Cerebral ischemia

在本研究中，设计、合成了一系列3-正丁基邻苯二甲酸（NBP）释放硫化氢（H2S）的衍生物（8a–g和9a–f），并对其进行了生物评价。最有前景的化合物8e在体外显著抑制二磷酸腺苷（ADP）和花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集，优于NBP、盐酸噻氯匹定和阿司匹林。此外，8e在体内可缓慢产生中等水平的H2S，有利于改善心血管和脑循环[3]。

---

DL-3-正丁基苯酞（NBP）因其抗氧化和抗炎作用而常用于治疗缺血性中风。本研究旨在通过在H9c2细胞中建立心肌缺血再灌注损伤（MIRI）模型，研究NBP对MIRI的保护作用。使用细胞计数试剂盒-8进行细胞活力测定，评估乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性和脂质过氧化丙二醛（MDA）含量，以检测细胞活性、细胞损伤程度和氧化应激反应。逆转录定量PCR用于定量H9c2细胞中炎性因子的表达。采用Western blot和免疫荧光染色检测PI3K/AKT和热休克蛋白70（HSP70）的蛋白表达。目前的结果表明，NBP在缺血再灌注期间显著提高了细胞存活率。此外，NBP抑制LDH的释放和MDA的产生。NBP治疗还显著降低了炎症因子在mRNA水平上的表达。此外，与MIRI模型中的细胞相比，NBP激活了PI3K/AKT通路并上调了HSP70的表达。LY294002是一种PI3K抑制剂，可逆转NBP的保护作用并抑制HSP70的表达。本研究表明，NBP通过PI3K/AKT通路激活调节HSP70表达，保护H9c2细胞免受MIRI的侵袭。[7]

---

不同浓度的3-正丁基苯酞/NBP对H9c2细胞存活率的影响[7]
通过CCK-8比色法检测用不同NBP剂量处理的H9c2细胞的存活率。与MIRI组相比，100µM NBP提高了细胞存活率（P<0.05；图1A）。然而，NBP浓度≥200µM会略微降低细胞存活率（图1A）。目前的结果表明，100µM NBP是保护细胞免受MIRI的最佳浓度。

---

NBP/3-正丁基苯酞抑制MIRI期间的氧化应激反应[7]
当心肌细胞发生缺血再灌注损伤时，氧化应激也起着重要作用。使用MDA试剂盒探讨NBP对MIRI后氧化应激指数的影响以及PI3K在这一过程中的作用。MIRI组的氧化水平明显高于CON组（P<0.05）。然而，NBP预处理显著降低了氧化应激（P<0.05）。相比之下，LY294002消除了NBP的抗氧化作用（P<0.05；图1B）。也就是说，NBP在MIRI期间显著降低了H9c2细胞的氧化应激反应，但这种抗氧化保护作用被阻断PI3K所消除。

---

NBP/3-正丁基苯酞保护H9c2细胞免受MIRI[7]
在体外，细胞凋亡或坏死引起的细胞膜结构破坏导致LDH释放到培养基中。因此，LDH活性可以间接指示细胞损伤的程度。为了探索NBP对MIRI的影响以及PI3K在MIRI中的参与，通过CCK-8比色法测定H9c2细胞的存活率，同时使用LDH试剂盒测定培养基中的LDH含量。与CON组相比，MIRI组的细胞存活率显著降低（P<0.05）。然而，MIRI+NBP组的细胞存活率高于MIRI组（P<0.05）。相比之下，添加PI3K抑制剂LY294002会降低细胞存活率（P<0.05；图1C）。此外，MIRI组的LDH含量显著高于CON组（P<0.05）。NBP预处理降低了LDH的释放（P<0.05），但添加LY294002逆转了这一作用（P<0.05；图1D）。因此，NBP显著提高了缺血再灌注损伤后H9c2细胞的存活率，并减少了H9c2细胞损伤。然而，PI3K抑制剂LY294002逆转了NBP对H9c2细胞的保护作用。

