| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
BIBF0775 targets transforming growth factor β receptor I (TGFβRI/ALK5) (IC50 = 14 nM in kinase activity assay); it also exhibits inhibitory activity against ALK4 (IC50 = 59 nM) and ALK7 (IC50 = 110 nM) [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 在放射性激酶实验中，BIBF0775可强效抑制重组人TGFβRI（ALK5）的激酶活性，IC50为14 nM；对ALK4的IC50为59 nM，对ALK7的IC50为110 nM，而在浓度高达10 μM时，对其他激酶（如ALK1、ALK2、ALK3、EGFR、VEGFR2、PDGFRβ等）仅表现出弱抑制或无抑制作用[1]
2. 在A549肺腺癌细胞中，BIBF0775（100 nM）可完全阻断TGF-β1诱导的Smad2磷酸化（Western blot检测），并以IC50为23 nM的效力抑制TGF-β1诱导的Smad结合元件（SBE）报告基因的转录激活[1] 3. BIBF0775（0.1–10 μM）以剂量依赖的方式抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞（MRC-5细胞）增殖，其抗增殖活性的IC50为45 nM[1] 4. 在原代人肾近端小管上皮细胞（HRPTEpiC）中，BIBF0775（1 μM）可抑制TGF-β1诱导的纤连蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的上调（Western blot检测），这两种蛋白是上皮-间质转化（EMT）的标志物[1] |
| 酶活实验 |
1. TGFβRI（ALK5）激酶活性实验：将重组人TGFβRI胞质结构域与ATP（20 μM）、[γ-³³P]ATP及合成肽底物（源自Smad3）共同孵育，同时加入不同浓度的BIBF0775；加入终止液终止反应后，将磷酸化的底物捕获在滤膜上，通过闪烁计数器检测滤膜相关的放射性以确定激酶活性，绘制剂量反应曲线并计算IC50值[1]
2. ALK4和ALK7激酶活性实验：采用与TGFβRI实验相同的放射性激酶实验方案，以重组人ALK4或ALK7胞质结构域为酶源，搭配对应的肽底物；测试不同浓度的BIBF0775，并从剂量反应数据中计算对ALK4和ALK7抑制的IC50值[1] 3. 激酶选择性实验：利用放射性激酶实验方法对26种不同的激酶（包括ALK1、ALK2、ALK3、EGFR、VEGFR2、PDGFRβ等）进行筛选，在10 μM浓度下测试BIBF0775，通过测定激酶抑制百分比来评估其对TGFβRI/ALK5的选择性[1] |
| 细胞实验 |
1. A549细胞中Smad2磷酸化的Western blot实验：将A549细胞血清饥饿24小时后，用不同浓度的BIBF0775预处理1小时，再用TGF-β1（5 ng/mL）刺激30分钟；裂解细胞后，通过SDS-PAGE分离蛋白提取物并转移至膜上，用磷酸化Smad2（p-Smad2）和总Smad2抗体进行免疫印迹，通过密度计量法定量条带强度，以此评估对Smad2磷酸化的抑制作用[1]
2. A549细胞中SBE报告基因实验：将Smad结合元件（SBE）荧光素酶报告质粒和海肾荧光素酶质粒（内参）瞬时转染至A549细胞；转染24小时后，用BIBF0775预处理细胞1小时，再用TGF-β1（5 ng/mL）刺激16小时；采用双荧光素酶报告基因检测系统测定荧光素酶活性，计算萤火虫荧光素酶与海肾荧光素酶的活性比值以反映转录激活水平，通过剂量反应曲线计算对SBE报告基因抑制的IC50[1] 3. MRC-5细胞增殖实验：将人肺成纤维细胞（MRC-5细胞）接种于96孔板并血清饥饿24小时，用不同浓度的BIBF0775预处理1小时后，加入TGF-β1（5 ng/mL）刺激72小时；采用比色法细胞活力实验评估细胞增殖情况，在特定波长下检测吸光度并计算抗增殖活性的IC50[1] 4. HRPTEpiC细胞中EMT标志物的Western blot实验：将原代人肾近端小管上皮细胞（HRPTEpiC）血清饥饿24小时，用1 μM BIBF0775预处理1小时后，加入TGF-β1（5 ng/mL）刺激48小时；裂解细胞后，通过Western blot用纤连蛋白、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和GAPDH（内参）抗体分析蛋白提取物，定量条带强度以评估对EMT标志物上调的抑制作用[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. BIBF0775 is a 3-substituted indolinone derivative designed and synthesized as a potent and selective inhibitor of TGFβRI (ALK5) [1]
2. The design of BIBF0775 is based on structure-activity relationship (SAR) studies of indolinone analogs, with modifications at the 3-position of the indolinone core to enhance potency and selectivity for TGFβRI [1] 3. BIBF0775 exerts its biological effects by inhibiting the kinase activity of TGFβRI, thereby blocking the TGF-β/Smad signaling pathway that is involved in fibrosis, epithelial-mesenchymal transition (EMT), and cell proliferation [1] 4. BIBF0775 shows high selectivity for the TGFβ superfamily type I receptors (ALK5, ALK4, ALK7) and minimal activity against other tyrosine and serine/threonine kinases, indicating a favorable selectivity profile for therapeutic development [1] |
| 分子式 |
C31H34N4O2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
494.64
|
|
| 精确质量 |
494.27
|
|
| 元素分析 |
C, 75.28; H, 6.93; N, 11.33; O, 6.47
|
|
| CAS号 |
334951-90-5
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
135837779
|
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
|
| LogP |
5.7
|
|
| tPSA |
71.9
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
|
| 重原子数目 |
37
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
767
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| InChi Key |
JGQSLTZPBLZNBX-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C31H34N4O2/c1-3-34(2)31(37)24-14-17-26-27(20-24)33-30(36)28(26)29(23-10-6-4-7-11-23)32-25-15-12-22(13-16-25)21-35-18-8-5-9-19-35/h4,6-7,10-17,20,33,36H,3,5,8-9,18-19,21H2,1-2H3
|
|
| 化学名 |
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0217 mL | 10.1084 mL | 20.2167 mL | |
| 5 mM | 0.4043 mL | 2.0217 mL | 4.0433 mL | |
| 10 mM | 0.2022 mL | 1.0108 mL | 2.0217 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
J Med Chem.2010 Oct 28;53(20):7287-95. |
|---|
Crystal structure of TGFbRI complexed with an indolinone inhibitor.J Med Chem.2010 Oct 28;53(20):7287-95. |
Crystal structure of TGFbRI complexed with an indolinone inhibitor.J Med Chem.2010 Oct 28;53(20):7287-95. |
Bezeotermin alfa
KQFK
LY550410
TP-DEA2
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
