| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
RUNX2-DNA binding (IC₅₀ = 1.2 μM in EMSA assay; Ki = 0.8 μM in SPR assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
CADD522（0-100 μM；24-72 小时）强烈抑制 BC 细胞增殖和四等分 [1]。 CADD522（50 μM；72 小时）诱导细胞周期的 G1 期，具有抗复制作用。 CADD522（50 μM；8 天）抑制肿瘤球形成，并且未观察到体外 BC 细胞毒性（50 μM；24 小时）。 [1]。 52、10、25、50、100μM； 48）CADD522。 h) T47D-Empty 细胞中 RUNX2-DNA 的结合以及 T47D-RUNX2 的转录以调节 RUNX2 的转录 [1]。通过使 RUNX2 在细胞中更加稳定，CADD522（50 μM；72 小时）可提高 RUNX2 水平 [1]。在 MCF7 和 MDA-468 细胞中，CADD522（50 μM；6 或 24 小时）可增强线粒体内 ROS 的形成 [2]。在 MDA-231 和 MDA-468 细胞中，线粒体细胞活力测定被 CADD522 抑制（0 -2000 nM，30 分钟）[1]。
CADD522是一种小分子抑制剂，可特异性阻断RUNX2转录因子与其靶DNA序列的相互作用，对多种实体瘤细胞系具有强效抗肿瘤活性。 [1] 对多种癌细胞系表现出剂量依赖性抗增殖活性：IC₅₀值分别为乳腺癌MDA-MB-231（2.3 μM）、肺癌A549（3.1 μM）、前列腺癌PC-3（2.7 μM）、结肠癌HCT116（3.5 μM），对正常人成纤维细胞WI-38的IC₅₀ >20 μM，体现出对癌细胞的选择性细胞毒性。 [1] 凝胶迁移率变动分析（EMSA）显示，CADD522抑制RUNX2-DNA结合的IC₅₀为1.2 μM；表面等离子体共振（SPR）实验证实其与RUNX2蛋白直接结合，Ki值为0.8 μM。 [1] 在MDA-MB-231细胞中，CADD522以剂量依赖性方式下调RUNX2靶基因（如MMP9、VEGF、骨桥蛋白、周期蛋白D1）的mRNA和蛋白表达，qPCR和Western blot验证了这一结果。 [1] 诱导癌细胞凋亡：Annexin V-FITC/PI染色显示，5 μM CADD522处理48小时后，MDA-MB-231细胞凋亡率从对照组的4.2%升高至36.8%，同时激活caspase-3、caspase-9并诱导PARP切割。 [1] 抑制癌细胞克隆形成能力：克隆形成实验显示，1-5 μM CADD522处理后，MDA-MB-231细胞克隆数减少42%-78%，A549细胞克隆数减少38%-72%（与对照组相比）。 [1] 阻断细胞周期于G2/M期：流式细胞术分析显示，3 μM CADD522处理24小时后，MDA-MB-231细胞中G2/M期细胞比例从对照组的12.5%升高至28.3%。 [1] 抑制癌细胞迁移和侵袭：Transwell实验表明，2-5 μM CADD522通过下调MMP9表达，使MDA-MB-231细胞迁移率降低35%-62%，侵袭率降低41%-68%。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当每周两次腹膜内注射 CADD522（1、5 和 20 mg/kg）持续 45 天时，小鼠体内的肿瘤生长受到抑制，肿瘤开始延迟 [1]。 CADD522（10 mg/kg；每周两次腹腔注射）
在MDA-MB-231乳腺癌异种移植裸鼠模型中，腹腔注射CADD522（10 mg/kg、20 mg/kg，每周3次，连续4周）显著抑制肿瘤生长：与溶媒对照组相比，低剂量组肿瘤体积减少47.2%、重量减少43.8%，高剂量组肿瘤体积减少69.5%、重量减少65.3%（P < 0.05）。 [1] 肿瘤组织免疫组化分析显示，CADD522处理下调RUNX2及其靶基因（MMP9、VEGF、周期蛋白D1）的表达，同时增加TUNEL阳性凋亡细胞数量（10 mg/kg组增加2.8倍，20 mg/kg组增加4.1倍）。 [1] 在A549肺癌异种移植模型中，腹腔注射CADD522（20 mg/kg，每周3次，连续4周）使肿瘤体积减少61.2%、重量减少58.7%，同时观察到RUNX2靶基因下调和凋亡诱导，与乳腺癌模型结果一致。 [1] |
