BMS-986122

Mu-opioid receptor (MOR) – binds to an allosteric site distinct from the orthosteric site. In β-arrestin recruitment assay, BMS-986122 had Kb = 5 μM and cooperativity factor α = 7 (with endomorphin-I). In [³⁵S]GTPγS binding in C6μ membranes, it enhanced DAMGO potency (EC50 shift) with similar parameters. No binding to delta-opioid receptor detected. [1]

BMS-986122 可促进内啡肽 1 刺激下表达 u-阿片受体的 U2OS-OPRM1 人骨肉瘤细胞中 β-arrestin 的募集（EC50=3 μM）。BMS-986122 可上调内啡肽 1 激活的表达人重组 u-阿片连接子的 CHO 细胞中福斯克林刺激的腺苷酸环化酶活性的抑制（EC50=8.9 μM）。在小鼠脑膜中，BMS-986122 可增加 DAMGO 介导的 [35S]GTPγS 结合，并且在一定程度上似乎是通过 u-阿片摄取对 DAMGO 结合的正向亲和力调节剂 [1]。在表达人μ-阿片受体的CHO细胞中，BMS-986122增强了内源性阿片类物质甲硫氨酸脑啡肽（Met-Enk）刺激G蛋白活性的能力，而其自身无活性，且其增强G蛋白活化募集的效果不如β-arrestin。BMS-986122增强了Met-Enk抑制导水管周围灰质（抗损伤作用的关键区域）中GABA释放的能力[2]。BMS-986122对δ-阿片受体具有类似的活性，并且对μ-阿片受体具有选择性。 BMS-986122 是一种 δ-阿片受体 (δ-OR) 和 κ-阿片受体 (κ-OR) 的安静变构调节剂 [3]。

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BMS-986122 (0.39–100 μM) 可使 U2OS-OPRM1 细胞中内啡肽 I 刺激的 β-arrestin 募集产生浓度依赖性的左移，在 PAM 模式下 EC50 = 3.0 μM (95% CI: 1.9–3.9 μM)，单独使用时无激动剂活性。[1]
BMS-986122 (1–100 μM) 可增强内啡肽 I (30 pM) 对 CHO-μ 细胞中福斯克林刺激的 cAMP 积累的抑制作用，EC50 = 8.9 μM (6.1–13.1 μM)；在高浓度下，该化合物也表现出较弱的激动剂活性（EC50 = 41 μM，Emax = 60%）。[1]
BMS-986122 (10 μM) 增强了 DAMGO 刺激的 C6μ 膜上 [³⁵S]GTPγS 的结合，使 DAMGO 的 EC50 从 222 nM 降低至 32 nM（降低 7 倍），而最大刺激强度没有变化。它还使吗啡的效力降低了 3 倍（EC50 从 110 nM 降低至 38 nM），并使吗啡的 Emax 从 DAMGO 反应的 42% 提高至 74%。 [1]
BMS-986122 (10 μM) 可增加 DAMGO 在 C6μ 膜中与 [³H]二丙诺啡竞争结合的亲和力 (Ki)：在低亲和力缓冲液（含 Na⁺/GTPγS）中，DAMGO 的 Ki 值从 340 nM 降至 56 nM（6 倍）；在高亲和力缓冲液中，DAMGO 的 Ki 值从 2.21 nM 降至 0.51 nM（4 倍）。它不影响 [³H]二丙诺啡的 Kd 值。[1]
BMS-986122 (10 μM) 可增强 Met-Enk 刺激的 [³⁵S]GTPγS 在小鼠脑匀浆中的结合：在 PAG 匀浆中，Met-Enk 的 EC50 值从 148 nM 降至 14.5 nM（10 倍）。在全脑中，它使DAMGO的效力提高了6.6倍（EC50从484 nM降至73.1 nM），吗啡的效力提高了4.8倍（从2592 nM降至543 nM），美沙酮的效力提高了8倍（从447 nM降至55 nM）。单独使用时无激动剂活性。 [2] 在表达 hMOR 的 CHO 细胞中，BMS-986122 (10 μM) 使 Met-Enk 刺激的 [³⁵S]GTPγS 结合增强了 7.8 倍（EC50 从 18.2 nM 降至 2.3 nM），而 β-arrestin 募集仅增强了 1.8 倍（EC50 从 11.4 nM 降至 6.2 nM），表明其对 G 蛋白的偏向性较弱（偏向因子为 4.3，与单独使用 Met-Enk 相比）。[2]
BMS-986122 (1–100 μM) 增强了 Met-Enk 对大鼠 PAG 切片中 GABA 释放的抑制作用，使 Met-Enk 的效力从 612 nM 降至 97.7 nM（6.3 倍），但单独使用对 mIPSC 频率无影响。 [2]

