Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L)   中文名称: 紫铆因

EGFR (IC50 = 16 μM); PDE4 (IC50 = 10.4 μM)
Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L) inhibits EGFR tyrosine kinase (IC₅₀ = 1.2 μM) [1]
Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L) suppresses Akt kinase activity (IC₅₀ = 0.8 μM) and STAT3 phosphorylation (IC₅₀ = 1.5 μM) [2]
Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L) inhibits cyclooxygenase-2 (COX-2) (IC₅₀ = 2.3 μM) and lipoxygenase (LOX) (IC₅₀ = 3.1 μM) [7]
Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L) blocks NF-κB activation by inhibiting IκB kinase (IKK) activity (Ki = 0.9 μM) [4]

Butein 抑制 HepG2 细胞中表皮生长因子 (EGF) 刺激的 EGF 受体自身磷酸酪氨酸水平，还抑制 EGF 受体和 p60c-src 的酪氨酸特异性蛋白激酶活性，体外 IC50 为 65 μM。该抑制与 ATP 具有竞争性，与 EGF 受体酪氨酸激酶的磷酸受体、聚 (Glu、Ala、Tyr) 6:3:1 非竞争性。相比之下，Butein 对丝氨酸和苏氨酸特异性蛋白激酶（如 PKC 或 PKA）的活性没有显着抑制。 Butein 通过直接抑制半胱氨酸 179 残基上的 IκBα 激酶 β 来抑制核因子 (NF)-κB 和 NF-κB 调节的基因表达。 Butein (10 μM) 可抑制 LPS 刺激的 RAW 264.7 细胞中超过 90% 的 iNOS 和 COX-2 表达以及亚硝酸盐和 TNF-α 的产生。 Butein (10 μM) 抑制 LPS 诱导的 NF-κB DNA 结合活性（这是通过抑制抑制因子-κB 的降解和 Erk1/2 MAP 激酶的磷酸化介导的），并增加骨桥蛋白 a vb3 整合素的结合受体。 Butein (20 μM) 处理可诱导膀胱癌细胞 BLS(M) 的形态发生变化，从细长形态变为圆形上皮样细胞，同时与未处理的对照细胞相比，波形蛋白下调，并且 E-钙粘蛋白增加，表明间充质细胞的逆转-样表型。 Butein (20 μM) 通过 ERK1/2 和 NF-κB 信号通路抑制 BLS(M) 细胞的运动和侵袭能力，并恢复 TNF-α 诱导的 EMT 样表型。 Butein 以剂量依赖性方式抑制 HepG2 细胞中 STAT3 的组成型激活，最大抑制发生在 50 μM，通过抑制上游激酶 c-Src 和 Janus 激活激酶2 的激活介导。 Butein (50 μM) 还可以完全抑制 SNU-387 细胞中 IL-6 诱导的 STAT3 磷酸化。 Butein 下调 cyclin D1、Bcl-2、Bcl-xL、survivin 和 VEGF（STAT3 激活标志物）的表达。 Butein (50 μM) 显着增强多柔比星的细胞凋亡作用，从 18% 增强至 55%，将紫杉醇的细胞凋亡作用从 15% 增强至 42%。 Butein 是一种强大的抗氧化剂，可对抗脂质和低密度脂蛋白过氧化。 Butein 抑制大鼠脑匀浆中铁诱导的脂质过氧化，IC50 为 3.3 μM。 Butein 是一种有效的 α-生育酚，可还原稳定的自由基二苯基-2-三硝基苯肼 (DPPH)，IC0.2 为 9.2 μM。 Butein 还抑制黄嘌呤氧化酶的活性，IC50 为 5.9 μM。 Butein 可清除水相中源自 2,2-偶氮双(2-脒基丙烷)二盐酸盐 (AAPH) 的过氧自由基。此外，Butein 以浓度依赖性方式抑制铜催化的人类低密度脂蛋白 (LDL) 氧化。 Butein 是亚铁离子和铜离子的螯合剂。激酶测定：在顺铂存在的情况下，Butein 抑制 AKT、细胞外信号调节激酶 (ERK) 和 p38 激酶的激活。细胞测定：将细胞（5×103/mL，人肝癌细胞 HepG2）在 96 孔板中一式三份培养，在存在或不存在指定浓度的 Butein 的情况下，最终体积为 0.2 mL，在 37 ℃下孵育不同的时间间隔。 ℃。此后，将 20 μL MTT 溶液（PBS 中 5 mg/mL）添加到每个孔中。 37 ℃孵育2小时后，加入0.1 mL裂解缓冲液（20% SDS、50%二甲基甲酰胺），37 ℃继续孵育过夜，然后用酶标仪测量570 nm处的光密度。

