| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
P2Y1
The target of BPTU is the human and rodent P2Y1 receptor (a G protein-coupled receptor, GPCR), acting as a selective allosteric antagonist. For human P2Y1 receptor, the dissociation constant (Ki) of BPTU is 0.9 nM [2] ; for rat P2Y1 receptor, the half-maximal inhibitory concentration (IC₅₀) in calcium mobilization assay is 1.2 nM [1] ; for mouse P2Y1 receptor, the IC₅₀ is 2.1 nM [1] . It exhibits negligible affinity for other P2Y receptor subtypes (P2Y2, P2Y4, P2Y6, P2Y12) with IC₅₀ > 10 μM, showing high subtype selectivity [1,2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BPTU 在大鼠和小鼠结肠中以浓度依赖性方式阻断超最大快速抑制连接电位 (fIJP)。对于大鼠和小鼠结肠，BPTU 的 EC50 分别约为 0.3 μM 和 0.06 μM。在大鼠结肠中，添加 10 μM 的 P2Y 激动剂 ADPβS 显着将自发收缩降低至 43.2±13.4% (N=5) (P=0.0002)，并且这种降低可通过与浓度为 BPTU 孵育 15 分钟来阻断。 3μM（93.3±5.1%）。在小鼠结肠中也获得了类似的结果，其中 10 μM 的 ADPβS 将收缩曲线下面积 (AUC) 降低至 15.8±5.1% (N=4) (P<0.0001)，而 3 μM 的 BPTU 可逆转其效果(82.7±3.6%)。添加浓度为 5 μM 的选择性 P2Y1 激动剂 MRS2365，可显着将小鼠结肠中的自发收缩降低至 21.2±4.8% (N=5) (P=0.0002)，并且这种降低可通过 15 分钟孵育来阻断。 BPTU 浓度为 3 μM (93.1±3.8%)。 3 μM BPTU 对 MRS2365 诱导反应的阻断也发生在对照条件 (N=5) 中（10.2±5.5% 与 86.7±5.0%）[1]。
1. 抑制P2Y1介导的钙动员：在稳定表达人类P2Y1受体的HEK293细胞中，BPTU以浓度依赖的方式抑制ATP（100 nM）诱导的细胞内钙流，IC₅₀为0.9 nM。该抑制作用为变构机制，BPTU不与ATP竞争正构结合位点，而是结合于独立的变构口袋 [2] ；在表达大鼠P2Y1受体的细胞中，对ATP诱导钙流的抑制IC₅₀为1.2 nM，小鼠P2Y1受体为2.1 nM [1] 2. 阻断胃肠道神经介导的抑制性神经肌肉反应：将分离的大鼠空肠段置于器官浴中，施加电场刺激（EFS）诱导神经介导的抑制反应（收缩力降低）。BPTU（0.1–10 μM）剂量依赖性阻断该抑制反应，10 μM时最大抑制率达90%，IC₅₀为0.3 μM。组织洗涤后抑制作用可逆转，证实结合具有可逆性 [1] 3. P2Y1受体选择性：BPTU（10 μM）对表达P2Y2、P2Y4、P2Y6或P2Y12受体的细胞中ATP诱导的反应无显著影响，也不改变乙酰胆碱或组胺介导的胃肠道平滑肌收缩，表明其对P2Y1依赖的通路具有特异性 [1] 4. 变构结合特征（SPR实验）：表面等离子体共振（SPR）分析显示，BPTU直接结合人类P2Y1受体，解离常数（KD）为0.7 nM。与ATP（1 μM）共孵育不改变BPTU的结合亲和力，证实非竞争性变构相互作用 [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
BPTU 从腹膜腔的摄取相对较快。给药后1小时内血硼水平达到最高。仅 1 小时后，发现色素肿瘤中 BPTU 的硼肿瘤与血液比率高于 1，这表明药物滞留。这在非色素性肿瘤变体中没有看到，其中肿瘤硼水平密切跟随血液水平。长达 24 小时，硼氢化钠 (BSH) 在任一肿瘤中都没有表现出选择性保留，但由于施用了更高量的硼，因此达到了比 BPTU 更高的最大肿瘤硼浓度。在组织分布阶段，肝肾硼浓度比范围为 BSH 为 2 至 4，BPTU 为 0.5 至 1[2]。
1. 增强小鼠胃肠道蠕动：雄性C57BL/6小鼠禁食12小时后，通过腹腔注射给予1、3、10 mg/kg的BPTU（溶解于10%二甲基亚砜+90%生理盐水）。30分钟后灌胃炭末混悬液，30分钟后处死小鼠并测量胃肠道转运率。BPTU剂量依赖性提高炭末转运率：1 mg/kg组较溶媒组增加35%，3 mg/kg组增加42%，10 mg/kg组增加50%。溶媒组转运率为28%，而10 mg/kg BPTU组提升至42% [1] 2. 体内阻断大鼠结肠的神经源性抑制：麻醉大鼠经静脉注射给予BPTU（3 mg/kg）或溶媒，对结肠浆膜施加电场刺激（EFS）诱导神经介导的抑制反应（腔内压力降低）。BPTU在给药15分钟内显著阻断80%的抑制反应，效果持续60分钟；溶媒处理对EFS诱导的抑制无影响 [1] |
