Bifenazate   中文名称: 联苯肼酯

Bifenazate targets GABA receptors containing the resistance to dieldrin (Rdl) subunit homolog. It acts as a positive allosteric modulator of GABA receptors containing the TuGABAR subunit in Tetranychus urticae (spider mites). By modulating GABA receptor function, bifenazate disrupts neuromuscular transmission in mites, leading to paralysis and death. The compound's selectivity for mite GABA receptors over mammalian GABA receptors contributes to its favorable safety profile for non-target organisms.

体外实验表明，联苯肼酯对多种螨虫具有强效杀螨活性。浓度为25 ppm时，可100%控制螨虫。该化合物对蜘蛛螨、红螨和草螨的成虫、卵和若虫均有效。联苯肼酯作为二斑叶螨（Tetranychus urticae）中含有Rdl亚基同源物的GABA受体的正向变构调节剂发挥作用。其快速杀灭效果通常在3天内即可观察到。该化合物的活性采用标准杀螨剂生物测定法对螨虫种群进行评估。

在活体条件下，联苯肼酯是一种高效的杀螨剂，可有效防治多种作物和观赏植物上的螨虫。它具有快速击倒作用（通常不到3天），且在叶片上的残留活性可持续长达4周。浓度为25 ppm时，该化合物可100%控制螨虫。联苯肼酯可用于温室、荫棚、苗圃、田间、园林景观和室内景观等多种环境。其良好的环境友好性和毒理学特性使其适用于综合虫害管理方案。该化合物对大鼠的急性经口毒性较低（LD₅₀ = 5000 mg/kg）。

体外酶/受体结合试验用于检测联苯肼酯对GABA受体功能的调节作用。该试验通常使用表达TuGABAR受体的二斑叶螨（Tetranychus urticae）膜制备物，在放射性标记的GABA受体配体存在下，与不同浓度的联苯肼酯孵育。通过荧光或电生理方法测量GABA诱导的氯离子流的增强情况，来评估该化合物的正向变构调节作用。这些试验证实了该化合物作为螨虫GABA受体正向变构调节剂的作用机制。

由于联苯肼酯是一种杀螨剂而非治疗剂，因此通常不进行体外细胞试验。然而，可以使用源自螨虫的细胞系来评估其对螨虫细胞的影响。将细胞培养后用联苯肼酯处理，然后使用 MTT 或其他方法评估细胞活力。在表达螨虫 GABA 受体的细胞中，可以使用钙成像或电生理学方法来评估该化合物对 GABA 受体功能的影响。这些试验证实了该化合物在细胞水平上的杀螨活性。

联苯肼酯的体内动物实验主要用于评估其杀虫效果和毒理学特性。该化合物被施用于受螨虫侵染的植物，并随时间推移评估螨虫的死亡率。联苯肼酯具有快速击倒作用（通常不到3天），且在叶片上的残留活性可持续长达4周。大鼠毒理学研究表明，其急性经口LD₅₀为5000 mg/kg，经皮LD₅₀大于2000 mg/kg。这些研究证实了该化合物的有效性和良好的安全性。

