| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Target: Estrogen receptor α (ERα) – noncompetitive inhibitor [1]
BHPI targets the estrogen receptor α (ERα), a nuclear receptor that plays a critical role in the growth and progression of breast, endometrial, and ovarian cancers. As a non-competitive antagonist, it binds to a site distinct from the estradiol-binding site, leading to the inhibition of ERα-mediated transcription. It triggers the unfolded protein response (UPR) and inhibits protein synthesis. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验：浓度为 100–1000 nM 的 BHPI 完全抑制了所有 15 种受试 ERα+ 癌细胞系（乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌）的增殖，包括耐药细胞系：4-OHT 耐药的 ZR-75-1、他莫昔芬/氟维司群耐药的 BT-474、EGF 刺激的 T47D（对 4-OHT、ICI、雷洛昔芬耐药）、顺铂耐药的 Caov-3 和多药耐药的 OVCAR-3。在 10 μM 浓度下，BHPI 对 12 种 ERα− 细胞系的增殖没有影响 [1]。
BHPI 可抑制 MCF-7 细胞在软琼脂中的非锚定依赖性生长 [1]。 BHPI 可显著降低所有 14 种 ERα+ 细胞系的蛋白质合成，但对 12 种 ERα− 细胞系没有影响；ERα 是产生这种效应的必要且充分条件。在具有强力霉素诱导型 ERα 的 MCF7ERαHA 细胞中，ERα 水平的升高逐渐增强了 BHPI 对蛋白质合成的抑制作用 [1]。 BHPI 可迅速增加 eIF2α 的磷酸化（30 分钟内），并激活 UPR 的 PERK、ATF6α 和 IRE1α 通路（p-PERK 水平升高、p50-ATF6α 裂解、XBP1 mRNA 剪接）。PERK 敲低或显性负性 eIF2α-S51A 突变可消除这种快速的蛋白质合成抑制作用 [1]。 BHPI 可诱导细胞内 Ca2+ 浓度显著且持续升高（Fluo-4 AM 成像），并通过 IP3R 钙通道的开放耗竭内质网 Ca2+ 储存。 2-APB（IP3R阻断剂）或IP3R siRNA可消除Ca2+升高和蛋白质合成抑制[1]。 BHPI可快速激活PLCγ（增加PLCγ-Tyr783磷酸化），导致IP3水平大幅升高（远高于E2）。敲低PLCγ可消除Ca2+升高和蛋白质合成抑制[1]。 BHPI可耗竭细胞内ATP，激活AMPK（增加p-AMPKα-Thr172、p-AMPKβ-Ser108和p-ACC-Ser79）。Thapsigargin（SERCA抑制剂）可阻止ATP耗竭和AMPK激活[1]。 BHPI在约2小时后诱导eEF2磷酸化（Thr56），从而阻断翻译延伸。它瞬时激活ERK1/2和mTORC1-p70S6K，导致eEF2K-Ser366磷酸化，从而最初延迟eEF2磷酸化。BHPI阻断分子伴侣BiP和p58IPK蛋白的诱导（尽管mRNA水平升高），导致eIF2α持续磷酸化和持续抑制蛋白质合成[1]。 BHPI抑制E2-ERα调控的基因表达：它抑制pS2、GREB1、XBP1、CXCL2 mRNA和ERE-荧光素酶的诱导，并阻断IL1-R1和EFNA1 mRNA的下调。这种抑制是非竞争性的（1000倍过量的E2也无法逆转）。 BHPI不与E2竞争ERα结合位点，不改变ERα蛋白水平或核定位，但抑制E2刺激的ERα和RNA聚合酶II募集至pS2和GREB1启动子（ChIP）[1]。 BHPI显著改变了纯化的全长ERα的荧光发射光谱，并在蛋白酶K消化后诱导产生ERα LBD的15 kDa蛋白水解片段，表明二者存在直接相互作用[1]。 体外实验表明，BHPI是ERα阳性癌细胞增殖的强效抑制剂。在细胞实验中，浓度在100至1000 nM之间时，BHPI可抑制ERα阳性乳腺癌、子宫内膜癌和卵巢癌细胞的增殖。它还能阻断17β-雌二醇诱导的耐药癌细胞增殖。其机制涉及UPR的激活和蛋白质合成的抑制。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验：在以MCF-7细胞（补充雌激素）为模型的小鼠异种移植瘤模型中，每日腹腔注射15 mg/kg的BHPI，持续10天，可使52个肿瘤中的48个（平均初始横截面积约45 mm²，设定为0%变化）迅速且显著地消退。载体对照组肿瘤则持续旺盛生长[1]。隔日注射10 mg/kg的BHPI最终可抑制肿瘤生长，并使最终肿瘤重量较对照组减少约60%[1]。BHPI耐受性良好：BHPI治疗组和对照组小鼠的食物摄入量和体重增加相似[1]。体内实验表明，BHPI具有治疗对其他疗法耐药的ERα阳性癌症的潜力。它通过激活UPR并抑制蛋白质合成，诱导癌细胞凋亡。然而，现有文献中并没有对动物模型的具体体内数据进行详细阐述。