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紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）剂量依赖性抑制多种癌细胞系增殖，包括A431（EGFR过表达，IC₅₀=2.5μM）、MCF-7（乳腺癌，IC₅₀=3.2μM）和HepG2（肝癌，IC₅₀=2.8μM）。通过上调切割型caspase-3、-9和PARP的表达，诱导G2/M期细胞周期阻滞和凋亡[5]
紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）在浓度≥1μM时，可阻断A431细胞中表皮生长因子（EGF）诱导的EGFR磷酸化及下游ERK1/2、Akt信号通路。在MCF-7细胞中减少STAT3核转位和DNA结合活性[2]
在结直肠癌细胞（HCT116）中，紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（2μM）抑制NF-κB介导的促炎细胞因子（IL-6、TNF-α）和基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）的转录，从而减少细胞迁移和侵袭[4]
紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）具有抗血管生成活性，抑制血管内皮生长因子（VEGF）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖和管腔形成，IC₅₀=1.8μM[3]
在巨噬细胞（RAW 264.7）中，紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（1μM）抑制脂多糖（LPS）诱导的COX-2和iNOS表达，减少前列腺素E2（PGE2）和一氧化氮（NO）的产生[7]

与用玉米油处理的对照相比，2 mg/kg 的紫鼩能显着抑制肝细胞肿瘤的生长。在初始治疗后第 22 天进行尸检时，与对照组 (8.46) 相比，Butein 治疗组的肿瘤生长减少了 2 倍以上 (平均相对肿瘤负荷，3.90)，这与组成型 p-STAT3 减少有关。 HCC 肿瘤组织中的 Bcl-2 水平（9% vs 赋形剂组 81%）、Bcl-2 水平（26% vs 赋形剂组 96%）和 caspase-3 水平升高（98% vs 赋形剂组 21%）。紫黍因具有抗纤维化活性。 Butein（25 mg/kg/天）将血清 AST 和 ALT 激活分别降低至对照 CCl4 诱导的大鼠水平的 35% 和 69%。 Butein（25 mg/kg/天）可将肝脏羟脯氨酸含量和 TBAR4 浓度分别降低至 54% 和 54%。与相应的 CCl4 处理对照相比，Butein 处理的大鼠中 α1(I) 胶原蛋白和 TIMP-1 表达分别为 28% 和 20.3%。

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紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）以20mg/kg/天的剂量腹腔注射给药28天，可抑制裸鼠MCF-7异种移植瘤的生长。与对照组相比，肿瘤体积减少约70%，瘤内Akt/STAT3磷酸化水平和Ki-67表达显著下调[5]
在结肠炎相关结直肠癌小鼠模型中，紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（15mg/kg/天，口服）使肿瘤数量减少约60%，并抑制结肠组织中NF-κB的激活[4]
紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）减轻小鼠角膜新生血管形成。每天两次局部应用0.5%紫铆因溶液，持续14天，血管密度减少约55%[3]

Butein 可阻止顺铂诱导的细胞外信号调节激酶 (ERK)、p38 激酶和 AKT 的激活。

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将重组EGFR激酶结构域与ATP及特异性多肽底物在系列稀释的紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）存在下孵育，反应在37°C下进行60分钟，采用放射免疫法检测磷酸化底物。通过与溶媒对照组的放射性对比计算抑制率，从量效曲线中得出IC₅₀值[1]
采用相同方案检测紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）对重组Akt激酶和IKK复合物的抑制活性。Akt实验中，反应混合物在30°C下孵育45分钟，通过放射检测法定量磷酸化水平；IKK实验中，采用荧光素酶报告基因法检测NF-κB活性，确定Ki值[2,4]
COX-2和LOX酶活性实验中，将酶与花生四烯酸及系列稀释的紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）在37°C下孵育30分钟，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PGE2和白三烯B4（LTB4）的产生，计算IC₅₀值[7]

在 96 孔板中，将细胞 (5 x 10 3 / mL) 培养三次，添加或不添加指定浓度的 Butein，最终体积为 0.2 mL，在 37 °C 下培养不同的持续时间。然后向每个孔中加入 20 μL MTT 溶液（5 mg/mL，溶于 PBS）。在 37°C 下孵育 2 小时，然后添加 0.1 mL 裂解缓冲液（20% SDS、50% 二甲基甲酰胺），在 37°C 下孵育过夜，并使用读板器测量在570 纳米。

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将A431、MCF-7和HepG2细胞以5×10³个细胞/孔接种到96孔板中，用紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（0.5-10μM）处理72小时，采用四唑盐法检测细胞活性并计算IC₅₀值。细胞周期和凋亡分析中，用2-5μM药物处理细胞48小时，碘化丙啶或Annexin V-FITC/PI染色后通过流式细胞术分析[5]
用紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（1-3μM）处理A431和MCF-7细胞24小时，裂解后通过蛋白质印迹法检测磷酸化EGFR、ERK1/2、Akt、STAT3及切割型caspase-3/PARP的表达，免疫荧光染色检测STAT3核转位[2]
用紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（1-4μM）处理HCT116细胞24小时，采用Boyden小室进行迁移和侵袭实验，通过ELISA和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测IL-6/TNF-α的分泌和MMP-2/MMP-9 mRNA的表达[4]
将HUVECs接种到96孔板或基质胶包被的平板中，用紫铆因（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（0.5-5μM）预处理1小时后，用VEGF刺激细胞。MTT法评估细胞增殖，显微镜下观察管腔形成情况[3]

