯基乙基]-2-噻吩甲酰胺。该化合物由安斯泰来制药公司合成。合成过程包括三个步骤：(1) 3-羟基-2-噻吩甲酸甲酯与4-氯苄基氯的O-烷基化；(2) 皂化生成羧酸；(3) 与(1S)-1-苯乙胺的酰胺偶联[1]。
- 发现：AS1949490是通过使用孔雀绿磷酸酶活性测定法对公司内部化合物库进行高通量筛选而发现的，是首个报道的SHIP2小分子抑制剂[1]。 - 作用机制：AS1949490通过抑制SHIP2，阻止PIP3的去磷酸化，从而增强PI3K/Akt通路介导的胰岛素信号传导。这导致 Akt 磷酸化增加，肌肉细胞葡萄糖摄取和消耗增强，肝细胞糖异生受到抑制，糖尿病动物的葡萄糖稳态得到改善[1]。 - 选择性原理：SHIP2 与 SHIP1 密切相关，但具有不同的生理功能。AS1949490 对 SHIP2 的选择性比 SHIP1 高约 30 倍，且不抑制 PTEN、突触蛋白和肌管蛋白，这支持将其用作研究 SHIP2 特异性功能的工具[1]。 - 治疗潜力：该研究提供了概念验证，即使用小分子药物抑制 SHIP2 可以改善 2 型糖尿病模型的胰岛素敏感性和葡萄糖稳态。 AS1949490是一种首创的SHIP2抑制剂，可作为先导化合物进行进一步优化[1]。 - 首创：这是首个报道的小分子SHIP2抑制剂，为阐明SHIP2的生理和病理生理功能提供了宝贵的工具[1]。 - 给药信息：体外研究使用的浓度范围为0.3-10 μM。体内研究采用口服给药，急性给药剂量为300 mg/kg，慢性给药剂量为每日两次，每次300 mg/kg[1]。 |
| 分子式 |
C20H18CLNO2S
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|---|---|
| 分子量 |
371.879
|
| 精确质量 |
371.075
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| CAS号 |
1203680-76-5
|
| PubChem CID |
44473434
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.046
|
| tPSA |
70.06
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
422
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
C[C@@H](C1=CC=CC=C1)NC(=O)C2=C(C=CS2)OCC3=CC=C(C=C3)Cl
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| InChi Key |
RFZPGNRLOKVZJY-AWEZNQCLSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H18ClNO2S/c1-14(16-5-3-2-4-6-16)22-20(23)19-18(11-12-25-19)24-13-15-7-9-17(21)10-8-15/h2-12,14H,13H2,1H3,(H,22,23)/t14-/m0/s1
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| 化学名 |
3-[(4-chlorophenyl)methoxy]-N-[(1S)-1-phenylethyl]thiophene-2-carboxamide
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| 别名 |
AS1949490 AS 1949490 AS-1949490
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~134.45 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6890 mL | 13.4452 mL | 26.8904 mL | |
| 5 mM | 0.5378 mL | 2.6890 mL | 5.3781 mL | |
| 10 mM | 0.2689 mL | 1.3445 mL | 2.6890 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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