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| 酶活实验 |
体外BHPI的ERα结合试验通常采用与标记雌激素配体的竞争性结合法。然而，作为一种非竞争性拮抗剂，其活性通常通过功能性试验进行评估。将细胞转染ERα反应性报告基因，并用该化合物处理，然后测量报告基因活性的抑制情况。
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| 细胞实验 |
细胞测定：用BHPI（100–1000 nM）处理数天后，通过计数细胞来评估细胞增殖情况；数据以平均值±标准误（SEM）（n=6）表示[1]。
蛋白质合成速率通过35S-甲硫氨酸掺入新合成蛋白质来测定[1]。 蛋白质印迹分析：裂解细胞，通过SDS-PAGE分离蛋白质，转移至膜上，并用针对p-PERK、PERK、p-eIF2α、eIF2α、p-AMPKα、AMPKα、p-ACC、ACC、p-eEF2、eEF2、p-eEF2K、eEF2K、p-ERK1/2、ERK1/2、BiP、p58IPK、ERα和肌动蛋白的抗体进行检测[1]。 qRT-PCR：分离总RNA，进行逆转录，并检测pS2、GREB1、XBP1、CXCL2、IL1-R1、EFNA1、CHOP、GADD34和p58IPK的mRNA水平。使用特异性引物进行定量[1]。 染色质免疫沉淀 (ChIP)：用 E2 ± BHPI 处理 MCF-7 细胞，交联，染色质超声处理，用抗 ERα 或抗 RNA 聚合酶 II 抗体进行免疫沉淀，并对 pS2 和 GREB1 启动子区域进行 PCR[1]。 钙成像：用 Fluo-4 AM 加载细胞，用 BHPI (1 μM) 处理 30 秒，并监测荧光。在无 Ca2+ 条件下，去除细胞外 Ca2+。对胞质 Ca2+ 水平进行定量[1]。 siRNA 敲低：用靶向 ERα、PERK、泛 IP3R（所有三种亚型）、PLCγ 的非编码 siRNA 或 SmartPools 转染细胞，然后用 BHPI 处理；蛋白质合成和Ca2+水平测定[1]。 IP3测定：用E2或BHPI处理10分钟后，定量细胞内IP3水平[1]。 荧光素酶测定：将ERE-荧光素酶报告基因转染至细胞，用E2±BHPI处理，并测定荧光素酶活性[1]。 软琼脂实验：用BHPI处理MCF-7细胞，观察其在软琼脂中的非锚定依赖性生长[1]。 体外BHPI细胞实验在ERα阳性癌细胞系（如MCF-7乳腺癌细胞）上进行。用不同浓度的化合物处理细胞，并评估其对细胞增殖（MTT实验）、ERα转录活性（报告基因实验）和细胞凋亡的影响。通过Western blot验证UPR的激活。 |
| 动物实验 |
动物实验方案：本研究使用携带MCF-7细胞异种移植瘤（补充雌激素）的雌性无胸腺小鼠。当肿瘤横截面积达到约45 mm²时，小鼠每日腹腔注射15 mg/kg的BHPI（或载体对照），持续10天。定期测量肿瘤横截面积。在另一组实验方案中，小鼠隔日接受10 mg/kg的BHPI。监测食物摄入量和体重。所有实验程序均已获得机构动物护理委员会的批准[1]。
BHPI的体内动物研究通常采用ERα阳性乳腺癌的小鼠异种移植瘤模型。荷瘤小鼠接受化合物治疗（通常通过腹腔注射），并随时间推移测量肿瘤生长抑制情况。此外，还会进行药效学研究以确认BHPI对肿瘤组织靶点的调控作用。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
现有文献中并未详细描述BHPI的具体药代动力学性质，例如半衰期和生物利用度。它是一种研究用化合物，通常用于体外实验。它可溶于DMSO。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性/毒代动力学：在小鼠异种移植研究中，BHPI耐受性良好；BHPI治疗组和对照组小鼠的食物摄入量和体重增加相似，未观察到明显的毒性[1]。
体外实验表明，10 μM的BHPI对12种ERα−细胞系的增殖没有影响，表明其具有选择性和非特异性毒性较低[1]。 现有文献中未提供BHPI的完整毒理学数据。作为一种研究化合物，它仅供实验室使用，不得用于人体治疗。使用时应遵循安全预防措施。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
