| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Binds directly to the DNA-binding domain of p53 (Kd = 60 ± 20 nM), near Ser240 and Ser241, disrupting the p53-MDM2 interaction and preventing p53 ubiquitination and degradation. [1]
- Upregulates Btf (Bcl-2-associated transcription factor), which represses MDM2 transcription and modulates p53, BAX, and Bcl-2 pathways. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
- C16-神经酰胺（水溶性吡啶鎓衍生物PC16，1–5 μM）在A549、HCT116和HepG2细胞中诱导p53剂量依赖性升高、核转位以及下游靶点p21和PUMA的激活。 [1]
- 纯化的重组p53在pull-down实验中结合生物素化的C16-神经酰胺。荧光滴定显示高亲和力结合，Kd = 60 ± 20 nM。PC6（C6-吡啶鎓神经酰胺）不结合。 [1] - 膜结合实验显示p53强烈偏好C16-神经酰胺，而非其他酰基链长度（C12、C18、C20、C22、C24）、C16-二氢神经酰胺或PC6。 [1] - 光活化神经酰胺（PAC）共价修饰p53的Ser240和Ser241（AScore 1000）。在这些残基引入大侧链的突变（S240K、S241K、S241E）消除神经酰胺结合；S240E或S241A不消除。 [1] - 神经酰胺结合增加了p53 DNA结合域的热稳定性（Tm从41.6°C升高至43.2°C）。 [1] - PC16（5 μM）在活PC-3细胞中破坏p53-MDM2复合物（双分子荧光互补实验），效果与Nutlin 3（50 μM）相似。ELISA显示PC16（0–100 nM）浓度依赖性破坏p53-MDM2相互作用。 [1] - PC16（60–100 nM）在体外泛素化实验中阻止p53泛素化，效果与Nutlin 3（80 nM）相当。 [1] - 在HCT116细胞中，C16-神经酰胺（12 μM，6 h）以时间和浓度依赖性方式降低细胞活力（6 h时约60%存活）。通过PARP切割、pro-caspase 3减少以及Annexin V/PI染色证实凋亡。 [2] - 2D-DIGE蛋白质组学鉴定出C16-神经酰胺处理（12 μM，6 h）后51个差异表达蛋白，包括Btf上调（1.24–1.85倍）和prohibitin上调（1.48倍），以及stratifin下调（2.77倍）和stathmin下调（1.11倍）。Western blot证实了这些变化。 [2] - C16-神经酰胺（12 μM）增加p53表达（15–30分钟内），上调BAX，降低Mdm2和磷酸化Bcl-2水平。 [2] - Btf过表达（GFP-Btf转染）使细胞活力降低约20%，增加p53和BAX，降低磷酸化Bcl-2。Btf敲低（siRNA）增加细胞对神经酰胺诱导的死亡的抵抗力，并使caspase 3/7活性降低高达60%。 [2] - C16-神经酰胺降低MDM2启动子活性（6 h时约40%）和Mdm2蛋白水平（1.85倍降低）。Btf过表达也降低MDM2启动子活性（约40%）和Mdm2蛋白（1.30倍）。Btf沉默增加神经酰胺处理后MDM2启动子活性。 [2] P53 和 C16-神经酰胺在后者的核心结构域内相互作用。在细胞中，p53 与天然 C16-神经酰胺结合形成复合物 [1]。 C16-神经酰胺（2.5–50 μM；0-48 小时）以浓度和时间依赖性方式显着降低 HCT116 细胞活力 [2]。 Btf（Bcl-2 相关转录因子）是 C16-神经酰胺（12 μM；48 小时）引起 HCT116 细胞凋亡的机制 [2]。 p53 和 BAX 表达通过 C16-神经酰胺（12 μM；0-6 小时）和 Btf 表达上调。 C16-神经酰胺通过 Btf 抑制 Mdm2 的表达 [2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 所提供的文本中未报告C16-神经酰胺的直接体内数据。但细胞中CerS6（神经酰胺合酶6）的表达升高了内源性C16-神经酰胺并激活了p53。 [1]
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| 酶活实验 |
- 荧光淬灭：记录纯化的p53核心结构域（1.0 μM）的稳态荧光光谱，激发波长270 nm。用递增浓度的PC16或PC6（10–2000 nM）测量荧光淬灭。通过304 nm发射的非线性拟合确定Kd值。 [1]
- 膜结合实验：将神经酰胺（0.5–4 μg）点样在PVDF膜上，用3% BSA封闭，与纯化的p53或细胞裂解液在4°C孵育过夜，用p53特异性抗体检测结合的p53。 [1] - 热迁移实验：将p53 DBD（100–300 aa）与或不与PAC孵育，测量熔解温度（Tm）。 [1] - 体外泛素化实验：反应体系包含p53、E1、E2、MDM2、Mg²⁺-ATP和泛素，存在或不存在PC16（60、80、100 nM）或Nutlin 3（80 nM），在37°C孵育1小时，然后通过SDS-PAGE/WB分析。 [1] - 夹心ELISA：用p53多克隆抗体包被96孔板，与含或不含PC16或Nutlin 3的p53/MDM2混合物孵育。用MDM2单克隆抗体和HRP标记的二抗检测结合的复合物。 [1] - 鞘脂的LC-MS/MS分析：用异丙醇/水/乙酸乙酯（30:10:60）进行脂质提取。样品归一化至蛋白水平或脂质磷酸盐水平。 [1] - 2D-DIGE：来自对照和C16-神经酰胺处理细胞（12 μM，6 h）的蛋白质（25 μg）用Cy3/Cy5标记，与Cy2标记的内标混合，在pH 3–10 NL IPG胶条和12%丙烯酰胺凝胶上分离，扫描并用DeCyder软件分析。 [2] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[2]
