Bisphenol A   中文名称: 双酚A

吸收、分布和排泄
本研究考察了低剂量膳食双酚A (BPA) 的分布情况。雌性大鼠口服 50 μg/kg (14)C-BPA 后，放射性物质分布于全身，尤其在子宫中含量较高。预先给予雌二醇或雌激素拮抗剂 ICI 182,780 可显著降低子宫中的放射性。通过气相色谱-质谱联用 (GC-MS) 分析，确定子宫中大部分 BPA 为苷元（具有受体活性）。随后，给予小鼠 0.5、5 或 50 μg/kg (14)C-BPA 后，小鼠子宫中的放射性高于其他非代谢组织。雌性小鼠分别接受1、7或28天剂量的50 μg/kg (14)C-BPA，并在末次给药后24小时进行测量，结果显示，重复给药后，子宫、肝脏和肾脏中的放射性显著升高。这些数据共同证明了BPA与雌激素受体在体内存在相互作用。它们还表明，重复低剂量给药后，生殖组织中BPA的含量升高。
人类广泛暴露于双酚A (BPA)——一种干扰发育过程的内分泌干扰物——引发了人们对胎儿暴露于BPA对人类健康风险的担忧。在人类中，胎盘-胎儿系统中BPA的浓度差异很大。然而，人类胎儿暴露于BPA的情况仍然不甚明了。本研究旨在利用非循环双胎盘灌注技术，表征双酚A（BPA）及其主要代谢物双酚A葡糖苷酸（BPA-G）在胎盘中的交换情况。脂溶性BPA在胎盘中表现出较高的双向通透性，强烈提示其在母胎和胎母两个方向上均通过被动扩散进行转运，由此计算得出胎儿和母体游离BPA浓度的比值约为1。相比之下，BPA-G的胎盘通透性有限，尤其是在母胎方向上。因此，胎儿暴露于双酚A结合物主要可归因于其排出双酚A-G的能力有限。
当以灌胃方式单次给予雄性CFE大鼠时，28%的¹⁴C标记的双酚A经尿液排出（主要以葡萄糖酰胺的形式），56%经粪便排出（20%为游离双酚A，20%为羟基化双酚A，其余为未鉴定的结合物）。8天后处死的动物体内未检测到碳标记残留物。
在两种实验温度（7℃和19℃）下，研究了放射性标记的¹⁴C双酚A在普通蛙（Rana temporaria）体内的毒代动力学。在96小时的实验中，蝌蚪在7℃下的生长速度非常缓慢，但在19℃下，蝌蚪的体重几乎增加了两倍。在所有测试的暴露浓度（0.2、1.5、10 和 100 μg/L）下，7 °C 时的条件吸收速率常数 (ku) 比 19 °C 时低 69% 至 82%，消除速率 (ke) 低 79% 至 90%。相反，7 °C 时的生物富集因子 (BCF) 高于 19 °C。19 °C 时个体双酚 A 的总累积量更高，这与 19 °C 时较高的 ku 值相符。在两种温度下，暴露浓度对 BCF 均无显著影响。本实验结果表明，较高的温度会增加蛙蝌蚪对化学物质的吸收量和总量，但并不一定会导致更高的 BCF。高温可能使生长速率的增加幅度大于吸收速率的增加幅度，从而导致蝌蚪组织中双酚 A 的净稀释。观察到的生物富集系数 (BCF) 差异也可能是由于温度引起的异速生长关系变化（表面积与体积比增加）和/或高温下发育更成熟的蝌蚪更有效地清除所致。
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代谢/代谢物
……本研究探讨了CD1小鼠肝微粒体和S9组分对双酚A [2,2-双(4-羟基苯基)丙烷] (BPA) 的代谢。利用高效液相色谱 (HPLC) 和质谱法分离并鉴定了9种代谢物。许多此类代谢物是首次在哺乳动物中被鉴定，包括异丙基羟基苯酚（由双酚A裂解产生）、双酚A谷胱甘肽结合物、谷胱甘肽基苯酚、谷胱甘肽基4-异丙基苯酚和双酚A二聚体。
……本研究采用反相高效液相色谱-荧光检测法，分析了30名健康韩国人（男性15人，年龄42.6±2.4岁；女性15人，年龄43.0±2.7岁）尿液样本中双酚A（BPA）的含量，这些样本分别经β-葡萄糖醛酸酶和/或硫酸酯酶处理或未处理。男性和女性体内总 BPA 浓度（包括游离 BPA 和尿液结合物）相似（分别为 2.82 +/- 0.73 和 2.76 +/- 0.54 ng/mL），但尿液中 BPA 结合物的水平存在性别差异。男性体内双酚A-葡萄糖醛酸苷水平（2.34 ± 0.85 ng/mL）显著高于女性（1.00 ± 0.34 ng/mL），而女性体内双酚A-硫酸盐水平（1.20 ± 0.32 ng/mL）则高于男性（0.49 ± 0.27 ng/mL）。
……本研究旨在确定在Fischer 344大鼠单次口服（po）、腹腔注射（ip）或皮下注射（sc）10或100 mg/kg剂量的¹⁴C标记双酚A（BPA）后，其药代动力学和代谢是否存在给药途径依赖性。结果表明，BPA的药代动力学存在显著的给药途径依赖性。与皮下或腹腔注射相比，口服给药后BPA的相对生物利用度和血浆放射性显著降低。口服给药后，血浆放射性的主要成分是双酚A（BPA）的单葡萄糖醛酸苷结合物（占血浆放射性的68-100%）。皮下或腹腔注射给药后，血浆中BPA的浓度达到峰值（Cmax），仅次于腹腔注射给药的雌性动物血浆中的BPA单葡萄糖醛酸苷。在腹腔注射或皮下注射给药的动物血浆中，还存在多达四种未鉴定的代谢物。其中一种仅在腹腔注射给药后发现，初步鉴定为BPA的单硫酸盐结合物。单葡萄糖醛酸苷结合物是尿液中的主要代谢物；未代谢的BPA是粪便中的主要排泄成分。……
既往研究表明，成年大鼠口服双酚A（BPA）后，血液中BPA的清除速度很快，其主要代谢物为BPA单葡萄糖醛酸苷（BPA-葡萄糖醛酸苷）。由于葡萄糖醛酸转移酶 (GT) 的发育随年龄而异，因此本研究在新生动物中考察了双酚A (BPA) 的药代动力学。(14)C-BPA 以 1 或 10 mg/kg 体重通过灌胃法给予出生后第 4、7、21 天 (pnd 4, pnd 7, pnd 21) 的大鼠，或给予 11 周龄成年大鼠（仅给予 10 mg/kg 剂量）。分别于给药后 0.25、0.75、1.5、3、6、12、18 和 24 小时采集血液（新生动物和成年动物）和选定组织（新生动物）。采用高效液相色谱法定量血浆中的 BPA 和 BPA-葡萄糖醛酸苷；采用液体闪烁计数法定量血浆和组织中的放射性。数据显示，所有三个年龄段的新生大鼠均能将双酚A代谢为双酚A-葡萄糖醛酸苷，但血浆代谢物的数量和浓度存在年龄依赖性，这与GT的个体发育相符。除给药后24小时外，新生大鼠血浆中双酚A-葡萄糖醛酸苷和双酚A的浓度均高于成年大鼠，提示新生大鼠肝脏排泄功能发育不成熟。……此外，还观察到新生大鼠双酚A的代谢和药代动力学存在剂量依赖性，在1 mg/kg剂量下，双酚A几乎完全代谢为双酚A-葡萄糖醛酸苷（血浆放射性的94-100%）。这与在10 mg/kg剂量下观察到多达13种不同的血浆代谢物形成鲜明对比。 ...
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双酚A已知的人体代谢产物包括(2S,3S,4S,5R)-3,4,5-三羟基-6-[4-[2-(4-羟基苯基)丙-2-基]苯氧基]氧杂环己烷-2-羧酸。
双酚A (BPA) 摄入后可迅速从胃肠道吸收，然后在肝脏中转化为多种代谢产物，主要是BPA葡萄糖醛酸苷。双酚A (BPA) 的代谢产物包括异丙基羟基苯酚（由BPA裂解产生）、双酚A谷胱甘肽结合物、谷胱甘肽苯酚、谷胱甘肽4-异丙基苯酚和BPA二聚体。单葡萄糖醛酸苷结合物是主要的尿代谢物；未代谢的BPA是粪便中排泄的主要成分（A287，A288）。

