| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
CCR1
AZD 4818 targets CCR1, a chemokine receptor involved in the recruitment of inflammatory cells. It is a highly potent and selective CCR1 antagonist with a pIC50 of 8.6. By inhibiting CCR1, it blocks the chemotaxis of human monocytes to MIP-1α. This modulates aberrant immune responses implicated in conditions such as COPD and systemic lupus erythematosus (SLE). |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
研究人员比较了几种研究较为深入的CCR1拮抗剂，包括AZD4818、BX471、CCX354、CP-481715、MLN-3897和PS899877，以评估它们在体外抑制[(125)I]-CCL3结合的能力。实验采用RPMI 8226细胞膜，该细胞系是一种内源性表达CCR1的人类多发性骨髓瘤细胞系。此外，研究人员还评估了这些拮抗剂调节CCL3介导的CCR1内吞作用和CCL3介导的细胞迁移的能力，实验同样采用RPMI 8226细胞。由于许多GPCR通过β-arrestin依赖性通路传递信号，而这些通路与G蛋白驱动的通路截然不同，因此研究人员还评估了这些化合物改变β-arrestin转位的能力。主要结果：CCR1拮抗剂在抑制CCL3与骨髓瘤细胞结合的能力以及抑制G蛋白依赖性和非依赖性功能反应的能力方面存在显著差异。结论和意义：我们的研究表明，组织表型似乎与CCR1相关。此外，对于CCR1拮抗剂而言，β-arrestin易位的抑制似乎并不一定与趋化性或受体内化相关[2]。
体外实验表明，AZD 4818以浓度依赖的方式抑制人单核细胞对MIP-1α的趋化作用。它是一种高效且选择性的CCR1拮抗剂，pIC50值为8.6。该化合物抑制CCR1介导的趋化作用的能力使其成为研究炎症性疾病的宝贵工具。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，AZD 4818 用于治疗慢性阻塞性肺疾病 (COPD)。它通过选择性抑制 CCR1 信号通路来调节异常的免疫反应。它也可能用于治疗其他炎症性疾病，例如系统性红斑狼疮 (SLE)。
|
| 酶活实验 |
结合实验[2]
按照先前描述的方法（Gilchrist等人，1998）从HEK_CCR1或RPMI 8226细胞制备膜，并分装后于−80°C保存备用。在竞争实验中，将膜悬浮于HEM缓冲液中，浓度为10 μg mL−1。HEM缓冲液由50 mM HEPES（pH 7.5）、1 mM EDTA和5 mM MgCl2组成。将化合物用HEM缓冲液进行10倍系列稀释，然后加入到膜混合物中。加入终浓度为2 pM的[125I]-CCL3，并将试管在37°C下振荡孵育2小时。进行初步实验以确定在2小时时间点是否达到平衡（数据未显示）。使用组织收集器，通过浸泡在TEM2缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH 7.4，0.5 mM EDTA和5 mM MgCl2，并添加0.3%聚乙烯亚胺和20 mg·mL−1 BSA）中的Whatman GF/C滤纸过滤，分离结合态和游离态放射性配体。滤纸用冰冷的TEM2缓冲液洗涤两次，然后使用Packard γ计数器进行计数（每个样品1分钟）。结合实验重复两次，并通过在部分样品中加入放射性配体的同时加入冷CCL3（100 nM）来测定非特异性结合。结合实验数据通过非线性回归分析进行分析，以确定IC50值。在饱和实验中，我们使用浓度为 10 μg mL⁻¹ 的 HEK_CCR1 或 RPMI 8226 细胞膜，以及浓度递增的 [¹²⁵I]-CCL3（0–100 pM），并分别加入或不加入非特异性 CCL3（100 nM）以确定非特异性结合。结合实验在 37°C 下进行 2 小时，KD 和 Bmax 值使用 GraphPad Prism 6.0 版本进行测定。所有实验均重复两次，具体重复次数见表2。 PathHunter β-arrestin易位分析[2] 为了定量评估β-arrestin的易位，我们采用了DiscoveRx公司的酶片段互补模型，其中CCR1与源自β-半乳糖苷酶的ProLink™肽融合，β-arrestin 2与β-半乳糖苷酶的N端缺失突变体[酶受体(EA)]融合。加入CCL3后，β-arrestin-EA融合蛋白与活化的CCR1-ProLink结合。将PathHunter hCCR1_CHO细胞以每孔1 × 10⁴个细胞的密度接种于96孔半体积白色板中，培养基为Optimem，并过夜培养使其贴壁。初步实验确定CCL3的EC50值为200 pM。将拮抗剂进行系列稀释，稀释液为Optimem培养基，并加入三复孔中。将培养板置于37℃、5% CO₂条件下孵育90分钟，然后加入递增浓度的CCL3，继续在37℃、5% CO₂条件下孵育60分钟。加入检测试剂后，将培养板在室温下孵育60分钟。使用DTX800多功能酶标仪的发光模式读取结果。使用GraphPad Prism 6.0软件，通过Gaddum/Schild方程计算pKB值。所有实验均进行三复孔，并按表3所示重复进行。 AZD 4818的活性可通过基于细胞的趋化性分析进行评估。将人单核细胞置于带有膜的腔室中，膜将其与含有MIP-1α的溶液隔开。统计在不同浓度AZD 4818存在或不存在的情况下，穿过细胞膜迁移的细胞数量。根据剂量反应曲线确定趋化性抑制的IC50值。 |