---

NBP/3-正丁基苯酞通过降低TNF-α和IL-1βmRNA表达来抑制炎症[7]
MIRI期间炎性细胞因子的激活会加重心肌细胞的损伤。因此，为了确定NBP在MIRI期间的保护作用与炎症因子之间的关联，通过RT-qPCR检测了H9c2细胞中TNF-α和IL-1β的mRNA表达。与CON组相比，MIRI组TNF-α和IL-1β的表达显著增加（P<0.05）。然而，与MIRI组相比，MIRI+NBP中这些基因的表达降低（P<0.05）。相比之下，与MIRI+NBP组相比，添加LY294002增加了TNF-α和IL-1β的表达（P<0.05；图1E和F）。因此，研究表明，NBP有效地降低了MIRI期间炎症因子的表达，而PI3K抑制剂LY294002的应用逆转了这种抗炎作用。

---

NBP/3-正丁基苯酞激活HSP70和PI3K/AKT信号通路[7]
在MIRI期间，应激保护蛋白HSP70和PI3K/AKT的表达上调。Western blot和免疫荧光染色用于测定NBP处理后HSP70和PI3K/AKT的蛋白表达。与CON组相比，MIRI组p-AKT和PI3K的表达水平显著升高（p<0.05）。与MIRI组相比，MIRI+NBP组p-AKT和PI3K的表达增加（p<0.05）。相比之下，在MIRI+NBP+LY294002组中，与MIRI+NBP组相比，p-AKT和PI3K的表达降低（p<0.05；图2A-D）。在免疫荧光分析中也观察到了这种趋势（图2E和F）。此外，MIRI组HSP70的表达水平较CON组升高（P<0.05）。与MIRI+NBP组相比，NBP预处理进一步增加了HSP70的表达（P<0.05），而LY294002则降低了其表达（P<0.05；图3A和B）。在免疫荧光分析中也观察到了这种趋势（图3C）。本研究结果表明，NBP预处理可以增加MIRI后PI3K、p-AKT和HSP70的表达水平，抑制PI3K通路也会改变HSP70的表达。

在 SAMP8 小鼠中，丁基苯酞（160 mg/kg，IR）可以缓解记忆和学习缺陷[3]。

---

3- n -丁苯酞是治疗急性缺血性脑卒中的有效药物。然而，其对慢性脑缺血引起的神经元损伤的影响仍然知之甚少。因此，本研究结扎15月龄大鼠双侧颈动脉，模拟老年人慢性脑缺血。然后给老龄大鼠灌胃3-正丁苯酞。3- n -丁苯酞改善慢性脑缺血大鼠大脑皮层和海马神经元形态，提高胆碱乙酰转移酶活性，降低丙二醛和β淀粉样蛋白水平，显著改善认知功能。上述结果提示，3-正丁苯酞可减轻慢性脑缺血引起的氧化应激，改善胆碱能功能，抑制β淀粉样蛋白积累，从而改善脑神经元损伤和认知缺陷。[2]

---

中药提取物3-N-butylphthalide (NBP)在中国用于临床治疗缺血性患者。它已被证明在体内和体外都有多种神经保护作用。本研究探讨了NBP对衰老加速小鼠易感性-8 （SAMP8）动物模型学习记忆衰退的影响。4月龄SAMP8小鼠灌胃NBP 2个月后，空间学习记忆能力显著提高。SAMP8小鼠中隔核和对角带纵肢胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）阳性神经元的损失减慢，海马、大脑皮层和前脑ChAT蛋白和mRNA表达下降。这些结果表明，在4个月大时开始的NBP治疗可以保护SAMP8小鼠的学习/记忆缺陷，并且这种效果可能是通过防止中枢胆碱能系统的衰退来介导的。[3]

关于线粒体功能的保护，早期动物研究表明，dl-NBP可以提高线粒体中Na/K-ATP酶和Ca-ATP酶的活性。众所周知，Na/K-ATP酶和Ca-ATP酶是维持细胞膜电位并参与物质运输以调节细胞体积的重要酶。NBP可以维持线粒体膜的流动性和线粒体膜的稳定性，防止线粒体肿胀[5]。