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生物半衰期
……对雄性和雌性食蟹猴单次口服或静脉注射（iv）100 μg/kg（环-(14)C(U)）放射性标记的双酚A（(14)C-BPA）后……静脉注射后的末端消除半衰期（t(1/2iv) = 13.5至14.7小时）长于口服后（t(1/2oral) = 9.63至9.80小时）。静脉注射后，总放射性的快相半衰期（t(1/2f)）为0.61至0.67小时。女性体内未代谢的 (14)C-BPA 的半衰期 (t_1/2f) (0.39 小时) 小于男性 (0.57 小时)。
……在给大鼠静脉注射 (0.1 mg/kg) 和口服 (10 mg/kg) 相对较低剂量的双酚 A 后，测定了其口服生物利用度。……口服给药后双酚 A 的表观末端消除半衰期 (21.3 ± 7.4 小时) 显著长于静脉注射给药后的半衰期。
……将双酚 A 静脉注射到小鼠、大鼠、兔和犬体内（剂量为 1-2 mg/kg）。在所有这些动物中，获得的血清浓度-时间曲线均能用双指数方程很好地描述，小鼠、大鼠、兔和犬的平均半衰期分别为 39.9 分钟、37.6 分钟、40.8 分钟和 43.7 分钟。 ……简单的异速缩放和不同的时间转换方法预测人类的半衰期（t_1/2）范围为43.6至196.2分钟。……研究了双酚A（BPA）在F344大鼠、食蟹猴和黑猩猩体内的毒代动力学。……口服10 mg/kg BPA后，BPA代谢物的C_max和AUC均按以下顺序排列：食蟹猴>黑猩猩>大鼠，且大鼠的末端消除半衰期（T_1/2）大于食蟹猴和黑猩猩，表明BPA在大鼠体内存在肠肝循环。