吸收、分布和排泄
Sprague-Dawley Crl:CD/BR 大鼠（雌雄各半）分别灌胃给予 10 或 1000 mg/kg 的 [(14)C]…/联苯肼/…（放射化学纯度：>98%，比活度：34.4 mCi/mmol，标记于芳香环上；联苯肼/…（未标记纯度：99.6%））。在分布、代谢和排泄研究中，每组雌雄各 5 只动物给药，并收集 7 天的尿液和粪便。在胆道研究中，每组雌雄各 3 只插管动物给药，并收集 72 小时的尿液、粪便和胆汁。在初步药代动力学和药代动力学研究中，分别对每组雌雄各 3 只和每组雌雄各 5 只动物进行给药。在初步研究中，连续4天收集尿液和粪便，并通过颈静脉插管连续72小时收集血液样本。在主要研究中，对10 mg/kg治疗组的动物连续4天收集尿液和血液样本。对1000 mg/kg治疗组的动物连续7天收集尿液、粪便和血液样本。在组织分布研究中，每组雌雄各9只动物接受给药。在10 mg/kg治疗组中，分别于给药后6、24和48小时处死雌雄各3只动物。在1000 mg/kg治疗组中，分别于给药后18、42和72小时处死雌雄各3只动物。在指定时间间隔收集尿液和粪便。对分布、代谢和排泄研究以及组织分布研究中的组织样本进行处理，以检测放射性标记物质的存在。从分布、代谢和排泄研究以及胆汁研究中获得的尿液和粪便中分离出放射性标记物质，并对其进行结构分析以确定其代谢谱。两个剂量组的主要排泄途径均为粪便。10 mg/kg 组，66% 的给药剂量 (AD) 从粪便中回收，其中 75-82% 在给药后 24 小时内排出。7 天后，在尿液和笼子冲洗液中回收了放射性标记的 AD，占 AD 的 27-29%。1000 mg/kg 治疗组，给药后 7 天内 82% 的 AD 从粪便中回收，其中 46-57% 在给药后 24 小时内回收。在尿液和笼子冲洗液中分离出的 AD 百分比为 10-15%。胆汁研究表明，胆汁是 10 mg/kg 治疗组的重要排泄途径。给药后72小时内，低剂量组有69-74%的给药剂量从胆汁中回收。相比之下，高剂量组在72小时内仅有21-26%的给药剂量从胆汁中分离出来。10 mg/kg组的粪便回收率仅为7-8%，而1000 mg/kg组则为56-64%。高剂量组有相当一部分药物未被吸收。观察到的药代动力学参数如下：10 mg/kg组和1000 mg/kg组雄性和雌性动物的达峰时间（tmax）分别为5小时和6小时，以及18-24小时；10 mg/kg组和1000 mg/kg组雄性和雌性动物的血药浓度峰值（Cmax）分别为6.4和5.6 μg/g，以及119和71 μg/g。 1000 mg/kg 组的相应 t1/2 值，低剂量组雄性分别为 11.5 小时和 13.3 小时，高剂量组雌性分别为 12 小时和 15.6 小时。组织分布研究表明，10 mg/kg 组在给药后 6 小时达到最大残留水平，且在任何组织中均未检测到放射性标记物质。1000 mg/kg 组中，雄性动物在给药后 18 小时，雌性动物在给药后 42 小时，大多数组织中达到最大残留水平。给药后长达 7 天，在某些器官（例如脾脏、红细胞、肝脏和肾脏）中仍可检测到显著的放射性标记物。对从粪便中回收的放射性标记物的分析表明，其母体化合物发生了多种修饰，包括肼氧化、脱甲基、环化、羟基化、分离成联苯和肼羧酸部分，以及与葡萄糖醛酸或硫酸结合。在10 mg/kg组中，从粪便中提取的已鉴定组分占总吸收量的39%。主要化合物为联苯肼葡萄糖醛酸苷（占总吸收量的6.3%–8.9%）、联苯肼酯（占总吸收量的4.8%–7.2%）和4-羟基联苯（占总吸收量的5.5%–7.1%）。相比之下，在1000 mg/kg组中，从粪便中回收的母体化合物占总吸收量的48%–61%。联苯肼葡萄糖醛酸苷占总吸收量的4.7%–5.6%。总体而言，低剂量下受试物质吸收良好，并在经胆汁排泄前发生代谢和结合。高剂量下，剂量百分比显著降低。

