| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TRPC5 (transient receptor potential cation channel subfamily C member 5). BTD is a positive modulator/activator of the TRPC5 channel, a non-selective cation channel (primarily permeable to Na+ and Ca2+). Activation of TRPC5 leads to membrane depolarization and an increase in intracellular calcium. BTD selectively activates TRPC5 over other TRP channels, making it a valuable tool for studying TRPC5-mediated functions. The EC50 for BTD on TRPC5 is 1.4 uM in a calcium flux assay. BTD also activates heteromeric channel complexes formed by TRPC5 with its relatives TRPC1 or TRPC4.
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| 体外研究 (In Vitro) |
BTD在荧光微孔Ca2+检测中EC50值为1.4 μM，在全细胞膜片钳实验中EC50值为1.3 μM，能够激活TRPC5[1]。BTD激活表达TRPM8的HEK293细胞的EC50值为20.6 μM[1]。BTD还能激活由TRPC5、TRPC1和TRPC4组成的异源多聚体通道复合物，其中TRPC1和TRPC4是TRPC5的近亲。
在利用膜片翻转的无细胞实验中，BTD 可激活重组于脂双层中的 TRPC5 通道，提高其开放概率 (Po)。其结合位点可能位于胞内 C 端或电压传感器样结构域 (VSLD)。在生化下拉实验中，BTD 可与 TRPC5 蛋白结合，但其确切的结合口袋尚未完全明确。在全细胞膜片钳实验中，BTD 的 EC50 值为 1.3 uM，证实了其对通道的直接激活作用。此外，BTD 对 TRPM8 的作用较弱，在表达 TRPM8 的 HEK293 细胞中，其 EC50 值为 20.6 uM，表明其对 TRPC5 的选择性约为 TRPM8 的 15 倍。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在培养细胞（例如，转染了TRPC5的HEK293细胞）中，BTD（EC50 = 1.4 uM）可诱导钙离子快速内流，这可以通过荧光钙指示剂进行检测。细胞内钙离子浓度的升高会触发下游信号通路，例如钙调磷酸酶的激活和活化T细胞核因子（NFAT）向细胞核的转位。在神经元中，BTD可使细胞膜去极化，从而增加神经元的兴奋性。在原代背根神经节（DRG）神经元中，应用BTD可诱发动作电位。TRPC5抑制剂（例如，HC-070或ML204）可阻断BTD的作用，证实了其靶向特异性。
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| 酶活实验 |
采用钙离子流测定法评估BTD对TRPC5的活性。将稳定或瞬时表达人TRPC5的HEK293细胞接种于黑色壁、透明底的96孔板中。在HEPES缓冲盐溶液中，用钙敏感染料（如Fluo-4 AM）孵育细胞，于37℃孵育1小时。洗涤后，使用自动进样器向孔中加入不同浓度的BTD（0.01-100 uM）。使用荧光酶标仪实时（1-5分钟）测量荧光强度（激发波长485 nm，发射波长525 nm）。以最大荧光信号（峰高）对BTD浓度作图，生成浓度-效应曲线，并通过非线性回归计算EC50值。为了进行选择性检测，对表达其他 TRP 通道（例如 TRPC1、TRPC4、TRPC6、TRPM8、TRPV1）的细胞进行类似的检测。
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| 细胞实验 |
BTD的标准细胞检测方法是上文所述的钙离子流检测，使用表达TRPC5的HEK293细胞。另一种方法是使用全细胞膜片钳电生理技术直接测量离子电流。将表达TRPC5的HEK293细胞电压钳制在-60 mV。通过快速灌注系统将BTD（0.1-100 uM）加入细胞外液。记录电流-电压关系（IV曲线）以及BTD对通道门控的影响。通过测量不同浓度下的电流幅度来确定电流激活的EC50值。计算Hill系数。TRPC5拮抗剂ML204（10 uM）可阻断BTD诱导的电流。为评估细胞毒性，在BTD暴露24-48小时后，通过MTT法检测细胞活力，以确保其作用并非由毒性引起。
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| 动物实验 |
体内研究表明，BTD 可以调节疼痛通路和神经退行性变。在链脲佐菌素诱导的糖尿病性疼痛性神经病变大鼠模型中，腹腔注射（ip）BTD，剂量分别为 1 和 3 mg/kg，每日一次，持续 14 天。使用 von Frey 纤维测量机械性痛觉过敏来评估疼痛行为。BTD 治疗（1 mg/kg，ip）显著改善了糖尿病性神经病变大鼠的机械性痛觉过敏，但对热痛觉过敏或神经功能缺损无影响。在焦虑小鼠模型中，研究人员正在研究 TRPC5 激活剂（如 BTD）降低焦虑样行为的潜力。一项典型的研究可能包括在进行高架十字迷宫（EPM）或旷场实验（OFT）前 30 分钟腹腔注射 BTD（0.5-5 mg/kg）。BTD 不用于癌症模型。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
