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Biotin Hydrazide

别名: Biotin Hydrazide (+)-Biotin Hydrazide Hydrazide biotin Biotine hydrazide Biotin-hydrazide Biotin-Hz 生物素酰肼;Biotin Hydrazide 生物素酰肼;D-生物素酰肼
目录号: V7364 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Biotin Hydrazide 是一种羰基反应性生物素化试剂和羰基探针。
Biotin Hydrazide CAS号: 66640-86-6
产品类别: New1
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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100mg
250mg
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产品描述
生物素酰肼是一种羰基反应性生物素化试剂和羰基探针。
生物活性&实验参考方法
靶点
Protein Carbonyls - Biotin hydrazide is a chemical probe that specifically reacts with carbonyl groups (aldehydes and ketones) introduced into proteins by oxidative stress (protein carbonylation). These carbonyls are formed on multiple amino acid residues including histidine, lysine, cysteine, arginine, threonine, and proline [1]
.
- The reaction forms a hydrazone bond with the carbonyl groups, which can be stabilized by reduction with sodium cyanoborohydride [1]
.
体外研究 (In Vitro)
糖蛋白和糖脂可使用生物素化试剂生物素酰肼进行生物素化[1]。
氧化蛋白的标记：生物素酰肼用于衍生化分离的线粒体或其他蛋白质样品中的蛋白质羰基。标记后，可使用链霉亲和素-辣根过氧化物酶 (HRP) 偶联物在蛋白质印迹分析中检测生物素化蛋白。该方法允许使用二维凝胶电泳 (IEF/SDS-PAGE) 结合蛋白质印迹法，可视化和比较不同条件（例如衰老）下的蛋白质羰基化水平[1]。
- 年龄依赖性羰基化的证明：作者使用上述生物素酰肼方案，证明了大鼠睾丸线粒体中蛋白质羰基化水平随年龄增长而增加。代表性的 2D Western blot 图像显示，许多蛋白质随着年龄的增长表现出羰基含量增加，而少数蛋白质（例如，斑点编号 7）则表现出减少，这表明该探针可用于研究衰老过程中的氧化应激 [1]
。
参考文献

[1]. Two-dimensional gel electrophoretic detection of protein carbonyls derivatized with biotin-hydrazide. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2016 Apr 15;1019:128-31.
其他信息
化学成分：生物素酰肼（Sigma产品编号B7639，分子量：258.34）是一种小分子探针，包含生物素部分和酰肼基团，可与羰基反应。通常将其配制成60 mM的DMSO储备液，并在-80°C下保存长达6个月[1]。
- 在蛋白质氧化研究中的应用：蛋白质羰基是衰老过程中以及中风、糖尿病和神经退行性疾病等与年龄相关的疾病中广泛使用的氧化应激生物标志物。生物素酰肼可替代传统的DNPH法，避免抗体亲和力不稳定和非特异性检测的问题[1]。
- 反应机理：生物素酰肼与蛋白质羰基反应形成腙键。该键可通过氰基硼氢化钠 (NaCNBH₃) 还原稳定。所得生物素化蛋白可使用链霉亲和素-HRP偶联物进行高灵敏度检测[1]
。
- 其他探针：文中提及其他类似探针，包括N'-氨氧甲基羰基肼基-D-生物素和醛反应性生物素探针，这些探针无需还原剂即可稳定[1]
。
- 方法优势：与基于DNPH的免疫化学检测相比，生物素酰肼/链霉亲和素系统具有更高的检测重现性，并避免了抗DNPH抗体批次间差异的问题[1]
。
- 样品制备注意事项：使用生物素酰肼进行二维凝胶电泳时，需要进行TCA沉淀和洗涤步骤以去除SDS，因为SDS会干扰等电聚焦(IEF)。对于一维SDS-PAGE，由于探针不干扰电泳，因此可以省略这些步骤[1]。
- 标记稳定：虽然有些方案省略了氰基硼氢化钠还原步骤，但作者通常使用它来稳定腙键。后续的IEF和SDS-PAGE样品制备步骤中会用到还原剂（DTT或β-巯基乙醇），这些还原剂也可能有助于稳定标记[1]。
- 检测灵敏度：HRP-链霉亲和素在含0.2% BSA的TBST缓冲液中可稀释至1:50,000。如果信号过强，BSA 可用 5% 脱脂奶粉代替 [1]
。
- 下游应用：通过生物素酰肼标记和蛋白质印迹法鉴定的蛋白质斑点可与平行的考马斯亮蓝或银染凝胶进行比对，切取后通过质谱分析进行蛋白质鉴定 [1]
。
- 来源：本方案中使用的生物素酰肼购自 Sigma [1]
。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C10H18N4O2S
分子量
258.34
精确质量
258.115
CAS号
66640-86-6
PubChem CID
83872
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.2±0.1 g/cm3
沸点
633.1±40.0 °C at 760 mmHg
熔点
245-247 °C
闪点
336.7±27.3 °C
蒸汽压
0.0±1.9 mmHg at 25°C
折射率
1.553
LogP
-1.24
tPSA
121.55
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
17
分子复杂度/Complexity
313
定义原子立体中心数目
3
SMILES
C1[C@H]2[C@@H]([C@@H](S1)CCCCC(=O)NN)NC(=O)N2
InChi Key
KOZWHQPRAOJMBN-ZKWXMUAHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H18N4O2S/c11-14-8(15)4-2-1-3-7-9-6(5-17-7)12-10(16)13-9/h6-7,9H,1-5,11H2,(H,14,15)(H2,12,13,16)/t6-,7-,9-/m0/s1
化学名
5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanehydrazide
别名
Biotin Hydrazide (+)-Biotin Hydrazide Hydrazide biotin Biotine hydrazide Biotin-hydrazide Biotin-Hz
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~6.6 mg/mL (~25.55 mM)
H2O : ~2 mg/mL (~7.74 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。
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配方 3 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (3.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

配方 4 中的溶解度: 2 mg/mL (7.74 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.8709 mL 19.3543 mL 38.7087 mL
5 mM 0.7742 mL 3.8709 mL 7.7417 mL
10 mM 0.3871 mL 1.9354 mL 3.8709 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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