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代谢/代谢物
Sprague-Dawley Crl:CD/BR 大鼠（雄性和雌性）分别给予 10 或 1000 mg/kg 的 [(14)C].../联苯肼/（放射化学纯度：>98%，比活度：34.4 mCi/mmol，标记于芳香环上，.../联苯肼/（未标记...纯度：99.6%））。... 对从粪便中回收的放射性标记部分进行分析，发现母体化合物发生了多种修饰。肼被氧化、去甲基化、环羟基化，分离成联苯和肼羧酸部分，并与葡萄糖醛酸或硫酸结合。在10 mg/kg剂量组中，从粪便中提取的已鉴定组分占给药剂量（AD）的39%。主要化合物为联苯肼/葡萄糖醛酸苷（占总摄入量的6.3%–8.9%）、联苯肼（占总摄入量的4.8%–7.2%）和4-羟基联苯（占总摄入量的5.5%–7.1%）。相比之下，在1000 mg/kg剂量组中，粪便中回收的母体化合物占总摄入量的48%–61%。联苯肼葡萄糖醛酸苷占总摄入量的4.7%–5.6%。尿液中回收的主要成分为对,对-联苯的结合物或对,对'-联苯和4-羟基联苯的硫酸盐。这些化合物的总量在10 mg/kg剂量组中占给药剂量的19-21%，在1000 mg/kg剂量组中占给药剂量的6-7%。在胆汁中鉴定出的主要代谢物为4-羟基联苯（在10 mg/kg组中占AD的17-20%，在1000 mg/kg组中占AD的2.1-2.5%）、4-羟基-4-甲氧基联苯（在10 mg/kg组中占AD的17-19%，在1000 mg/kg组中占AD的2.8%）和联苯肼/葡萄糖醛酸苷（在10 mg/kg组中占AD的9-12%，在1000 mg/kg组中占AD的9-13%）。

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生物半衰期
Sprague-Dawley Crl:CD/BR 大鼠（雄性和雌性）分别灌胃给予 10 或 1000 mg/kg 的 [(14)C]……联苯肼/……（放射化学纯度：>98%，比活度：34.4）mCi/mmol，标记于芳香环上；/联苯肼/……（未标记……纯度：99.6%）。获得以下药代动力学参数：10 mg/kg 组和 1000 mg/kg 组雄性和雌性大鼠的 tmax 分别为 5 小时和 6 小时以及 18-24 小时；10 mg/kg 组和 1000 mg/kg 组雄性和雌性大鼠的 Cmax 分别为 6.4 和 5.6 μg 当量/g 以及 119 和 71 μg 当量/g；低剂量组和高剂量组中男性和女性的半衰期（t1/2）分别为11.5小时和13.3小时，以及12小时和15.6小时。联苯肼酯的药代动力学（PK）数据主要来源于毒理学和环境研究。该化合物的分子量为300.35 g/mol，为白色结晶固体。在pH 7时，其辛醇/水对数比值（log P）为3.4，20℃时的水溶性为3.76 mg/L。这些性质表明其具有中等亲脂性和低水溶性，这是杀螨剂的典型特征。该化合物的代谢和排泄已在农药登记的背景下进行了研究。

毒性概述
鉴别与用途：比弗洛林为固体。用作杀螨剂/杀螨剂（杀虫剂）。人体暴露与毒性：暂无数据。动物研究：比弗洛林对兔子有轻微的眼部和皮肤刺激。在犬类中，浓度为 400 ppm 和 1000 ppm 的比弗洛林可引起髓系增生，并导致红细胞计数呈剂量依赖性下降，血小板计数和血清胆红素水平升高。在大鼠中，观察到的唯一发育影响是雄性大鼠在浓度为 80 ppm 和 200 ppm 时出现轻微的包皮-龟头分离，以及雌性大鼠在浓度为 200 ppm 时出现阴道穿孔。该药物未显示对鼠伤寒沙门氏菌TA98、TA100、TA1535和TA1537菌株以及大肠杆菌WP2 uvrA菌株具有致突变性。在中国仓鼠卵巢细胞中，未观察到与治疗相关的染色体畸变细胞百分比增加。Biflorin治疗未导致小鼠微核数量增加。生态毒性研究：Biflorin对家禽表现出轻度急性经口毒性（LD50 = 1032 mg/kg）和中度亚急性摄入毒性（LC50 = 656-1862 ppm）。Biflorin对小型哺乳动物几乎无毒（LD50 > 5000 mg/kg）。现有数据表明，比弗洛林对淡水鱼（LC50 = 0.58-76 ppm）和水生无脊椎动物（LC50/EC50 = 0.50 ppm）具有急性高毒性。相互作用……我们测试了已知有机磷酸酯类和氨基甲酸酯类化合物抑制比弗洛林活化的能力，从而降低其杀螨活性。在螨虫预先暴露于有机磷酸酯类和氨基甲酸酯类化合物后，我们测定了其体内酯酶活性。结果表明，不同化合物对酯酶的抑制程度与其拮抗比弗洛林对螨虫作用的能力密切相关。这些发现表明，有机磷酸酯类和氨基甲酸酯类化合物会干扰比弗洛林的药效，最可能的机制是通过抑制负责活化该前药的羧酸酯酶。由于其强烈的拮抗作用，比弗洛林不应与氨基甲酸酯类或有机磷酸酯类农药混合使用。此外，反复施用有机磷农药和联苯肼酯也会带来实际风险。本研究再次表明，了解其作用机制对于合理制定抗性管理策略至关重要。