关于BTD的正式药代动力学研究尚未广泛发表。该化合物的分子量为459.6，LogP值为2.63，在DMSO中的溶解度最高可达100 mg/mL。在体内研究中，BTD的配制方法为：使用10% DMSO + 90%（20% SBE-β-CD的生理盐水）等溶剂，可得到浓度为2.5 mg/mL（5.44 mM）的澄清溶液。在糖尿病神经病变研究中，给药方案为每日腹腔注射1-3 mg/kg。目前尚不清楚BTD是否能穿过血脑屏障（BBB）；然而，其对疼痛行为的影响提示其至少具有外周活性。其体内半衰期尚未见报道。研究用储备液储存于-20℃。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
BTD的临床前毒理学数据有限。在大鼠糖尿病神经病变研究中，BTD以1和3 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，持续14天，未观察到对体重、一般行为或神经功能有显著不良影响。体外低微摩尔浓度下，BTD不被认为具有遗传毒性或细胞毒性。作为一种TRPC5激活剂，其潜在的靶向毒性包括对肾功能（TRPC5在足细胞中表达）和心血管系统的影响。然而，尚未有关于特定器官毒性的报道。用于研究时，应将其作为潜在危险化学品处理，并佩戴适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）。BTD尚未获准用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BTD 是一种研究级 TRPC5 通道激活剂，最早由 Sadowski 等人在 2019 年发表的论文中描述。其化学名称为 N-(3-((3r,5r,7r)-金刚烷-1-氧基)丙基)-3-(6-甲基-1,1-二氧代-2H-1,2,4-苯并噻二嗪-3-基)丙酰胺。该化合物是研究 TRPC5 生理和病理的重要工具，TRPC5 与大脑发育、疼痛感知和抑郁症密切相关。BTD 等 TRPC5 激活剂的作用与 TRPC5 抑制剂（例如 HC-070）相反，使研究人员能够进行双向调节。BTD 尚未获准用于治疗用途，仅供实验室研究使用，通常以纯度 ≥98% 的固体粉末形式提供，应储存于 -20℃。
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| 分子式 |
C24H33N3O4S
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|---|---|
| 分子量 |
459.601525068283
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| 精确质量 |
459.219
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| CAS号 |
896684-04-1
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| PubChem CID |
46369355
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.691
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| LogP |
2.63
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| tPSA |
105
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
809
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=CC2=C(C=C1)S(=O)(=O)N=C(N2)CCC(=O)NCCCOC34CC5CC(C3)CC(C5)C4
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| InChi Key |
YXADKMPRWFBOHW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H33N3O4S/c1-16-3-4-21-20(9-16)26-22(27-32(21,29)30)5-6-23(28)25-7-2-8-31-24-13-17-10-18(14-24)12-19(11-17)15-24/h3-4,9,17-19H,2,5-8,10-15H2,1H3,(H,25,28)(H,26,27)
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| 化学名 |
N-[3-(1-adamantyloxy)propyl]-3-(6-methyl-1,1-dioxo-4H-1λ6,2,4-benzothiadiazin-3-yl)propanamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~217.58 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1758 mL | 10.8790 mL | 21.7581 mL | |
| 5 mM | 0.4352 mL | 2.1758 mL | 4.3516 mL | |
| 10 mM | 0.2176 mL | 1.0879 mL | 2.1758 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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