NBP的主要药理作用包括重建微循环、保护线粒体功能、抑制氧化应激、抑制炎症反应和抑制神经元凋亡。它还被发现具有抗血小板聚集、抗血栓形成和抗动脉粥样硬化等作用[5]。

---

细胞培养[7]
将H9c2细胞（1x106细胞/ml）接种在含有高葡萄糖DMEM（10%FBS；1%青霉素/链霉素）的25-cm2细胞培养瓶中。细胞在37˚C、95%空气和5%二氧化碳的细胞培养箱中培养。H9c2细胞培养24小时后，随机分为四组：i）对照组（CON）；ii）MIRI组；iii）3-正丁基苯酞/NBP预处理组（MIRI+NBP）；iv）PI3K抑制剂组（MIRI+NBP+LY294002）。CON细胞在37˚C和95%空气中培养。MIRI细胞在37˚C下与5%CO2、93%N2和2%O2一起孵育6小时，然后复氧4小时。MIRI+NBP细胞用100µM NBP预处理2小时，然后缺氧6小时，再复氧4 h。MIRI+NBP+LY294002细胞用10µM LY294002（28）预处理1小时，然后用NBP处理2小时。

---

H9c2 MIRI模型的构建[7]
为了模拟缺血再灌注损伤的体内模型，将细胞培养基替换为不含FBS的低葡萄糖DMEM，并在37˚C、5%CO2、93%N2和2%O2的条件下孵育细胞。在3-正丁基苯酞/NBP处理前1小时，共加入10µM的LY294002。NBP预处理在缺氧前持续2小时。MIRI后，用高糖DMEM（10%FBS；1%青霉素/链霉素）代替培养基，将细胞在培养箱（37˚C；5%CO2；95%空气）中培养4小时。

---

确定最佳3-正丁基苯酞/NBP浓度和细胞存活率[7]
将H9c2细胞（1x104个细胞/孔）接种在96孔板中24-48小时，然后用不同剂量的NBP（1、50、100、200、300和500µM）预处理。再灌注后，丢弃原始培养基，向每个孔中加入100µl含有10mg/ml细胞计数试剂盒-8的培养基。在无光培养1小时后测量450nm处的吸光度。每组的最终细胞存活率用以下公式计算：细胞存活率（%）=（实验组空白）/（仅MIRI组空白）x100。

Animal/Disease Models: Aged male SAMP8 mice and SAMR1 mice [3]
Doses: 40 mg/kg, 80 mg/kg, 160 mg/kg
Route of Administration: Orally administered daily for 60 days
Experimental Results: The escape latency on day 7 was shortened. Improved learning deficits in SAMP8 mice.

---

Ten rats were selected in the sham-operated group. Forty-five days after modeling, 27 rats survived, and those with equal cognitive levels were selected and randomly divided into three groups (n = 9 per group): (1) the model or (2) 30 or (3) 120 mg/kg 3-N-butylphthalide/NBP. [2]

---

The chronic cerebral ischemia rat model and drug treatment [2]
Rats (280 mg/kg) were anesthetized by intraperitoneal (i.p.) injection of chloral hydrate. A neck operation was conducted to separate the bilateral common carotid arteries, which were then ligated permanently with 5-0 operation silk suture (Zhao et al., 2013). We injected 200,000 units of penicillin (i.p.) per day after the operation for 3 successive days. The bilateral common carotid arteries were separated without ligation in the sham-operated group. Chronic cerebral ischemia rat models were established in all three groups. Forty-five days after the operation, rats in the sham-operated and model groups were intragastrically administered peanut oil (2 mL/kg), and rats in the 30 or 120 mg/kg 3-N-butylphthalide/NBP groups were intragastrically administered 30 or 120 mg/kg 3-N-butylphthalide/NBP, respectively, dissolved in peanut oil for 45 successive days.