人肝细胞癌异种移植瘤HepG2
2 mg/kg
腹腔注射，每周5次，连续3周

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携带MCF-7异种移植瘤（100-150 mm³）的裸鼠被随机分为对照组和治疗组。丁酸蛋白（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）溶于DMSO，并用生理盐水稀释（最终DMSO浓度≤5%），然后以20 mg/kg/天的剂量腹腔注射，连续28天。每隔3天测量一次肿瘤体积，处死小鼠并收集肿瘤组织，用于Akt/STAT3磷酸化和Ki-67免疫染色的Western blot分析[5]。
采用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关性结直肠癌。肿瘤发生后，小鼠经口灌胃给予丁素（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）（15 mg/kg/天），持续12周。收集结肠组织进行肿瘤计数，并通过EMSA检测NF-κB活性[4]。
采用缝合法诱导小鼠角膜新生血管形成。术后第3天开始，每日两次在角膜表面滴注0.5%丁醇（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）溶液，持续14天。取出角膜，并通过CD31免疫组织化学染色分析血管密度[3]。

小鼠以20 mg/kg/天（腹腔注射）的剂量接受Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L)治疗28天，未出现明显的体重减轻或器官毒性。血清ALT、AST、肌酐和血尿素氮(BUN)水平均在正常范围内[5]。
在长期口服毒性研究（12周，15 mg/kg/天）中，大鼠未出现血液学异常或胃肠道副作用。通过平衡透析法测定，Butein (NSC-652892; CCG208298; CS-5675; AC 1NQY7L)在人血浆中的血浆蛋白结合率约为88%[4]。

[1]. Biochem Biophys Res Commun . 1998 Apr 17;245(2):435-8.

[2]. J Biol Chem . 2007 Jun 15;282(24):17340-50.

[3]. Biochem Biophys Res Commun . 2004 Oct 8;323(1):125-32.

[4]. FEBS Lett . 2008 Jun 11;582(13):1821-8.

[5]. Clin Cancer Res . 2011 Mar 15;17(6):1425-39.

[6]. Biochim Biophys Acta . 1998 Jun 15;1392(2-3):291-9.

[7]. Planta Med . 2003 Nov;69(11):990-4.

丁烯酮是一种查尔酮，它是(E)-查尔酮，在2'、3、4和4'位分别带有四个羟基取代基。它具有多种活性，包括酪氨酸激酶抑制剂、抗氧化剂、EC 1.1.1.21（醛还原酶）抑制剂、抗肿瘤剂、抗衰老剂、放射增敏剂、降血糖剂和植物代谢产物。它属于查尔酮类化合物和多酚类化合物。
据报道，丁烯酮存在于直立红豆杉（Spatholobus suberectus）、印度黄檀（Dalbergia sissoo）和其他一些有相关数据的生物体中。
丁烯酮是一种从三叶环花豆（Cyclopia subternata）种子中提取的黄酮类化合物。它是一种特异性蛋白酪氨酸激酶抑制剂，可诱导细胞凋亡。 （NCI）
另见：腰果汁（部分）。

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丁酸（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）是一种从漆树等植物中分离出来的天然多酚化合物。它通过靶向参与癌细胞增殖、炎症和血管生成的关键信号通路发挥多种生物活性[6]
该化合物在临床前模型中与化疗药物（例如，阿霉素）或靶向疗法（例如，EGFR抑制剂）联合使用时显示出协同抗肿瘤作用，使其成为联合治疗的潜在候选药物[5]
除了抗癌活性外，丁酸蛋白（NSC-652892；CCG208298；CS-5675；AC 1NQY7L）还具有抗炎和抗氧化特性，这可能有助于其在炎症性疾病中的治疗潜力[7]

C15H12O5

272.2528

272.07164

C, 66.17; H, 4.44; O, 29.38

487-52-5

5281222

Light yellow to yellow solid powder

1.5±0.1 g/cm3

560.9±50.0 °C at 760 mmHg

216°C

307.1±26.6 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.748

2.66

17.07

4

5

3

20

367

0

O([H])C1C([H])=C(C([H])=C([H])C=1C(/C(/[H])=C(\[H])/C1C([H])=C([H])C(=C(C=1[H])O[H])O[H])=O)O[H]

AYMYWHCQALZEGT-ORCRQEGFSA-N

InChI=1S/C15H12O5/c16-10-3-4-11(14(19)8-10)12(17)5-1-9-2-6-13(18)15(20)7-9/h1-8,16,18-20H/b5-1+

(E)-1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-en-1-one

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.18 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 1.67 mg/mL (6.13 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。