| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PDK1 (IC50 = 6 nM)
Phosphoinositide-dependent kinase-1 (PDK1) (IC50: single-digit nM in cAKT2 assay; IC50: similar single-digit nM in direct PDK1 enzyme assay) Protein kinase A (PKA) (IC50: 1600 nM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BX-517 可防止肿瘤细胞激活 Akt[2]。
BX-517 在无细胞的、PDK1介导的AKT2活化实验 (cAKT2) 中表现出对PDK1的强效抑制活性，IC值为个位数纳摩尔范围。 [1] BX-517 在滤膜结合法直接PDK1激酶实验中，也显示出相当的抑制效力 (IC50为个位数纳摩尔)。 [1] 在PC-3人前列腺癌细胞中，BX-517 以亚微摩尔效力抑制PDK1依赖的Akt蛋白Thr308位点磷酸化 (P-AKT)，IC值范围在100至1000纳摩尔之间。 [1] BX-517 对PDK1相较于密切相关的激酶PKA表现出优异的选择性 (320倍)。 此外，它对另外七种丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶也显示出高度选择性 (>100倍)。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
BX517的药学特性较差，包括半衰期短（大鼠体内0.4小时）、代谢稳定性低、溶解度差[2]。
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| 酶活实验 |
PDK1介导的AKT2活化实验 (cAKT2): 这是一个偶联的闪烁亲近测定法 (SPA)。 非活性AKT2在测试化合物、[γ-³²P]ATP和AKT2特异性生物素化肽底物存在下，与PDK1和磷脂酰肌醇-3,4-二磷酸 (PtdIns-3,4-P2) 共同孵育进行原位活化。 随后，磷酸化的生物素化肽产物被链霉亲和素包被的SPA珠子捕获，用于放射性检测。 该实验可鉴定AKT2活化的抑制剂，以及PDK1或AKT2的直接抑制剂。 [1]
直接PDK1酶实验: 直接测量PDK1抑制活性。 将PDK1酶与肽底物、[γ-³²P]ATP和测试化合物一起孵育。 反应终止后，磷酸化的肽产物被P81磷酸纤维素滤膜捕获。 通过磷屏成像定量滤膜上保留的放射性，其对应于磷酸化水平。 [1] |
| 细胞实验 |
抑制PC-3细胞中Akt磷酸化: 用不同浓度的测试化合物孵育PC-3人前列腺癌细胞。 孵育一段时间后，裂解细胞。 随后对细胞裂解物进行标准免疫印迹 (Western blot) 分析。 使用针对Akt蛋白Thr308位点磷酸化 (P-Thr308) 的特异性磷酸化抗体来检测Akt的活化水平。 通过测量化合物对此磷酸化信号的抑制程度来确定其细胞活性。 [1]
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| 动物实验 |
大鼠药代动力学研究：为评估静脉（iv）药代动力学，向三只大鼠静脉注射2 mg/kg剂量的BX-517。为评估口服（po）生物利用度，向三只大鼠口服10 mg/kg剂量的BX-517。定期采集血样以确定血浆浓度曲线。[1]
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| 药代性质 (ADME/PK) |
BX-517 在水性介质中的溶解度很差，尤其是在磷酸盐缓冲液 (PBS) 中的溶解度仅为 2 mg/L。[1]
在大鼠中，静脉注射 2 mg/kg 剂量后，BX-517 的血浆半衰期 (t1/2) 很短，仅为 24 分钟。[1] 大鼠的血浆清除率 (Cl) 很高，为 31 mL/min/kg。[1] 大鼠的口服生物利用度非常低，口服 10 mg/kg 剂量后低于 1%。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
磷脂酰肌醇依赖性激酶-1 (PDK1) 是 Akt/PKB 和其他 AGC 家族激酶（如 PKC、SGK、S6K1）的关键激活因子，这些激酶参与肿瘤细胞的生长、存活和血管生成。抑制 PDK1 是癌症治疗的一种策略。[1]
BX-517 是从高通量筛选的先导化合物（化合物 1）中优化而来。关键的优化是在吲哚啉酮核心的 5 位引入脲基取代基，该取代基可直接与 PDK1 ATP 结合口袋中的 Lys111 和 Thr222 形成氢键，与之前的类似物（如 5-羟基化合物 (2a)）相比，显著提高了效力和选择性。 [1] BX-517 与 PDK1 结合的 X 射线共晶体结构（PDB：2PE1）证实了其结合模式：吲哚啉酮核心与铰链区（Ser160 和 Ala162 的主链）形成三个氢键，5-脲基与 Lys111 和 Thr222 的侧链形成直接氢键。[1] |
| 分子式 |
C15H14N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
282.29700
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| 精确质量 |
282.112
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| 元素分析 |
C, 63.82; H, 5.00; N, 19.85; O, 11.33
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| CAS号 |
850717-64-5
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| 相关CAS号 |
850717-64-5
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| PubChem CID |
11161844
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| LogP |
3.299
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| tPSA |
100.01
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
21
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| 分子复杂度/Complexity |
488
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(NC1C=C2C(NC(C2=C(C)C2NC=CC=2)=O)=CC=1)N
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| InChi Key |
DFURSNCTQGJRRX-JYRVWZFOSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H14N4O2/c1-8(11-3-2-6-17-11)13-10-7-9(18-15(16)21)4-5-12(10)19-14(13)20/h2-7,17H,1H3,(H,19,20)(H3,16,18,21)/b13-8-
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| 化学名 |
[(3Z)-2-oxo-3-[1-(1H-pyrrol-2-yl)ethylidene]-1H-indol-5-yl]urea
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| 别名 |
BX-517; BX 517; BX517; PDK1 inhibitor2; PDK1 inhibitor 2; PDK1 inhibitor-2
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 27~56 mg/mL (95.6~198.4 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.86 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.5423 mL | 17.7117 mL | 35.4233 mL | |
| 5 mM | 0.7085 mL | 3.5423 mL | 7.0847 mL | |
| 10 mM | 0.3542 mL | 1.7712 mL | 3.5423 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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