毒性概述
识别与用途：双酚A (BPA) 是一种固体。它用于制造环氧树脂和聚碳酸酯，用于食品包装。人体研究：聚氯乙烯手套引起的过敏性接触性皮炎的报道很少，仅有2例病例认为BPA是致敏物。一份临床报告描述了一组8名户外工作者对BPA的光过敏性接触性皮炎。尿液中的BPA可能与精液质量下降和精子DNA损伤增加有关。观察到环境暴露于BPA与胎儿畸形的发生之间存在相关性。母体结合的BPA也与非整倍体和整倍体流产风险增加有关。BPA是一种具有雌激素特性的内分泌干扰物，可对减数分裂纺锤体组装产生不利影响。数据表明，女性患者暴露于BPA可能会干扰体外受精 (IVF) 期间的卵母细胞质量。男性暴露于双酚A (BPA) 可能影响体外受精 (IVF) 期间的胚胎质量。研究发现，BPA 对人类细胞系具有细胞毒性，但无遗传毒性。动物研究：BPA 对兔子的眼睛造成严重损伤，但对兔子的皮肤刺激性可忽略不计。一项广泛的大鼠两代口服生殖毒性研究评估了 BPA 对生育力的影响。在 F1 和 F2 代幼鼠中未观察到毒性临床症状或对哺乳期体重增加的影响。在窝仔数、存活率、性别比例、肛门生殖器距离和反射发育方面，未观察到与治疗相关的变化。在一种自发性发生肿瘤的转基因小鼠模型中，BPA 显著加速了乳腺肿瘤的发生。在小鼠中，仅在妊娠期暴露于低剂量 BPA 会对大脑中的 mRNA 和社交行为产生即时和持久的跨代影响。产前暴露于双酚A（BPA）主要影响雄性大鼠，并消除了旷场实验中竖立行为的性别差异以及强迫游泳实验中的挣扎行为。在小鼠中，产前暴露于BPA会影响雌性垂体促性腺激素的发育。在有或无代谢活化的情况下，使用鼠伤寒沙门氏菌测试菌株（TA 98、TA 100和TA 102）进行的实验表明，BPA不具有致突变性。然而，大鼠体内暴露于BPA会导致多染性红细胞中微核频率显著增加、骨髓细胞中染色体结构畸变以及血液淋巴细胞中DNA损伤。啮齿动物暴露于BPA已被证实会诱发肥胖。此外，用BPA喂养雄性果蝇会显著抑制胰岛素样肽的表达。生态毒性研究：双酚A（BPA）对日本鹌鹑（Coturnix japonica）F1代胚胎的性腺表现出性别逆转效应。腹腔注射BPA后，虹鳟鱼体内卵黄蛋白原的诱导表达也被报道。日本青鳉（Oryzias latipes）在受精卵至孵化后60天的早期生命阶段，暴露于亚致死浓度为2.28、13.0、71.2、355和1820 μg/L的BPA中。观察其外部第二性征，发现1820 μg/L处理组中未发现雄性个体。此外，组织学检查显示，1820 μg/L组中32%的鱼具有由睾丸生殖细胞和卵母细胞组成的睾丸卵复合体。利用微阵列分析和定量基因PCR测定了双酚A（BPA）对拟南芥基因表达的影响。许多激素响应基因在BPA处理后表达发生改变。BPA通过可能涉及破坏生长素信号传导的机制干扰开花。
双酚是一种内分泌干扰物。低剂量的双酚A可以模拟人体自身的激素，可能对健康造成负面影响。因此，人们担心长期低剂量接触双酚A可能会对人类产生慢性毒性（L705）。

