| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
EfpA (Mtb efflux pump). BRD-8000.3 specifically inhibits EfpA, an essential major facilitator superfamily (MFS) transporter in Mycobacterium tuberculosis that functions as a lipid flippase, playing a key role in cell envelope biogenesis and drug tolerance. The compound is an uncompetitive inhibitor, meaning it binds to the EfpA-substrate complex rather than the free enzyme. This inhibition disrupts lipid transport and efflux activity, leading to bacterial cell death.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BRD-8000.3 是一种窄谱杀菌抗分枝杆菌药物，具有良好的野生型活性，可特异性抑制 EfpA [1]。
在无细胞生化分析中，BRD-8000.3 可直接抑制 EfpA 外排泵。结合实验采用纯化的 EfpA 蛋白，通常将其重组到脂质体系统中。转运活性通过包裹荧光底物（如 NBD-磷脂酰胆碱或 pH 敏感染料）来测定，并监测化合物阻断底物转运的能力。动力学分析证实了非竞争性抑制，结果表明该抑制剂仅与酶-底物复合物结合，导致 Km 和 Vmax 均降低。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
BRD-8000.3 对复制型结核分枝杆菌具有杀菌作用，最低抑菌浓度 (MIC) 为 2 ug/mL。它具有窄谱抗菌活性，对多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均无活性，这与 EfpA 抑制的特异性相符。该化合物对药物敏感和耐药的结核分枝杆菌菌株均有效，使其成为治疗持续性感染的有效工具。此外，它与一线抗结核药物联合使用可增强其疗效。
|
| 酶活实验 |
为了确认与 EfpA 的结合并评估非竞争性抑制，可以使用表面等离子共振 (SPR) 或等温滴定量热法 (ITC)。将纯化的 EfpA 蛋白固定在芯片或细胞中。注入浓度递增的 BRD-8000.3 (0.1-100 uM) 以测量结合亲和力。对于非竞争性动力学，在固定浓度的抑制剂（例如 2 uM）和不同浓度的已知底物（例如荧光脂质）存在下测量 EfpA 的活性。所得的 Lineweaver-Burk 图将显示平行线，这是非竞争性抑制的特征。Ki 值由截距计算得出。
|
| 细胞实验 |
采用微量肉汤稀释法在96孔板中测定最小抑菌浓度（MIC）。结核分枝杆菌（例如H37Rv菌株）培养于添加了OADC增菌剂和Tween 80的Middlebrook 7H9肉汤中。BRD-8000.3的浓度范围为0.0625-32 ug/mL，采用2倍系列稀释法进行测试。将菌悬液加入最终接种量约为5×10⁵ CFU/mL的培养基中。将培养板置于37℃培养7-14天。MIC定义为抑制可见细菌生长的最低化合物浓度。对于时间-杀菌曲线，用2-4倍MIC处理细菌，并在不同时间点取样涂布于琼脂平板上计数菌落形成单位（CFU），以确认其杀菌活性。
|
| 动物实验 |
BRD-8000.3 的体内疗效可在慢性结核病感染小鼠模型中进行评估。小鼠（例如 BALB/c 小鼠）经气溶胶途径感染结核分枝杆菌。感染建立后（例如 4 周），小鼠每日接受 BRD-8000.3 治疗，剂量范围为 10-100 mg/kg，可通过灌胃或腹腔注射给药，持续 4-8 周。主要终点是肺和脾脏中的细菌载量（菌落形成单位计数），通过匀浆化器官并在琼脂平板上进行系列稀释涂布法测定。对肺组织进行组织病理学分析，以评估炎症和组织损伤。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
BRD-8000.3 的正式药代动力学研究尚未广泛发表。该化合物的分子量为 401.30，预测 LogP 值约为 4-5，在 DMSO 中的溶解度为 50 mg/mL (124.6 mM)。用于体内给药时，通常将其配制成 DMSO:PEG300:Tween-80:生理盐水溶剂。根据其化学结构，预计该化合物具有中等的口服生物利用度，并能分布到包括肺在内的组织中，而肺是结核分枝杆菌感染的主要部位。该化合物具有足够的药代动力学特征，可在小鼠模型中达到治疗浓度。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
BRD-8000.3 的临床前毒理学数据有限。在小鼠治疗相关剂量（例如 10-50 mg/kg）的疗效研究中，该化合物通常耐受性良好，未报告明显的体重减轻或急性毒性迹象。由于其对结核分枝杆菌 (Mtb) 的活性谱较窄，因此对宿主微生物群的脱靶效应可能很小。然而，尚未发表正式的重复给药毒性研究。作为一种实验性化学品，应采取适当的安全预防措施进行操作，包括使用通风橱和个人防护装备 (PPE)，以避免吸入或皮肤接触。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BRD-8000.3 的化学名称为 (1S,3S)-N-[6-溴-5-(嘧啶-2-基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基-3-(2-甲基丙-1-烯-1-基)环丙烷-1-甲酰胺。它是一种结核分枝杆菌 (Mtb) 外排泵 EfpA 的特异性抑制剂，也是一种窄谱杀菌剂。该化合物用于结核病研究，尤其是在解决耐药性问题方面。在存在该抑制剂的情况下，已解析出 EfpA 蛋白在 2.9 埃和 3.4 埃分辨率下的结构，结果表明 EfpA 形成反平行二聚体。BRD-8000.3 未获准用于人体，仅供实验室研究使用。
|
| 分子式 |
C19H21BRN4O
|
|---|---|
| 分子量 |
401.30
|
| 精确质量 |
400.089
|
| CAS号 |
2365504-95-4
|
| PubChem CID |
162641020
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4
|
| tPSA |
67.8
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
526
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
C/C(/C)=C/[C@@H]1C(C)(C)[C@H]1C(=O)NC1N=C(Br)C(C2=NC=CC=N2)=CC=1
|
| InChi Key |
XIITZGMKUBIQRI-DZGCQCFKSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H21BrN4O/c1-11(2)10-13-15(19(13,3)4)18(25)24-14-7-6-12(16(20)23-14)17-21-8-5-9-22-17/h5-10,13,15H,1-4H3,(H,23,24,25)/t13-,15+/m0/s1
|
| 化学名 |
(1S,3S)-N-(6-bromo-5-pyrimidin-2-ylpyridin-2-yl)-2,2-dimethyl-3-(2-methylprop-1-enyl)cyclopropane-1-carboxamide
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~124.60 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4919 mL | 12.4595 mL | 24.9190 mL | |
| 5 mM | 0.4984 mL | 2.4919 mL | 4.9838 mL | |
| 10 mM | 0.2492 mL | 1.2460 mL | 2.4919 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