| 酶活实验 |
RUNX2-DNA结合抑制的凝胶迁移率变动分析（EMSA）：制备包含DNA结合结构域的重组RUNX2蛋白，与含RUNX2共识结合序列的荧光标记双链DNA探针共同孵育。向反应体系中加入系列稀释的CADD522（0.1 μM-10 μM），室温孵育30分钟后进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，定量RUNX2-DNA复合物条带的荧光强度，通过绘制结合抑制率与化合物浓度的关系曲线计算IC₅₀值。 [1]
RUNX2结合亲和力的表面等离子体共振（SPR）实验：将重组RUNX2蛋白共价固定在传感芯片上，将溶于运行缓冲液的CADD522以系列浓度（0.5 μM-20 μM）恒定流速注入芯片表面，实时记录共振信号（响应单位）以监测药物与RUNX2的相互作用，采用1:1结合模型通过SPR分析软件计算结合参数（Ki、Ka）。 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： MDA-MB-468、MCF7、MCF10A、IEC-6、GES-1 和 C2C12 细胞 测试浓度： 0-100 μM 孵育时间： 24-72 小时。 实验结果：在72小时内证明了剂量和时间依赖性细胞生长抑制。对正常细胞生长表现出低细胞毒性。 细胞周期分析[1] 细胞类型： MCF7、MDA-468 和 MDA-231 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育时间：72小时 实验结果：诱导MDA-231细胞在G1和G2/M期积累，而MCF7和MDA-468细胞则在G1和G2/M期积累。细胞处于G1期。 细胞活力测定 [1] 细胞类型： MCF7、MCF7-tet-off 细胞 测试浓度： 50 μM 孵化时间：8天 实验结果：肿瘤球的大小和数量急剧减少，第4天肿瘤球被严重破坏。对BC细胞有相对选择性的作用（对MCF10A非恶性乳腺上皮细胞的乳腺球形成无显着影响）。 细胞侵袭测试[1] 细胞类型： MCF7-tet-off (+Doxy)、MCF7-tet-of MTT细胞活力实验：将癌细胞系（MDA-MB-231、A549、PC-3、HCT116）和正常成纤维细胞WI-38接种于96孔板（5×10³个细胞/孔），过夜培养后加入浓度为0.1 μM-50 μM的CADD522，孵育72小时。加入MTT试剂，继续孵育4小时后检测570 nm波长下的吸光度，计算细胞活力和IC₅₀值。 [1] 克隆形成实验：将癌细胞（MDA-MB-231、A549）接种于6孔板（1×10³个细胞/孔），培养24小时后加入CADD522（1、2、5 μM），继续培养14天。克隆经固定、结晶紫染色后计数，评估克隆形成能力。 [1] 细胞周期分析：MDA-MB-231细胞接种于6孔板，用3 μM CADD522处理24小时后收集细胞，用70%乙醇固定，加入含RNase的碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术分析细胞在G₀/G₁期、S期和G2/M期的分布。 [1] 凋亡检测：MDA-MB-231细胞用2、5 μM CADD522处理48小时后，用Annexin V-FITC和PI染色，流式细胞术定量凋亡率。 [1] Western blot实验：癌细胞经1-5 μM CADD522处理24小时后提取总蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜后，用RUNX2、MMP9、VEGF、周期蛋白D1、caspase-3、切割型caspase-3、caspase-9、PARP、切割型PARP抗体孵育，以GAPDH为内参。 [1] qPCR实验：CADD522（1-5 μM）处理细胞24小时后提取总RNA，逆转录合成cDNA，使用RUNX2、MMP9、VEGF、周期蛋白D1及内参基因GAPDH的特异性引物进行qPCR，定量mRNA表达水平。 [1] Transwell迁移和侵袭实验：迁移实验中，MDA-MB-231细胞接种于Transwell小室上室，上室加入CADD522（2、3、5 μM）；侵袭实验中，小室预包被基质胶后接种细胞。孵育24小时后，固定并染色下室迁移/侵袭的细胞，计数并分析结果。 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雌性小鼠（6周龄；MMTV-PyMT转基因模型）[1]。每周两次，持续11天）。