在C57BL/6小鼠的热板试验中，单独使用BMS-986122（脑室内注射0.05–1.5 nmol）可产生剂量和时间依赖性的镇痛作用，持续时间<15分钟，该镇痛作用可被不可逆的MOR拮抗剂β-FNA（5 mg/kg，腹腔注射，预处理24小时）阻断。[2]
BMS-986122（脑室内注射0.05–0.15 nmol）可增强亚有效剂量美沙酮（3 μg，脑室内注射）或全身性美沙酮（5.6 mg/kg，腹腔注射）和吗啡（32 mg/kg，腹腔注射）在热板试验中的镇痛作用，产生显著且持久的作用（长达60分钟）。 [2]
BMS-986122（0.15 nmol 脑室内注射）增强了脑啡肽酶抑制剂 RB-101（50 μg 脑室内注射）在热板试验中的镇痛作用，并且以纳洛酮可逆的方式增强了游泳应激（15 分钟游泳）诱导的镇痛作用。[2]
在 129S1/SvlmJ 小鼠中，全身注射 BMS-986122（3.2–10 mg/kg 腹腔注射）在温水缩尾试验（55°C）中产生镇痛作用，10 mg/kg 剂量下作用最强，持续 60 分钟，该作用可被纳洛酮（10 mg/kg 腹腔注射）阻断。重复操作/注射后，该作用消失，提示存在耐受性和内源性阿片类物质释放减少。 [2]
BMS-986122（10 mg/kg，腹腔注射）可逆转角叉菜胶诱导的炎症性疼痛（双侧和单侧）以及弗氏完全佐剂（CFA）诱导的持续性炎症（超过3天）引起的机械性痛觉过敏，该作用通过von Frey阈值测定；纳洛酮可逆转该作用。[2]
BMS-986122（10 mg/kg，腹腔注射）可恢复醋酸诱导的小鼠筑巢行为抑制，而吗啡（10 mg/kg）则无此作用。[2]

[³⁵S]GTPγS 结合实验：将膜（取自小鼠脑、导水管周围灰质或 CHO-hMOR 细胞）与 GDP (10–30 μM)、[³⁵S]GTPγS (0.1–0.5 nM) 以及不同浓度的激动剂（含或不含 10 μM BMS-986122）在 25–30°C 下孵育 5–15 分钟。通过过滤收集结合的放射性物质并进行计数。数据拟合逻辑方程以获得 EC50 和 Emax 值。 [1][2]
受体结合实验：使用C6μ膜（5–10 μg蛋白）进行[³H]二丙诺啡饱和结合和竞争结合实验。将膜与0–4 nM [³H]二丙诺啡或0.2–0.3 nM [³H]二丙诺啡加递增浓度的DAMGO（添加或不添加10 μM BMS-986122）在含有100 mM NaCl、10 μM GTPγS、5 mM MgCl₂和50 mM Tris-HCl (pH 7.4)的缓冲液中于室温孵育60–80分钟。非特异性结合通过10 μM纳洛酮进行检测。计数滤膜。Kd和Ki通过非线性回归计算。[1]

β-arrestin募集分析（PathHunter）：将表达PK标签OPRM1和β-arrestin 2融合蛋白的U2OS细胞与化合物和检测试剂孵育；测量发光值。BMS-986122分别以激动剂模式（单独使用）和PAM模式（与低EC10内啡肽-I或Met-Enk联用）进行测试。EC50值由浓度-反应曲线得出。[1][2]
cAMP积累分析（HTRF）：将CHO-μ细胞与福斯克林（1 μM）和测试化合物孵育；通过均相时间分辨荧光法测量cAMP水平。BMS-986122分别测试了其对低剂量内啡肽-I（30 pM）的增强作用以及其自身的激动剂活性。[1]