3-正丁基苯酞（NBP）是一种心血管药物，目前用于治疗脑缺血。本研究旨在探讨NBP在人体内的代谢、药代动力学和排泄情况，并鉴定主要代谢产物的生成酶。口服200 mg NBP后，NBP发生广泛的代谢，在人血浆和尿液中鉴定出23种代谢产物。主要代谢途径包括烷基侧链的羟基化，特别是3-、ω-1-和ω-碳上的羟基化，以及进一步的氧化和结合反应。约81.6%的给药剂量从尿液中回收，主要以NBP-11-酸（M5-2）及其葡萄糖醛酸苷结合物和单羟基化产物的形式存在。 10-酮基-NBP (M2)、3-羟基-NBP (M3-1)、10-羟基-NBP (M3-2) 和 M5-2 是主要的循环代谢物，其曲线下面积值分别是 NBP 的 1.6 倍、2.9 倍、10.3 倍和 4.1 倍。这四种代谢物的参考标准品是通过布氏康宁汉氏菌 (Cunninghamella blakesleana) 的微生物生物转化获得的。体外表型分析研究表明，多种细胞色素 P450 (P450) 同工酶，特别是 CYP3A4、2E1 和 1A2，参与了 M3-1、M3-2 和 11-羟基-NBP 的生成。以M3-2和11-羟基-NBP为底物，人亚细胞组分实验表明，P450、醇脱氢酶和醛脱氢酶催化了M2和M5-2的生成。M5-2的生成速度远快于M2，且M5-2可在鼠肝匀浆中发生β-氧化生成邻苯二甲酰乙酸。总的来说，我们的研究表明，NBP在经尿液排泄前，能被充分吸收并经多种酶广泛代谢为多种代谢物。[1]

大鼠口服LD50为2450 mg/kg，《食品与化妆品毒理学》，17(251)，1979年

[1]. Ninety-day administration of dl-3-n-butylphthalide for acute ischemic stroke: a randomized, double-blind trial. Chin Med J (Engl). 2013;126(18):3405-10.

[2]. 3-N-butylphthalide improves neuronal morphology after chronic cerebral ischemia. Neural Regen Res. 2014 Apr 1;9(7):719-26.

[3]. Improvement of cognitive deficits in SAMP8 mice by 3-n-butylphthalide. Neurol Res. 2014 Mar;36(3):224-33.

[4]. Design, synthesis and biological evaluation of hydrogen sulfide releasing derivatives of 3-n-butylphthalide as potential antiplatelet and antithrombotic agents. Org Biomol Chem. 2014 Aug 21;12(31):5995-6004.

[5]. Application and prospects of butylphthalide for the treatment of neurologic diseases. Chin Med J (Engl). 2019;132(12):1467-1477.

[6]. Metabolism and pharmacokinetics of 3-n-butylphthalide (NBP) in humans: the role of cytochrome P450s and alcohol dehydrogenase in biotransformation. Drug Metab Dispos. 2013 Feb;41(2):430-44.

[7]. DL-3-n-butylphthalide protects H9c2 cardiomyoblasts from ischemia/reperfusion injury by regulating HSP70 expression via PI3K/AKT pathway activation. Exp Ther Med. 2021 Jul 15;22(3):1008.

丁基苯酞属于苯并呋喃类化合物。
丁基苯酞已用于预防再狭窄的研究试验。
据报道，丁基苯酞存在于当归、藁本草以及其他有相关数据的生物体中。
另见：芹菜籽（部分）；当归根油（部分）。

