| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The primary molecular target of BRITE-338733 is RecA, a highly conserved DNA-dependent ATPase found in bacteria. RecA is a multifunctional protein that plays a central role in bacterial DNA repair, homologous recombination, and the SOS response to DNA damage. When DNA damage occurs, RecA binds to single-stranded DNA (ssDNA) and forms a nucleoprotein filament that catalyzes the exchange of DNA strands (homologous recombination) and activates the SOS response by promoting the autocatalytic cleavage of the LexA repressor. The SOS response upregulates the expression of DNA repair genes, allowing bacteria to survive DNA damage. By inhibiting RecA ATPase activity, BRITE-338733 prevents the formation of the RecA-ssDNA filament, blocks homologous recombination, and inhibits the SOS response. This makes bacteria more sensitive to DNA-damaging agents and antibiotics, and prevents the development of antibiotic resistance. The compound's selectivity for bacterial RecA over eukaryotic RecA homologs is an important parameter for its therapeutic potential.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BRITE-338733 的体外活性特征在于其对 RecA ATPase 活性的抑制作用。在利用纯化 RecA 蛋白进行的生化分析中，BRITE-338733 以 4.7 μM 的 IC50 值抑制 RecA 的 ATPase 活性。该化合物的活性可通过在单链 DNA (ssDNA) 存在下测定 ATP 水解为 ADP 的程度来评估，评估方法包括偶联酶法或比色磷酸盐检测法。在基于细胞的实验中，BRITE-338733 可抑制细菌的 SOS 反应，这可通过报告基因检测或 qRT-PCR 检测 SOS 诱导基因（例如 sulA、umuD、recA）的表达来评估。此外，该化合物还能增强多种细菌菌株（包括耐药菌株）中 DNA 损伤剂（例如喹诺酮类药物、丝裂霉素 C、紫外线辐射）的抗菌活性。通常通过测定最小抑菌浓度（MIC）并结合亚抑制浓度的抗生素来评估化合物的抗菌活性。此外，还会评估化合物对细菌生长、DNA修复和突变频率的影响。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
BRITE-338733 的体内活性已在细菌感染动物模型中得到证实。在由耐药菌引起的小鼠尿路感染或脓毒症模型中，口服或腹腔注射 10-50 mg/kg 剂量的 BRITE-338733 可增强抗生素的疗效并降低细菌载量。该化合物的体内疗效取决于其药代动力学特性，包括口服生物利用度、组织分布和代谢稳定性。该化合物到达感染部位并抑制 RecA 活性的能力对其体内活性至关重要。目前正在研究该化合物与现有抗生素联合治疗的潜力，以期克服抗生素耐药性。现有文献中未提供具体的体内数据，但该化合物具有用于治疗细菌感染的潜力。
|
| 酶活实验 |
使用 BRITE-338733 进行体外 RecA ATPase 抑制实验时，采用以下方案：重组 RecA 蛋白在大肠杆菌中表达，并通过亲和层析纯化。采用比色法测定 ATPase 活性，该方法检测 ATP 水解释放的无机磷酸盐 (Pi)。实验在 37°C 下进行，反应体系包含 50 mM Tris-HCl (pH 7.5)、50 mM KCl、10 mM MgCl₂、1 mM DTT 和 1 mM ATP。加入浓度为 10-100 μM（核苷酸当量）的单链 DNA (ssDNA)（例如 poly(dT) 或 M13 ssDNA）以刺激 RecA ATPase 活性。将待测化合物溶解于 DMSO 中，并用实验缓冲液进行系列稀释，最终浓度范围为 0.01 至 1000 μM。将 RecA (1-10 μM) 与化合物和 ssDNA 预孵育 5-10 分钟。加入 ATP 启动反应，并将混合物在 37°C 下孵育 10-60 分钟。加入显色剂（例如孔雀绿或钼酸铵）终止反应，并测量 620-660 nm 处的吸光度。根据吸光度变化计算初始反应速率，并使用非线性回归从剂量-反应曲线确定 IC50 值。为了确定抑制机制，在不同的 ATP 或 ssDNA 浓度下测试化合物，并使用 Lineweaver-Burk 或 Dixon 图分析数据。
|
| 细胞实验 |
对于使用 BRITE-338733 进行的体外细胞检测，通常采用以下方案：将细菌菌株（例如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌）在 37°C 下于 LB 培养基或 Mueller-Hinton 培养基中培养。对于 SOS 反应检测，将含有 SOS 诱导型启动子（例如 sulA 或 recA）的报告质粒转化到细菌中，该启动子与荧光素酶或 GFP 报告基因融合。在有或无 DNA 损伤剂（例如环丙沙星、丝裂霉素 C）的情况下，用浓度为 0.1-100 μM 的 BRITE-338733 处理细菌。1-4 小时后，通过荧光素酶检测或流式细胞术测量报告基因的表达。为了测定最小抑菌浓度（MIC），将细菌单独或与BRITE-338733（0.1-100 μM）联合用抗生素处理，并使用肉汤微量稀释法测定抗生素的MIC。为了评估突变频率，将细菌用化合物和抗生素处理，并通过在选择性琼脂平板上进行培养来测定自发突变（例如，利福平耐药性）的频率。为了评估DNA修复，通过彗星试验或测量DNA修复中间体的积累来评估细菌DNA损伤。