对于C57BL/6小鼠的脑室内注射：将BMS-986122溶解于1% DMSO、1% alkamuls和98%无菌水中；以0.05–1.5 nmol（23–670 ng）的剂量，用5 μL溶液进行脑室内注射（icv）。美沙酮（icv）的溶解方法类似。RB-101（icv）溶解于20% (2-羟丙基)-β-环糊精溶液中。对于129S1/SvlmJ小鼠的全身（腹腔）注射：将BMS-986122溶解于60%无菌水、20%乙醇和20%乙氧基化蓖麻油溶液中；以3.2–10 mg/kg（最大溶解度）的剂量，用10 mL/kg的体积进行注射。吗啡、美沙酮、纳洛酮和β-FNA溶于生理盐水或水中，并按指示进行腹腔注射或皮下注射。注射后不同时间点进行行为学测试（52℃热板试验、55℃缩尾试验、von Frey行为测试、筑巢行为测试、条件性位置偏好试验、粪便颗粒计数、呼吸监测），并设置截止时间以防止组织损伤。所有操作均遵循IACUC指南。[2]

在129S1/SvlmJ小鼠腹腔注射10 mg/kg BMS-986122后，血浆和脑组织中的药物浓度如下：注射后1小时，平均血浆浓度为397 ± 100 ng/g (n=9)，平均脑组织浓度为127 ± 16 ng/mL (n=15)，分别相当于约900 nM和约280 nM，血浆与脑组织浓度比为3:1。[2]
在300 nM（脑组织相关浓度）下，BMS-986122使hMOR-CHO细胞膜上[³⁵S]GTPγS结合的Met-Enk效力提高了3.9倍（EC50从10.2 nM降至2.6 nM）。[2]

在129S1/SvlmJ小鼠中，BMS-986122（10 mg/kg，腹腔注射）未引起便秘（粪便颗粒计数与溶剂对照组相似），而吗啡（10 mg/kg）则显著减少了粪便排出量。[2] 在为期5天的条件反射训练中，BMS-986122（10 mg/kg，腹腔注射）未在129S1/SvlmJ小鼠中诱导条件性位置偏好（CPP），而吗啡（10 mg/kg）则表现出显著的偏好。[2] BMS-986122（10 mg/kg，腹腔注射）引起轻微但显著的呼吸抑制（通过呼吸频率测量），该抑制作用可被纳洛酮逆转，但其程度显著低于吗啡（10 mg/kg）引起的抑制作用。较低剂量3.2 mg/kg则无此作用。[2]

[1]. Discovery of positive allosteric modulators and silent allosteric modulators of the μ-opioid receptor. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013;110(26):10830-10835.

[2]. Positive allosteric modulation of the mu-opioid receptor produces analgesia with reduced side effects. Proc Natl Acad Sci U S A. 2021;118(16):e2000017118.

[3]. Livingston KE, Alt A, Canals M, Traynor JR. Pharmacologic Evidence for a Putative Conserved Allosteric Site on Opioid Receptors. Mol Pharmacol. 2018;93(2):157-167.

BMS-986122是一种μ-阿片受体的正向变构调节剂，通过β-arrestin募集实验的高通量筛选发现。它对μ-阿片受体（MOR）具有选择性，而非δ-阿片受体。它不与正构配体竞争（不与正构位点结合）。它能增强正构激动剂的亲和力和效力，包括内源性肽（如Met-Enk、内啡肽-1）和外源性阿片类药物（如DAMGO、吗啡、美沙酮）。它表现出探针依赖性，对不同激动剂的增强程度各不相同。在体内，它通过增强疼痛/应激期间内源性阿片肽的释放来产生镇痛作用，并表现出较低的典型阿片类药物副作用。沉默变构调节剂（SAMs）BMS-986123 和 BMS-986124 可以阻断其 PAM 活性，证实了其变构位点特异性。该化合物已在急性疼痛和炎症性疼痛的小鼠模型中进行了研究，并显示出作为一种更安全的镇痛药的潜力。[1][2]

C16H15BRCLNO3S2

448.782200098038

446.936

313669-88-4

4644453

White to off-white solid powder

1.6±0.1 g/cm3

567.2±60.0 °C at 760 mmHg

296.8±32.9 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.648

5.14

80.3

0

5

4

24

522

0

S1CCN(S(C2=CC=C(Cl)C=C2)(=O)=O)C1C1=CC=C(OC)C(Br)=C1

PNGJPVDGZNPZHY-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H15BrClNO3S2/c1-22-15-7-2-11(10-14(15)17)16-19(8-9-23-16)24(20,21)13-5-3-12(18)4-6-13/h2-7,10,16H,8-9H2,1H3

2-(3-bromo-4-methoxyphenyl)-3-(4-chlorophenyl)sulfonyl-1,3-thiazolidine

BMS-986122 BMS 986122 BMS986122.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~222.83 mM)

配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.57 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.57 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。