---

背景：Dl-3-正丁基苯酞 (NBP) 最初是从芹菜籽中分离出来的，并在动物卒中模型中显示出疗效。本研究是一项临床试验，旨在评估 NBP 持续给药方案在急性缺血性卒中患者中的疗效和安全性。方法：一项随机、双盲、双模拟试验在中国纳入了 573 例发病 48 小时内的缺血性卒中患者。患者被随机分配接受以下三种治疗方案：14 天 NBP 静脉输注后服用 NBP 胶囊；14 天 NBP 静脉输注后服用阿司匹林；或 14 天奥扎格雷静脉输注后服用阿司匹林。疗效指标为第 90 天的 Barthel 指数评分和改良 Rankin 量表 (mRS) 评分。采用 χ² 检验（双侧 α = 0.05）比较三组间 mRS 评分的差异，并进行 Logistic 回归分析以纳入基线美国国立卫生研究院卒中量表 (NIHSS) 评分。结果：在纳入疗效分析的 535 例受试者中，90 天 NBP 治疗组的 mRS 评分显著优于 14 天奥扎格雷治疗组 (P < 0.001)。在第90天，三组患者的Barthel指数无显著差异。三组患者的不良事件发生率也相似。结论：NBP治疗90天可改善卒中后第三个月的预后。NBP治疗（静脉和口服）安全（ChiCTR-TRC-09000483）。[1]

---

本研究设计、合成并生物活性评价了一系列3-正丁基苯酞（NBP）的硫化氢（H2S）释放衍生物（8a–g和9a–f）。其中，化合物8e在体外显著抑制了腺苷二磷酸（ADP）和花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集，其效果优于NBP、盐酸噻氯匹定和阿司匹林。此外，8e可在体外缓慢产生中等浓度的H2S，这可能有利于改善心脑循环。最重要的是，化合物 8e 能保护小鼠免受胶原蛋白和肾上腺素诱导的血栓形成，并且在大鼠中表现出比 NBP 和阿司匹林更强的抗血栓活性。总的来说，化合物 8e 可能值得进一步研究，用于治疗血栓相关的缺血性卒中。[4]

---

目的：3-正丁基苯酞 (NBP) 是芹菜油的化学成分之一。它具有一系列药理机制，包括重建微循环、保护线粒体功能、抑制氧化应激、抑制神经元凋亡等。基于 NBP 复杂的多靶点药理机制，NBP 的临床应用日益增多，越来越多的临床研究和动物实验也聚焦于 NBP。本综述旨在全面系统地总结 NBP 在神经系统疾病中的应用，并简要概述其在非神经系统疾病中的应用。此外，本文还总结了近年来NBP在动物实验模型方面的研究进展。数据来源：检索了截至2018年11月的PubMed和万方数据库，检索词包括“3-正丁基苯酞”、“微循环”、“线粒体”、“缺血性卒中”、“阿尔茨海默病”、“血管性痴呆”、“帕金森病”、“脑水肿”、“一氧化碳中毒”、“创伤性中枢神经系统损伤”、“自身免疫性疾病”、“肌萎缩侧索硬化症”、“癫痫”、“糖尿病”、“糖尿病性白内障”和“动脉粥样硬化”。文献选择：主要文献来源于英文文章或可获取英文摘要的文章，部分来源于中文文章。文章类型不限。参考文献也来自已检索文章的参考文献列表和作者的文献库。结果：NBP已成为缺血性卒中的重要辅助治疗手段。在血管性痴呆中，NBP在治疗脑血管疾病期间脑组织灌注不足引起的严重认知功能障碍综合征方面的临床应用也日益增多。有证据表明，NBP对神经退行性疾病也具有治疗作用。许多动物实验发现，它还可以改善其他神经系统疾病的症状，例如癫痫、脑水肿以及严重急性一氧化碳中毒引起的认知功能下降。此外，NBP对糖尿病、糖尿病性白内障以及动脉粥样硬化等非神经系统疾病也具有治疗作用。从机制上讲，NBP主要改善微循环并保护线粒体。其广泛的药理作用还包括抑制氧化应激、神经细胞凋亡、炎症反应以及抗血小板和抗血栓作用。结论：NBP的多种药理机制涉及许多复杂的分子机制；然而，其许多未知的药理作用尚待进一步研究。[5] 3-正丁基苯酞（NBP）[(±)-3-丁基-1(3H)-异苯并呋喃酮]是一种强效且广泛用于临床治疗缺血性脑卒中的药物。消旋NBP于2004年获得中国国家食品药品监督管理局（SFDA）批准上市，剂型为软胶囊和输液。NBP的推荐剂量为每次200 mg，每日三次。既往药理学研究表明，NBP可通过增加缺血区域的局部脑血流量并抑制谷氨酸和5-羟色胺的释放发挥神经保护作用（Yan和Feng，1998；Yan等，1998；Chong和Feng，1999；Xu和Feng，2001）。近期研究表明，NBP可通过c-Jun N端激酶通路，在神经元培养中减轻淀粉样蛋白诱导的细胞死亡，改善阿尔茨海默病动物模型的认知障碍，并预防小鼠局灶性脑缺血后的神经元细胞死亡（Peng et al., 2008, 2010; Li et al., 2010）。尽管NBP的药理特性已被广泛研究，但其吸收、分布、代谢和排泄机制仍不甚明了；仅有少数研究探讨了其在大鼠体内的代谢（Peng and Zhou, 1996; Wang et al., 1997）。基于推测代谢物及其四甲基硅烷衍生物的碎片化分析，在大鼠口服给药后，尿液中检测到四种羟基化代谢物。另一项放射性标记的3H-NBP体内研究表明，NBP吸收迅速且代谢广泛。代谢产物主要经尿液排泄。其中一种尿液代谢产物被确认为10-羟基-NBP，而另一种代谢产物则被推测为3-羟基-NBP，但尚未进行可靠的结构鉴定。迄今为止，关于NBP在人体内的生物转化研究甚少。因此，深入了解NBP在人体内的代谢过程并鉴定参与其生物转化的酶，将为NBP的安全性评价、避免潜在的药物相互作用以及进一步发现新的抗卒中药物提供可靠的依据（Li et al., 2011）。鉴于此，本研究旨在：（1）采用超高效液相色谱-紫外/四极杆飞行时间质谱联用技术（UPLC-UV/Q-TOF MS）研究口服200 mg NBP软胶囊后人体内的NBP代谢情况；（2）表征NBP在人体内的药代动力学和消除特征。 (3) 评估细胞色素P450 (P450)、醇脱氢酶 (ADH)、醛脱氢酶 (ALDH) 和β-氧化在NBP生物转化中的作用。[6]