细胞类型： HCT116 细胞 测试浓度： 2.5、5、10、12、20、50 µM 孵育持续时间：0-48小时 实验结果：细胞活力以时间和浓度依赖性方式急剧下降。 蛋白质印迹分析[2] 细胞类型： HCT116 细胞 测试浓度： 12 μM 孵育时间： 1、3 和 6 小时 实验结果： PARP 裂解增加，pro-caspase 3 减少。stratifin 和 stathmin 水平减少，抑制素和 btw 增加。治疗后，RNAi 介导的 Btf 耗竭也部分抑制了 BAX 表达。荧光素酶活性和 Mdm2 蛋白表达水平显着降低。 - 细胞活力（MTS实验）：HCT116细胞接种于96孔板，用C16-神经酰胺（2.5–50 μM，1.5–48 h）处理，加入MTS/PMS在37°C孵育2小时。在492 nm处测量吸光度。 [2] - 凋亡检测（Annexin V/PI）：细胞用Annexin V-FLUOS和碘化丙啶染色15分钟，通过共聚焦显微镜观察。 [2] - Western blotting：细胞用1% SDS或RIPA缓冲液裂解，经SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗p53、PARP、caspase-3、Btf、Mdm2、BAX、磷酸化Bcl-2、stratifin、stathmin、prohibitin和α-tubulin的抗体进行检测。 [1][2] - 双分子荧光互补（BiFC）：共转染p53-V1和MDM2-V2的PC-3细胞用PC16（5 μM）或Nutlin 3（50 μM）处理18小时，对荧光进行成像。 [1] - siRNA沉默：使用特异性siRNA沉默CerS6或p53；使用乱序siRNA作为对照。使用ON-TARGETplus SMARTpool siRNA沉默Btf。使用脂质体进行转染。 [1][2] - 瞬时转染和荧光素酶实验：用MDM2-LUC或TP53-LUC报告基因构建体和GFP-Btf表达载体转染HCT116细胞。转染后24小时测量荧光素酶活性，并归一化至蛋白浓度。 [2] - Caspase 3/7实验：转染GFP siRNA或Btf siRNA的细胞用C16-神经酰胺处理，使用发光法Caspase-Glo 3/7试剂盒测量caspase 3/7活性。 [2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-十六烷酰鞘氨醇是一种N-酰基鞘氨醇，其中神经酰胺的N-酰基被指定为十六烷酰基（棕榈酰基）。它作为生殖支原体和人血清的代谢产物发挥作用。它是一种N-酰基鞘氨醇、Cer(d34:1)和N-棕榈酰鞘氨醇碱。它在功能上与十六烷酸相关。
已有报道称，在朱氏锥虫和布氏锥虫中发现了N-棕榈酰鞘氨醇，并有相关数据。 |
| 分子式 |
C34H67NO3
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|---|---|
| 分子量 |
537.900691270828
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| 精确质量 |
537.512
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| CAS号 |
24696-26-2
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| 相关CAS号 |
C16-Ceramide-d31;852043-41-5;C16-Ceramide-13C16;C16-Ceramide-d9;2260669-51-8
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| PubChem CID |
5283564
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
0.919g/cm3
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| 沸点 |
675.396ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
94-95ºC
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| 闪点 |
362.267ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.48
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| LogP |
9.953
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| tPSA |
69.56
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
30
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
508
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@@H](/C=C/CCCCCCCCCCCCC)O
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| InChi Key |
YDNKGFDKKRUKPY-TURZORIXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C34H67NO3/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-33(37)32(31-36)35-34(38)30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-8-6-4-2/h27,29,32-33,36-37H,3-26,28,30-31H2,1-2H3,(H,35,38)/b29-27+/t32-,33+/m0/s1
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| 化学名 |
N-[(E,2S,3R)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]hexadecanamide
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| 别名 |
C16 Ceramide; C16-ceramide; DTXSID301317974; RefChem:573083; ...; 24696-26-2;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Ethanol : ~20 mg/mL (~37.18 mM; warming and heat to 60°C)
DMSO: < 1 mg/mL DMF : 20 mg/mL (~37.18 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (3.72 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL 澄清 EtOH + 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8591 mL | 9.2954 mL | 18.5908 mL | |
| 5 mM | 0.3718 mL | 1.8591 mL | 3.7182 mL | |
| 10 mM | 0.1859 mL | 0.9295 mL | 1.8591 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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