BI-6C9

别名: BI-6C9; BI 6C9; BI6C9
目录号: V4719 纯度: ≥98%
BI-6C9 是一种新型、有效的 BH3 相互作用域 (Bid) 抑制剂,Kd 为 20 µM,它通过阻止线粒体外膜电位 (MOMP) 和线粒体裂变来发挥作用,并保护细胞免于细胞死亡。
BI-6C9 CAS号: 791835-21-7
产品类别: Metabolism|代谢
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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纯度: ≥98%

产品描述
BI-6C9 是一种新型、有效的 BH3 相互作用域 (Bid) 抑制剂,Kd 为 20 µM,它通过阻止线粒体外膜电位 (MOMP) 和线粒体裂变来发挥作用,并保护细胞免于细胞死亡。 Bid 抑制剂 BI-6c9 阻止 MOMP 和线粒体裂变,并保护细胞免于细胞死亡。谷氨酸诱导的氧化应激导致 Bid 的线粒体易位,从而诱导线粒体裂变和相关的线粒体细胞死亡途径。抑制病理性线粒体碎片的调节因子被认为是一种有效的神经保护策略。
生物活性&实验参考方法
靶点
BI-6c9 is a highly specific inhibitor of the pro-apoptotic Bcl-2 family protein Bid.[1]
体外研究 (In Vitro)
谷氨酸(3 mM 和 5 mM)处理后约 4.5 小时,HT-22 细胞表现出细胞活力下降。 BI-6c9(10 μM;18 小时)大大减少了谷氨酸中毒后细胞活力的丧失[1]。
在暴露于谷氨酸(5 mM)的 HT-22 海马神经元中,用 BI-6c9(10 µM)处理可防止谷氨酸诱导的线粒体分裂,保留其管状网络形态(I 类和 II 类),并阻止其向碎片化线粒体(III 类和 IV 类)转变。[1]
BI-6c9(10 µM)可防止谷氨酸(5 mM)在 HT-22 细胞中诱导线粒体膜电位(ΔΨm)崩溃,该结果通过 JC-1 荧光法评估。它能将红/绿荧光比率恢复至接近对照水平,其保护效果与对去极化剂 CCCP 的防护作用相当。[1]
BI-6c9(10 µM)可减轻谷氨酸诱导的 HT-22 神经元细胞死亡。在 MTT 实验中,它能将细胞存活率从约20%(仅谷氨酸处理)恢复至接近基线水平。实时阻抗监测(xCELLigence 系统)证实,BI-6c9 能防止由谷氨酸(3 或 5 mM)引起的 Normalized Cell Index (NCI) 延迟下降,表明其对细胞死亡具有保护作用。[1]
细胞实验
细胞活力测定 [1]
细胞类型: HT-22 细胞
测试浓度: 10 μM
孵育时间: 18 小时
实验结果: 减弱谷氨酸毒性酸诱导的细胞死亡。
细胞活力(MTT法): 将 HT-22 细胞接种于 96 孔板中。用谷氨酸和/或 BI-6c9 处理 18 小时后,加入 MTT 至终浓度 0.25 mg/ml,孵育 2 小时。通过移除培养基、将板在 -80°C 冷冻至少 1 小时,然后加入二甲基亚砜溶解甲臜结晶来终止反应。在 590 nm 处测量吸光度,参考波长为 630 nm。[1]
线粒体形态分析: 用线粒体靶向 GFP (mGFP) 质粒转染 HT-22 细胞。转染后 24 小时,将细胞接种于包被的载玻片上并进行处理。18 小时后,用 4% PFA 固定细胞,用 DAPI 复染细胞核,通过荧光或共聚焦显微镜采集图像。由盲态的研究人员将线粒体分为四种形态状态(从细长/管状到碎片化),并使用 ImageJ 软件量化线粒体长度。[1]
线粒体膜电位(JC-1法): 处理后(例如,用谷氨酸处理 12 小时),根据实验方案用 JC-1 染料(终浓度 2 µM)对 HT-22 细胞进行染色。收集细胞,洗涤并重悬于 PBS 中。通过流式细胞术或落射荧光显微镜分析 JC-1 荧光。绿色荧光(单体形式,发射峰约 530 nm)指示染料摄入,而红色荧光(J-聚集体,发射峰约 613 nm)指示完整的 ΔΨm。使用 CCCP 处理作为去极化的阳性对照。[1]
实时细胞阻抗监测(xCELLigence 系统): 将 HT-22 细胞以每孔 4500 个细胞的密度接种于含有集成微电极的专用 96 孔 E-plate 中。24 小时后,用溶剂、BI-6c9(10 µM)、谷氨酸(3 或 5 mM)或其组合处理细胞。在不将培养板从培养箱中取出的情况下,实时连续监测电极间的电阻抗,该值以 Normalized Cell Index (NCI) 报告。NCI 的下降与细胞死亡/脱壁相关。[1]
参考文献

[1]. Bid mediates fission, membrane permeabilization and peri-nuclear accumulation of mitochondria as a prerequisite for oxidative neuronal cell death. Brain Behav Immun. 2010 Jul;24(5):831-8.

其他信息
BI-6c9 is referred to as a "highly specific Bid inhibitor".
The study proposes that inhibiting regulators of pathological mitochondrial fragmentation, such as Bid via BI-6c9, is an efficient neuroprotection strategy.
The mechanism involves BI-6c9 preventing Bid activation/translocation to mitochondria, thereby inhibiting downstream events: mitochondrial fission, loss of mitochondrial membrane potential, permeabilization of the outer mitochondrial membrane, and the release of apoptogenic factors like AIF, ultimately preventing caspase-independent neuronal cell death.[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C23H25N3O4S2
分子量
471.5923
精确质量
471.129
元素分析
C, 58.58; H, 5.34; N, 8.91; O, 13.57; S, 13.60
CAS号
791835-21-7
PubChem CID
11547341
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.368g/cm3
折射率
1.671
LogP
6.251
tPSA
144.2
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
10
重原子数目
32
分子复杂度/Complexity
661
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O=C(CCCNS(C1C=CC(OC)=CC=1)(=O)=O)NC1C=CC(SC2C=CC(N)=CC=2)=CC=1
InChi Key
LCFUJBSKPDPGKO-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C23H25N3O4S2/c1-30-19-8-14-22(15-9-19)32(28,29)25-16-2-3-23(27)26-18-6-12-21(13-7-18)31-20-10-4-17(24)5-11-20/h4-15,25H,2-3,16,24H2,1H3,(H,26,27)
化学名
N-[4-[(4-aminophenyl)thio]phenyl]-4-[[(4-methoxyphenyl)sulfonyl]amino]-butanamide
别名
BI-6C9; BI 6C9; BI6C9
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~250 mg/mL (~530.12 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1205 mL 10.6024 mL 21.2049 mL
5 mM 0.4241 mL 2.1205 mL 4.2410 mL
10 mM 0.2120 mL 1.0602 mL 2.1205 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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