补充信息：BHPI是一种非竞争性ERα生物调节剂，它能将正常的、微弱且短暂的E2-ERα介导的UPR激活转变为大规模、持续且具有细胞毒性的UPR激活。与主要发挥细胞抑制作用的传统抗雌激素不同，BHPI通常能杀死耐药的ERα阳性癌细胞。其机制包括：ERα依赖性地过度激活质膜PLCγ → IP3增加 → IP3R Ca2+通道开放 → 内质网Ca2+储存耗竭 → 激活UPR的三个分支（PERK/eIF2α、ATF6α、IRE1α/XBP1）。同时，在IP3R通道持续开放的情况下，SERCA的Ca2+泵送循环会消耗ATP，从而激活AMPK。在后期，BHPI通过激活eEF2K抑制eEF2，阻断翻译延伸。通过抑制UPR分子伴侣BiP和p58IPK的合成，BHPI可阻止UPR的消退，从而导致持续的蛋白质合成抑制和细胞死亡。BHPI还能抑制核内E2-ERα调控的基因表达，且不与E2竞争结合位点。它对通常对现有内分泌疗法无反应的妇科癌症（乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌）显示出高效性[1]。BHPI是一种新型、强效的非竞争性雌激素受体α（ERα）拮抗剂。它能选择性地阻断耐药ERα阳性癌细胞的增殖。本产品仅供研究使用。
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| 分子式 |
C21H17NO3
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|---|---|
| 分子量 |
331.36458
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| 精确质量 |
331.121
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| CAS号 |
56632-39-4
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| PubChem CID |
3860640
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.777
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| tPSA |
73.05
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
469
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
FABLAHMQSQFDHR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H17NO3/c1-13-3-2-4-18-19(13)22-20(25)21(18,14-5-9-16(23)10-6-14)15-7-11-17(24)12-8-15/h2-12,23-24H,1H3,(H,22,25)
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| 化学名 |
3,3-bis(4-hydroxyphenyl)-7-methyl-1H-indol-2-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~120 mg/mL (~362.14 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (9.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 30.0 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (9.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 30.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0179 mL | 15.0893 mL | 30.1787 mL | |
| 5 mM | 0.6036 mL | 3.0179 mL | 6.0357 mL | |
| 10 mM | 0.3018 mL | 1.5089 mL | 3.0179 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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