---

本研究存在一些主要局限性。首先，需要利用动物模型进一步研究当前的调控通路。其次，NBP对心肌缺血再灌注损伤 (MIRI) 的保护作用尚未在临床治疗中得到体现，需要进一步研究给药途径和剂量。第三，H9c2细胞是大鼠成肌细胞而非心肌细胞；因此，它们与成年心肌细胞在特性和蛋白质表达方面存在差异。未来的研究将在原代心肌细胞中验证目前的假设。总之，NBP通过PI3K/AKT通路上调HSP70，降低H9c2细胞的炎症反应、氧化应激和损伤，从而减轻MIRI。这些发现可能为 MIRI 的临床治疗提供新的治疗靶点。[7]

C12H14O2

190.242

190.099

C, 75.76; H, 7.42; O, 16.82

6066-49-5

Butylphthalide-d3

61361

Colorless to light yellow liquid

1.1±0.1 g/cm3

312.8±31.0 °C at 760 mmHg

128.3±22.2 °C

0.0±0.7 mmHg at 25°C

1.525

Celery species

3.08

26.3

0

2

3

14

212

0

O1C(C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C2C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])=O

HJXMNVQARNZTEE-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C12H14O2/c1-2-3-8-11-9-6-4-5-7-10(9)12(13)14-11/h4-7,11H,2-3,8H2,1H3

3-Butyl-2-benzofuran-1(3H)-one

N-butylphthalide; 3-n-Butylphthalide; 6066-49-5; Phthalide, 3-butyl-; 3-Butyl-1(3H)-isobenzofuranone; FEMA No. 3334; dl-3-n-butylphthalide; Butylphthalide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~250 mg/mL (~1314.13 mM)
H2O : ~100 mg/mL (~525.65 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (10.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (10.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (10.93 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 13.33 mg/mL (70.07 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。