| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
No pharmacological target; BCECF is a fluorescent probe that binds to intracellular components non-specifically. Its fluorescence is quenched or enhanced by protonation/deprotonation of its phenolic groups. The ratio of emissions at 535 nm (upon excitation at 490 and 440 nm) is linearly related to pH over a wide range. It has been validated as a non-radioactive alternative to 51Cr-release cytotoxicity assays, where it measures membrane integrity by dye retention.
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| 体外研究 (In Vitro) |
建议（以下是我们建议的操作流程，仅供参考，请根据您的具体情况进行调整）。1. 配制浓度为 2–20 mM 的 BCECF DMSO 储备液，并储存于 -20°C。2. 使用 HEPES（pH 7.4）或 PBS 配制 5–50 μM BCECF 染料缓冲溶液。3. 将 BCECF 染料加入细胞培养板中，6 孔板每孔加入 1000 μL，96 孔板每孔加入 100 μL，384 孔板每孔加入 25 μL。4. 将加染料的培养板置于细胞培养箱中孵育约半小时。5. 冲洗细胞，并用缓冲液代替染料缓冲溶液。 6. 对于比率测量，观察激发/发射波长为 490/535 nm 或 430/535 nm 处的荧光强度，以进行 pH 值测定。
在体外，BCECF 用于校准 pH 值测量。方法是制备含有该染料的已知 pH 值（pH 5.5 至 8.5）的标准缓冲液，并测量荧光比率。校准曲线用于将实验比率转换为 pH 值。该染料的荧光强度对离子强度、温度和大多数常见离子的变化不敏感。该染料具有光稳定性，并且在典型浓度（1–5 µM）下细胞毒性较低。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
BCECF不适用于治疗。它仅用于研究，以监测药物、激素或代谢改变引起的细胞内pH值变化。虽然它已被用于活体显微镜下测量肿瘤pH值，但这仅限于临床前成像研究。
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| 酶活实验 |
无细胞检测：配制一系列 pH 值从 5.0 到 8.5 的缓冲液（例如，柠檬酸盐、磷酸盐、Tris），其中含有 1 µM BCECF（游离酸）。使用荧光计或酶标仪测量激发波长 490 nm 和发射波长 440 nm（发射波长 535 nm）下的荧光强度。绘制 490/440 比值与 pH 值的关系图，并拟合 S 形曲线以获得 pKa 值。对于细胞毒性检测，BCECF-AM 不使用无细胞体系。
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| 细胞实验 |
将细胞（例如内皮细胞、神经元）在含有 2–5 µM BCECF-AM 的培养基中于 37°C 孵育 30–60 分钟。洗涤后，将细胞置于缓冲液（例如 Krebs-Ringer 缓冲液）中，并使用带有双激发滤光片的酶标仪测量荧光强度。为了进行校准，将细胞置于已知 pH 值的高钾缓冲液中，并用尼日利亚菌素 (10 µM) 处理，并记录比值。随后监测加入测试化合物（例如氯化铵、弱酸）后细胞内 pH 值的变化。
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| 动物实验 |
在体内，BCECF 可通过静脉注射或局部外用的方式应用于动物模型，用于组织 pH 值成像。例如，BCECF-AM 可通过微透析探针注入肿瘤，或滴入眼内以测量角膜 pH 值。荧光成像可使用显微镜或内窥镜进行。然而，由于 BCECF 清除迅速且存在组织自发荧光，其应用受到限制。目前尚无用于治疗目的的标准化动物实验方案。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
分子式 C27H20O11，分子量 520.44。外观：固体。溶解性：DMSO（≥10 mg/mL），水（溶解度有限）。BCECF-AM（乙酰氧基甲基酯）分子量为 684.65，更易溶于 DMSO。干燥保存于 -20°C，避光。纯度 ≥90%。激发波长：440/490 nm，发射波长：535 nm。酯基形式在溶液中易水解，请配制新鲜分装。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在工作浓度下无毒性；BCECF-AM 在高浓度 (>20 µM) 下可能对线粒体产生轻微影响。游离酸不透膜且无毒。未见遗传毒性或致癌性报道。处理荧光染料时应遵循标准安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BCECF是一种研究试剂，而非药物。它是应用最广泛的荧光pH探针，可从多家商业供应商处购买。几十年来，它一直是细胞生理学领域的标准工具。其比率式测量能力使其优于单波长指示剂。它还用于高通量筛选影响pH稳态的化合物。
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| 分子式 |
C27H20O11
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|---|---|
| 分子量 |
520.4411
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| 精确质量 |
520.101
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| CAS号 |
85138-49-4
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| 密度 |
1.67g/cm3
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| 沸点 |
936.2ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
318.2ºC
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| 折射率 |
1.743
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| LogP |
3.398
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| tPSA |
187.89
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~120.09 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9215 mL | 9.6073 mL | 19.2145 mL | |
| 5 mM | 0.3843 mL | 1.9215 mL | 3.8429 mL | |
| 10 mM | 0.1921 mL | 0.9607 mL | 1.9215 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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