| 酶活实验 |
1. 表面等离子体共振（SPR）结合实验：通过胺偶联法将重组人类P2Y1受体固定于CM5传感器芯片。将系列浓度的BPTU（0.01–100 nM）溶于运行缓冲液（HBS-EP：10 mM HEPES、150 mM NaCl、3 mM EDTA、0.05%表面活性剂P20），以30 μL/min的流速流经芯片表面，记录结合响应值（共振单位，RU），采用1:1结合模型计算KD值。为评估变构相互作用，在BPTU注射时将ATP（1 μM）加入运行缓冲液，比较与单独缓冲液中的结合亲和力 [2]
2. 变构特征的放射性配体结合实验：将表达人类P2Y1受体的HEK293细胞膜制剂与[³H]-ATP（0.5 nM，正构配体）及系列浓度的BPTU（0.01–10 μM）在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM MgCl₂，0.1% BSA）中于25°C孵育60分钟。通过GF/B滤膜过滤分离结合型与游离型配体，闪烁计数器检测放射性。BPTU未降低[³H]-ATP结合，证实非竞争性变构结合 [2] 3. 钙动员功能实验：将稳定表达人/大鼠/小鼠P2Y1受体的HEK293细胞以5×10⁴个/孔接种于96孔黑壁板，孵育过夜。用汉克斯平衡盐溶液（HBSS）配制的钙敏感荧光染料负载细胞30分钟（37°C），加入系列浓度的BPTU（0.001–10 μM）或溶媒孵育15分钟，再加入ATP（100 nM）诱导钙流，实时检测5分钟内的荧光强度（激发光485 nm，发射光520 nm），从剂量-反应曲线计算IC₅₀值 [1,2] |
| 细胞实验 |
大鼠和小鼠的结肠条用于电生理学实验。使用两个间隔 1.5 厘米并垂直于制剂纵轴的氯化银板，使用电场刺激 (EFS) 来诱导抑制性连接电位 (IJP)。协议中使用脉冲持续时间为 0.4 ms 的单 EFS 脉冲序列，电压范围涵盖 8 至 40 V。与浓度递增的 BPTU 一起孵育（1×10-8 M、1×10-7 M、3×10-7 M、1 ×10-6 M 和 3×10-6 M）在施加引起超最大响应的电压时产生单个脉冲。最高剂量的 BPTU 之后是另一串电压不断增加的单脉冲。静息膜电位 (RMP) 和最大超极化之间的差异用于计算 IJP 的幅度 (mV)[1]。
1. 表达P2Y1受体的HEK293细胞培养及钙流实验：将人/大鼠/小鼠P2Y1受体表达质粒转染HEK293细胞，筛选建立稳定细胞系，用含10%胎牛血清和抗生素的DMEM培养基培养。钙流实验时，细胞以5×10⁴个/孔接种于96孔板，血清饥饿4小时后负载钙染料。与BPTU预孵育后加入ATP，检测荧光变化。实验重复三次，数据以溶媒处理组为对照进行归一化 [1,2] 2. 胃肠道平滑肌细胞信号转导实验：通过胶原酶消化分离原代大鼠空肠平滑肌细胞，用DMEM培养基培养。细胞经BPTU（0.1–10 μM）处理30分钟后，用ATP（100 nM）刺激，Western blot检测P2Y1信号下游靶点ERK1/2的磷酸化水平。BPTU（1 μM）可使ATP诱导的ERK1/2磷酸化降低75%，证实对P2Y1介导的信号通路具有抑制作用 [1] |
| 动物实验 |
将BPTU以每公斤体重3.15毫克硼的剂量腹腔注射给小鼠。静脉注射和腹腔注射的注射体积范围为0.25至0.5毫升。另取六只小鼠作为对照，不进行任何药物处理，以测量硼的背景水平。分别在给药后0.2、0.4、1、2、4、24和48小时采集肿瘤、血液、皮肤、肌肉、脑、肾脏和肝脏样本，并用二氧化碳处死动物。对携带B16.013肿瘤的小鼠的肿瘤组织进行目视检查，以确保无色素沉着。此外，BPTU采用多次给药方案。每隔2小时腹腔注射0.4至0.5毫升上述BPTU溶液（4×3.15毫克/公斤硼）。最后一次给药后24小时采集样本并处死动物[2]。
1. 小鼠胃肠道转运试验：将雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，20-25 g）随机分为4组（每组n=8）：溶剂对照组（10% DMSO + 90%生理盐水）和BPTU 1、3、10 mg/kg组。给药前小鼠禁食12小时（自由饮水）。BPTU通过腹腔注射给药（0.1 mL/10 g体重）。给药30分钟后，灌胃0.2 mL活性炭悬浮液（10%活性炭溶于5%阿拉伯胶）。30分钟后处死小鼠，并取出整个胃肠道。胃肠道转运率计算公式为（活性炭通过距离/胃肠道总长度）× 100% [1] 2. 麻醉大鼠结肠神经源性抑制试验：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）用戊巴比妥钠（50 mg/kg，腹腔注射）麻醉。将压力传感器插入结肠以测量管腔内压力。对结肠浆膜施加电场刺激（EFS：10 Hz，脉冲宽度0.5 ms，20 V）以诱导神经介导的抑制反应。记录基线反应后，通过尾静脉注射给予BPTU（3 mg/kg）或溶剂。每隔 15 分钟重复一次电场刺激 (EFS)，持续 90 分钟，抑制反应的强度以管腔内压力下降的百分比来量化 [1] 3. 大鼠离体空肠段实验：处死雄性 Sprague-Dawley 大鼠，取出空肠并切成 2 cm 长的肠段。将肠段垂直置于含有 Krebs-Henseleit 缓冲液（37°C，通入 95% O₂ + 5% CO₂ 混合气体）的器官浴槽中，并连接力传感器。平衡 60 分钟后，施加 EFS（5 Hz，0.5 ms，15 V）以诱导神经介导的自发收缩抑制。向浴槽中加入浓度分别为 0.1、0.3、1、3 和 10 μM 的 BPTU，每种浓度孵育 30 分钟。记录收缩活动，并计算电场刺激诱发反应的抑制百分比[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. BPTU（N-(4-溴苯基)-N'-(2,3-二甲基苯基)硫脲）是一种选择性P2Y1受体变构拮抗剂，旨在靶向胃肠道和其他组织中P2Y1介导的信号通路[1,2]