|
| 动物实验 |
对于 BRITE-338733 的体内动物研究，采用以下通用方案：对于尿路感染模型，将雌性 BALB/c 小鼠（6-8 周龄，18-22 g）经尿道感染耐药性大肠杆菌或肺炎克雷伯菌。将 BRITE-338733 配制成合适的溶剂（例如，0.5% 甲基纤维素或生理盐水），并以 5、10、25 和 50 mg/kg 的剂量口服或腹腔注射给药，单独给药或与抗生素（例如，环丙沙星，10 mg/kg）联合给药。24-72 小时后，处死小鼠，收集膀胱和肾脏进行细菌菌落形成单位 (CFU) 计数。对于脓毒症模型，将细菌腹腔注射感染小鼠，并用化合物和抗生素进行治疗。监测小鼠存活 7-14 天。在药代动力学研究中，于给药后不同时间点采集血液和组织样本，并采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）分析化合物浓度。在毒理学研究中，动物接受不同剂量化合物处理长达14天，并评估其临床化学、血液学和组织病理学指标。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
BRITE-338733 的药代动力学特性尚未完全阐明。根据其理化性质（分子量 433.59 g/mol，LogP 预测值约为 3-4），该化合物预计具有中等至高的亲脂性，有利于口服吸收和组织分布。该化合物含有酰胺和芳香族官能团，可能易受细胞色素 P450 酶的代谢。预计其血浆蛋白结合率较高（>90%）。根据类似化合物的研究，该化合物在啮齿动物体内的消除半衰期估计为 2-6 小时。该化合物穿透细菌细胞并抑制 RecA 的能力对其活性至关重要。需要开展包括静脉和口服给药在内的全面药代动力学研究，以确定其实际的吸收、分布、代谢和消除参数。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
BRITE-338733 的毒性特征尚未经过系统评估。作为一种靶向细菌 RecA 的研究化合物，其毒理学特性尚未得到充分证实。该化合物应作为研究用化学品，并采取适当的安全预防措施进行处理。由于真核生物中的 RecA 同源物（RAD51 和 DMC1）在结构和功能上存在差异，因此预计该化合物对细菌 RecA 的影响不会波及真核细胞。然而，其对哺乳动物蛋白的脱靶效应可能导致毒性。任何治疗性药物的开发都需要进行全面的毒理学研究，包括啮齿动物急性口服毒性试验、28 天重复给药毒性试验（需对主要器官进行组织病理学检查）、Ames 诱变性试验、染色体畸变试验以及对线粒体功能和细胞增殖的影响评估。
|
| 其他信息 |
BRITE-338733（CAS号：503105-88-2）是一种强效的RecA ATPase抑制剂，IC50值为4.7 μM。其分子式为C27H35N3O2，分子量为433.59 g/mol。目前正在研究其治疗细菌感染的潜力。未来的研究方向可能包括优化该化合物对RecA的抑制活性和选择性，评估其与抗生素联合用药的体内疗效，以及将其开发为治疗耐药菌感染的潜在药物。
|
| 分子式 |
C₂₇H₃₅N₃O₂
|
|---|---|
| 分子量 |
433.59
|
| 精确质量 |
433.272
|
| CAS号 |
503105-88-2
|
| PubChem CID |
136295145
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
557.3±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
290.8±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.567
|
| LogP |
6.78
|
| tPSA |
70.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
32
|
| 分子复杂度/Complexity |
608
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C(CC)=CC=C1C1C=C(C2C(=CC=C(C)C=2)O)N=C(C=1)NC1CC(C)(C)NC(C)(C)C1
|
| InChi Key |
PKYYVDCUXJXUPN-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H35N3O2/c1-7-20-9-11-24(32-20)18-13-22(21-12-17(2)8-10-23(21)31)29-25(14-18)28-19-15-26(3,4)30-27(5,6)16-19/h8-14,19,30-31H,7,15-16H2,1-6H3,(H,28,29)
|
| 化学名 |
2-[4-(5-ethylfuran-2-yl)-6-[(2,2,6,6-tetramethylpiperidin-4-yl)amino]pyridin-2-yl]-4-methylphenol
|
| 别名 |
BRITE 338733BRITE338733BRITE-338733
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~23.06 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3063 mL | 11.5316 mL | 23.0633 mL | |
| 5 mM | 0.4613 mL | 2.3063 mL | 4.6127 mL | |
| 10 mM | 0.2306 mL | 1.1532 mL | 2.3063 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