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毒性数据
LC（小鼠）> 1,700 mg/m3/2h; （吸入）
LD50：2230 mg/kg（口服，兔）（T249）

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相互作用
我们研究了小鼠在受孕前暴露于双酚A (BPA)（单独或与X射线联合）后，遗传改变是否可能通过精子传递。雄性小鼠暴露于BPA、X射线或两者联合8周，然后与未暴露的雌性小鼠交配。我们检查了暴露雄性小鼠后代的产前和产后发育情况。单独暴露于BPA或联合暴露均对产后发育产生轻微影响。与单独暴露于双酚A (BPA) 相比，联合暴露导致出生后死亡率高出两倍；而BPA暴露则导致F1代小鼠体重下降和精子质量降低。
本研究旨在探讨雄性小鼠单独暴露于双酚A (BPA) 或与X射线联合暴露2周后，其精子数量和质量以及体细胞和生殖细胞DNA链断裂诱导情况的影响。Pzh:SFIS雄性小鼠分别暴露于X射线（0.05和0.10 Gy）、BPA（5、10、20和40 mg/kg）或二者联合暴露（0.05 Gy + 5 mg/kg体重的BPA和0.10 Gy + 10 mg/kg体重的BPA）。单独使用X射线或BPA均会降低精子数量和质量。 X射线可诱导脾细胞DNA链断裂，而双酚A（BPA）可诱导淋巴细胞、脾脏、肾脏和肺脏细胞以及生殖细胞DNA链断裂。两种物质联合暴露后，精子数量和质量与单独暴露于任一物质后相似，但与对照组相比显著降低。与单独使用BPA相比，联合暴露于较低剂量和较高剂量后，体细胞和生殖细胞的DNA损伤水平均显著降低。结果证实了BPA的致突变性。X射线和BPA联合暴露可预防小鼠体细胞和生殖细胞的DNA损伤。
双酚A（BPA）用于制造环氧树脂、聚酯-苯乙烯树脂和聚碳酸酯树脂，这些树脂用于生产婴儿奶瓶、水瓶和可重复使用的容器、食品和饮料包装、牙科填充物和密封剂。本研究旨在探讨单独暴露于双酚A（BPA）以及BPA与X射线联合暴露8周（一个完整的精子发生周期）对成年和青春期雄性小鼠生殖器官和生殖细胞的影响。Pzh:Sfis雄性小鼠分别暴露于BPA（5、10和20 mg/kg）、X射线（0.05 Gy）或二者联合（0.05 Gy + 5 mg/kg体重BPA）。检测的参数包括：精子数量、精子活力、精子形态以及雄性配子中的DNA损伤。BPA和X射线单独暴露均会降低精子质量。与成年小鼠相比，BPA暴露显著降低了青春期雄性小鼠的精子数量，并在生精上皮中检测到退行性改变。这可能表明年轻雄性小鼠的生殖细胞对BPA的作用更为敏感。双酚A与X射线联合处理增强了单独使用双酚A对成年雄性生殖细胞的有害作用，而低剂量辐射有时对青春期小鼠表现出保护或叠加作用。
……本研究旨在探讨双酚A是否会诱导大鼠肝脏氧化应激，以及同时服用抗氧化剂维生素C是否能预防氧化应激。将大鼠分别口服给予双酚A（0.2、2.0和20 μg/kg体重/天）和双酚A+维生素C（0.2、2.0、20 μg + 40 mg/kg体重/天），连续30天。末次给药24小时后，用过量乙醚麻醉处死大鼠。动物体重和肝脏重量均未见显著变化。肝脏线粒体和微粒体组分中抗氧化酶（包括超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶）的活性降低。与相应的对照组相比，治疗组大鼠体内过氧化氢和脂质过氧化水平升高。作为肝损伤标志酶的丙氨酸转氨酶活性在治疗组大鼠中与相应的对照组相比无变化。双酚A与维生素C联合给药后，与相应的对照组相比，超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性以及过氧化氢和脂质过氧化的水平未发生变化。
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非人类毒性值
大鼠（雄性，F344）口服LD50：4100 mg/kg
大鼠（雌性，F344）口服LD50：3300 mg/kg
小鼠（雄性）口服LD50：5280 mg/kg
小鼠（雌性，B6C3F1）口服LD50：4100 mg/kg
有关双酚A的更多非人类毒性值（完整）数据（共9项），请访问HSDB记录。 页。

[1]. Bisphenol A and its analogues bisphenol S, bisphenol F and bisphenol AF induce oxidative stress and biomacromolecular damage in human granulosa KGN cells. Chemosphere. 2020 Apr 9;253:126707.