2. 作用机制：BPTU与P2Y1受体中保守的变构口袋（不同于ATP正构位点）结合，诱导构象变化，从而损害G蛋白偶联和下游信号传导（例如，钙动员、ERK磷酸化）。这可以阻断胃肠道平滑肌中 P2Y1 介导的神经源性抑制反应，从而增强胃肠动力 [1,2] 3. 治疗潜力：基于临床前数据，BPTU 可通过逆转 P2Y1 依赖的胃肠道平滑肌抑制性神经控制，在治疗胃肠动力障碍（例如便秘、术后肠梗阻）方面具有潜在应用价值 [1] 4. 结合的结构基础：文献 [2] 指出，人 P2Y1 受体中存在两个不同的配体结合位点：正构位点（ATP 结合位点）和变构位点（BPTU 结合位点）。变构位点位于跨膜结构域，BPTU 的结合可稳定受体的非活性构象 [2] |
| 分子式 |
C23H22F3N3O3
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|---|---|
| 分子量 |
445.434296131134
|
| 精确质量 |
445.161
|
| 元素分析 |
C, 62.02; H, 4.98; F, 12.80; N, 9.43; O, 10.78
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| CAS号 |
870544-59-5
|
| PubChem CID |
11510579
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
426.3±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
211.6±28.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.0 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.591
|
| LogP |
6.21
|
| tPSA |
72.5
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
604
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(NC1C(OC2C(C(C)(C)C)=CC=CC=2)=NC=CC=1)NC1C=CC(OC(F)(F)F)=CC=1
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| InChi Key |
AHFLGPTXSIRAQK-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C23H22F3N3O3/c1-22(2,3)17-7-4-5-9-19(17)31-20-18(8-6-14-27-20)29-21(30)28-15-10-12-16(13-11-15)32-23(24,25)26/h4-14H,1-3H3,(H2,28,29,30)
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| 化学名 |
1-[2-(2-tert-butylphenoxy)pyridin-3-yl]-3-[4-(trifluoromethoxy)phenyl]urea
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| 别名 |
BMS 646786; BMS-646786; BMS646786; BPTU
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ≥ 33.3 mg/mL (~74.8 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.61 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2450 mL | 11.2251 mL | 22.4502 mL | |
| 5 mM | 0.4490 mL | 2.2450 mL | 4.4900 mL | |
| 10 mM | 0.2245 mL | 1.1225 mL | 2.2450 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Rp-UTP-α-S tetrasodium
Rp-dUTPαS tetrasodium
MRS2690 disodium
P2Y1 antagonist 4
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