| 细胞实验 |
受体内吞作用实验[2]
采用流式细胞术进行受体内吞作用实验。CCR1和CCR5表面染色按照PE标记的抗CCR1抗体和FITC标记的抗CCR5抗体生产商的建议进行。简而言之，将5 × 10⁶个RPMI 8226细胞悬浮于含1% FBS的RPMI 1640培养基中，并与不同浓度的拮抗剂孵育。15分钟后，用CCL3（1 nM）激活细胞，并在37°C下孵育2小时。用含1% FBS的RPMI 1640培养基洗涤后，将细胞悬浮于含1% FBS的PBS中，并加入10 μL的每种单克隆抗体。之后，将细胞在4°C避光孵育30分钟。用含1% FBS的PBS缓冲液洗涤两次后，使用BD FACScalibur流式细胞仪和Cell Quest软件分析样品。至少采集10,000个事件。通过FITC与PE的对比图识别并设门健康细胞群。对于细胞表面表达图，将未暴露于CCL3的左上象限（高CCR1/低CCR5）细胞百分比设定为1.0，并显示仅用1 nM CCL3（对照）以及1 nM CCL3联合递增浓度CCR1拮抗剂处理后荧光强度的倍数变化。为了计算IC50值（表3），将仅用1 nM CCL3（无拮抗剂）处理的样品设定为1.0，并使用GraphPad Prism 6.0版本进行非线性回归分析。实验重复进行，具体步骤见表3。 趋化性实验[2] 所有趋化性实验均使用孔径为8 μm的MultiScreen®-迁移侵袭和趋化性滤板。我们使用荧光染料Calcein AM标记RMPI 8226细胞。细胞用含10 mM HEPES的HBSS缓冲液（HHBSS）洗涤一次，并以4 × 10⁶个细胞/mL的浓度悬浮。加入Calcein AM（2 μM），细胞在37°C孵育30分钟。然后用HHBSS洗涤两次，并将细胞重悬于HHBSS中，浓度为2 × 10⁶个细胞/mL。将标记的细胞（50 μL）与拮抗剂（或溶剂对照）一起加入上室。下室中含有150 μL对照培养基（HHBSS）或趋化因子（1 nM CCL3溶于对照培养基）。将培养板置于37°C培养箱中培养3小时。3小时后，从下室中取出50 μL含细胞培养基，转移至底部透明的96孔黑色板中。使用DTX800多功能酶标仪，通过EX490/EM520模式读取该孔板。趋化性实验中，每个点重复四次，并减去自发迁移至趋化缓冲液的细胞数。趋化指数通过拮抗剂存在下迁移的细胞数除以自发迁移至CCL3的细胞数计算得出。实验重复四次，IC50值使用非线性回归分析（GraphPad Prism 6.0版）计算。表3中，每种化合物的趋化指数取自三次重复实验的平均值。 为了评估AZD 4818的细胞效应，用该化合物处理单核细胞或其他免疫细胞，并检测MIP-1α诱导的信号通路抑制情况。这可能包括钙动员、MAP激酶激活或其他下游信号事件的检测。使用趋化性实验评估其对细胞迁移的影响。 |
| 动物实验 |
AZD 4818 的体内研究通常包括通过口服或肠外途径给动物或人体给药。在慢性阻塞性肺病或其他炎症性疾病模型中，评估该化合物对炎症、免疫细胞浸润和疾病进展的影响。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
AZD 4818 的分子式为 C27H32Cl2N2O7，分子量为 567.46，CAS 编号为 1003566-93-5。该化合物是一种趋化因子 CCR1 拮抗剂，可溶于 DMSO 和其他有机溶剂，纯度通常大于 98%。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
现有文献中未提供AZD 4818的具体毒理学数据。然而，作为一种免疫调节剂，它可能对免疫系统产生影响。与所有研究化合物一样，在操作过程中应采取标准的安全预防措施。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