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非人类毒性值
大鼠口服LD50 >5000 mg/kg
大鼠皮肤LD50 >5000 mg/kg

联苯肼酯对哺乳动物的毒性相对较低。大鼠急性口服LD₅₀为5000 mg/kg，急性皮肤LD₅₀ >2000 mg/kg。该化合物不适用于人类或兽医用途，仅用作农药。使用时应采取适当的安全预防措施。世界卫生组织（WHO）已对联苯肼酯进行评估，并制定了可接受的每日摄入量（ADI）和急性参考剂量（ARfD）值。该化合物仅供研究使用，不得供人类食用。

[1]. Dekeyser, M.A., McDonald, P.T., and Angle, G.W., Jr. The discovery of bifenazate, a novel carbazate acaricide Chimia 57(11), 702-704 (2003).

[2]. A novel action of highly specific acaricide; bifenazate as a synergist for a GABA-gated chloride channel of Tetranychus urticae [Acari: Tetranychidae]. Neurotoxicology. 2012 Jun;33(3):307-13.

联苯肼是一种羧酸酯，由2-(4-甲氧基[1,1'-联苯]-3-基)肼羧酸与2-丙醇缩合制得。它是一种杀螨剂，作用机制与咔唑酸类似，来源于联苯的氢化物。据报道，灵芝中含有联苯肼，并有相关数据可供参考。联苯肼是一种用于防治温室、荫棚、苗圃、田地、花园和室内景观中观赏植物螨虫的杀螨剂。联苯肼在所有接触途径中均表现出较低的急性毒性（IV级），且无皮肤致敏性。它对皮肤无刺激性，对眼睛的刺激性也极小。在一系列必要的致突变性研究中，联苯肼的致突变性结果为阴性。联苯肼酯是一种卡巴嗪类杀螨剂，分子式为C₁₇H₂₀N₂O₃，分子量为300.35 g/mol。它作为二斑叶螨（Tetranychus urticae）中含有Rdl亚基同源物的GABA受体的正向变构调节剂发挥作用。联苯肼酯在25 ppm浓度下可100%控制螨虫，具有快速击倒作用（通常不到3天），且在叶片上的残留活性可持续长达4周。它用于防治多种作物和观赏植物上的螨虫害虫。该化合物对哺乳动物的急性毒性较低。

C17H20N2O3

300.3523

300.147

149877-41-8

176879

Light yellow to yellow solid powder

1.2±0.1 g/cm3

122℃

1.578

3.12

59.59

2

4

6

22

343

0

VHLKTXFWDRXILV-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C17H20N2O3/c1-12(2)22-17(20)19-18-15-11-14(9-10-16(15)21-3)13-7-5-4-6-8-13/h4-12,18H,1-3H3,(H,19,20)

propan-2-yl N-(2-methoxy-5-phenylanilino)carbamate

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 250 mg/mL (~832.36 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。