[2]. Bisphenol A: an endocrine disruptor with widespread exposure and multiple effects. J Steroid Biochem Mol Biol. 2011 Oct;127(1-2):27-34.

根据美国国家毒理学计划人类生殖风险评估中心的数据，双酚A (BPA) 可能导致发育毒性。根据一个由科学和健康专家组成的独立委员会的数据，它可能导致女性生殖毒性。
4,4'-异丙叉二苯酚呈白色至浅棕色片状或粉末状，略带药味，可沉入水中。（美国海岸警卫队，1999）
双酚A是一种双酚，其化学式为4,4'-亚甲基二苯酚，其中亚甲基氢被两个甲基取代。它是一种外源性雌激素、环境污染物、外源性物质和内分泌干扰物。
双酚A是一种含有两个羟苯基的二苯甲烷衍生物。双酚A (BPA) 是一种无色固体，用于合成商业塑料，包括聚碳酸酯和环氧树脂，这些塑料被广泛应用于各种消费品中。摄入双酚A (BPA) 可能具有雌激素样作用。接触BPA可能会增加患某些癌症的风险。
双酚A，通常缩写为BPA，是一种含有两个酚羟基的有机化合物。它是几种重要塑料和塑料添加剂的双功能结构单元。BPA年产量达200万至300万吨，是聚碳酸酯生产中的重要单体。由于BPA被用于可重复使用的聚碳酸酯食品容器，例如水桶、婴儿奶瓶和厨房用具，因此它可能成为食品污染物。
自20世纪30年代以来，人们就怀疑双酚A对人类有害。2008年，在一些国家政府发布报告质疑其安全性后，新闻媒体开始频繁报道有关在消费品中使用双酚A的担忧，一些零售商也将用BPA制成的婴儿奶瓶和其他儿童产品下架。
另见：异戊二烯单体（单体）；聚碳酸酯（注释已移至）……查看更多……

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作用机制
本研究评估了双酚A (BPA) 对人子宫内膜间质成纤维细胞 (ESF) 分化及雌激素代谢相关基因表达的影响。从8例子宫切除标本中分离出人ESF，进行培养，并用5-100 μmol/L的BPA（含或不含雌二醇或8-溴-cAMP）处理48小时。采用实时逆转录PCR分析mRNA表达。通过胰岛素样生长因子结合蛋白-1 (IGFBP1) 的表达和催乳素的分泌证实了8-溴-cAMP诱导的人ESF蜕膜化。短期暴露（48小时）降低了人ESF的增殖（P<0.04），但并非由于细胞凋亡所致。高剂量双酚A (BPA) 显著诱导IGFBP1 mRNA和蛋白表达，降低P450scc mRNA表达，并以剂量依赖的方式逆转8-溴环磷酸腺苷 (8-br-cAMP) 诱导的HSD17B2（雌二醇转化为雌酮）表达增加，同时下调HSD17B1（雌酮转化为雌二醇）表达（P = 0.03）。8-br-cAMP显著增强了这种作用（P = 0.028）。BPA对芳香化酶和PPARγ的表达无显著影响。雌激素受体拮抗剂ICI对BPA处理细胞的基因表达无影响，而高剂量BPA显著下调雌激素受体α（而非雌激素受体β）表达（P = 0.028）。BPA对人内分泌功能和基因表达具有内分泌干扰作用，但其潜在机制似乎不涉及雌激素介导的通路。

C₁₅H₁₆O₂

228.29

228.115

80-05-7

27100-33-0;25766-59-0;2444-90-8 (di-hydrochloride salt)

6623

White to off-white solid powder

1.1±0.1 g/cm3

400.8±25.0 °C at 760 mmHg

158-159 °C(lit.)

192.4±17.8 °C

0.0±1.0 mmHg at 25°C

1.599

3.43

40.46

2

2

2

17

209

0

IISBACLAFKSPIT-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C15H16O2/c1-15(2,11-3-7-13(16)8-4-11)12-5-9-14(17)10-6-12/h3-10,16-17H,1-2H3

4-[2-(4-hydroxyphenyl)propan-2-yl]phenol

Bisphenol A; Bisphenol A

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~438.04 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。