AZD4818 已用于治疗慢性阻塞性肺疾病 (COPD) 的临床试验。我们使用 HEK_CCR1Gqi5 细胞膜证实，AZD-4818、BX471、CCX354、CP481715 和 PS899877 均为 [125I]-CCL3 结合的强效抑制剂（图 1；表 2）。对于 BX471、CP481715 和 PS899877，我们的结果与之前在 HEK 细胞中的报道相似（Anders 等，2002；Vallet 等，2007；Merritt 等，2010）。随后，我们使用 RPMI 8226 细胞膜检测了这些化合物（图 2；表 2）。虽然有两种化合物对两种细胞系（BX471 和 PS899877）的细胞膜表现出相当的效力，但其他化合物则表现出对重组 HEK_CCR1 系统的偏好性。对于 AZD4818、CCX354 和 CP481715，使用 Welch 校正的非配对 t 检验进行测试时，它们对 HEK_CCR1 细胞膜的亲和力显著高于对 RPMI 8226 细胞膜的亲和力（P < 0.05）。此外，效力排序在不同的细胞膜之间存在显著差异。使用 HEK_CCR1 细胞膜，我们发现 MLN3879 > CCX354 ≥ AZD4818 > CP481715 = BX471 > PS899877；在使用RPMI 8226细胞膜时，我们发现MLN3879 > BX471 > CP481715 ≥ PS899877 > AZD4818 > CCX354。[1]
AZD 4818是一种高效且选择性的CCR1拮抗剂，用于炎症性疾病的研究。它能抑制人单核细胞对MIP-1α的趋化作用。目前已对其治疗慢性阻塞性肺病（COPD）和其他炎症性疾病的潜力进行了研究。但该药尚未获得临床批准。 |
| 分子式 |
C27H32CL2N2O7
|
|---|---|
| 分子量 |
567.46
|
| 精确质量 |
566.159
|
| 元素分析 |
C, 57.15; H, 5.68; Cl, 12.50; N, 4.94; O, 19.74
|
| CAS号 |
1003566-93-5
|
| 相关CAS号 |
1003566-93-5
|
| PubChem CID |
24955007
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.317
|
| tPSA |
121.05
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
38
|
| 分子复杂度/Complexity |
838
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
CC(C(O)=O)(OC1=C(Cl)C=C(C(NC)=O)C(OC[C@@H](O)CN2CCC3(CC4=CC(Cl)=CC=C4O3)CC2)=C1)C
|
| InChi Key |
HVTUHSABWJPWNK-SFHVURJKSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H32Cl2N2O7/c1-26(2,25(34)35)37-23-12-22(19(11-20(23)29)24(33)30-3)36-15-18(32)14-31-8-6-27(7-9-31)13-16-10-17(28)4-5-21(16)38-27/h4-5,10-12,18,32H,6-9,13-15H2,1-3H3,(H,30,33)(H,34,35)/t18-/m0/s1
|
| 化学名 |
2-[2-chloro-5-[(2S)-3-(5-chlorospiro[3H-1-benzofuran-2,4'-piperidine]-1'-yl)-2-hydroxypropoxy]-4-(methylcarbamoyl)phenoxy]-2-methylpropanoic acid
|
| 别名 |
AZD4818; AZD-4818; AZD-4818; 1003566-93-5; UNII-S5UP6P540K; S5UP6P540K; 2-(2-Chloro-5-(((2S)-3-(5-chloro-2,3-dihydrospiro(benzofuran-2,4'-piperidin)-1'-yl)-2-hydroxypropyl)oxy)-4-((methylamino)carbonyl)phenoxy)-2-methylpropanoic acid; AZD-4818(AZD4818); AZD 4818
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~50 mg/mL (~88.1 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7622 mL | 8.8112 mL | 17.6224 mL | |
| 5 mM | 0.3524 mL | 1.7622 mL | 3.5245 mL | |
| 10 mM | 0.1762 mL | 0.8811 mL | 1.7622 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00687232 | Completed | Drug: AZD4818 Drug: Placebo |
Healthy | AstraZeneca | January 2008 | Phase 1 |
| NCT00629239 | Completed | Drug: AZD4818 Drug: Placebo |
Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) |
AstraZeneca | January 2008 | Phase 2 |
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