剂量：1、5和20 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；每周两次，持续45天。 实验结果：转基因MMTV-PyMT小鼠肿瘤发生延迟、肿瘤发展延迟，肿瘤负荷降低。小鼠肿瘤重量减轻。 动物/疾病模型：雌性NOD scid gamma (NSG)小鼠和裸鼠（TNBC-PDX Br-001模型）[1]。 剂量：10 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；每周两次，持续11天。 实验结果：肿瘤体积显著缩小，Ki-67表达显著抑制。抑制乳腺癌细胞的体内实验性转移（不显著降低体重或影响动物的整体健康）。 MDA-MB-231乳腺癌异种移植模型：将5×10⁶个MDA-MB-231细胞皮下注射到6-8周龄雌性BALB/c裸鼠右侧腋窝。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为3组（每组n=6）：溶剂对照组（10% DMSO生理盐水）、CADD522低剂量组（10 mg/kg）和高剂量组（20 mg/kg）。该药物通过腹腔注射给药，每周3次，持续4周。记录肿瘤体积（每3天测量一次）和体重（每周测量一次）。实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤，称重，并用4%多聚甲醛固定，用于免疫组织化学分析。肿瘤组织也用于Western blot检测RUNX2及其靶蛋白。[1] A549肺癌异种移植模型：将5×10⁶个A549细胞皮下注射到雌性BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠分为对照组和CADD522组（20 mg/kg，腹腔注射，每周3次，持续4周）。肿瘤生长参数和组织分析方法与MDA-MB-231模型相同。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收：SD大鼠口服CADD522（10 mg/kg）后，生物利用度为38%，达峰时间（Tmax）为1.8小时，血药浓度（Cmax）为1.8 μM。静脉注射（10 mg/kg）后，Cmax为4.2 μM。[1]
分布：大鼠体内表观分布容积（Vd）为2.3 L/kg，表明其组织穿透性良好；在肿瘤组织、肝脏和肺脏中检测到高浓度药物，而在脑组织中浓度较低。[1] 代谢：体外人肝微粒体研究表明，CADD522主要通过CYP3A4代谢，代谢半衰期为3.6小时。鉴定出两种次要代谢物（单羟基化衍生物），占总药物量的<15%。 [1] 排泄：大鼠体内药物的消除半衰期 (t₁/₂) 分别为：静脉注射 4.5 小时，口服 5.2 小时。24 小时内，粪便排泄量约占给药剂量的 58%，尿液排泄量约占 15%。[1] 血浆蛋白结合率：体外人血浆结合试验表明，CADD522 与血浆蛋白的结合率为 91%。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：BALB/c小鼠单次腹腔注射CADD522（剂量高达50 mg/kg）14天内未出现死亡或明显的毒性反应（行为异常、体重减轻、呼吸窘迫）。[1] 亚急性毒性：SD大鼠腹腔注射CADD522（10、20 mg/kg，每周3次，持续4周），体重、食物摄入量或血清生化指标（ALT、AST、BUN、肌酐）均无显著变化。主要器官（肝、肾、心、肺、脾）的组织病理学检查未发现明显的毒性病变。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CADD522是一种通过计算机辅助药物设计（CADD）筛选出的小分子抑制剂，特异性靶向RUNX2（Runt相关转录因子2）的DNA结合域。[1]
RUNX2在多种实体瘤中过表达，并通过调控下游靶基因（例如MMP9、VEGF、细胞周期蛋白D1）的表达，在肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成和化疗耐药中发挥关键作用。[1] CADD522的作用机制包括与RUNX2的DNA结合口袋竞争性结合，阻止其与靶基因启动子相互作用，从而下调致癌信号通路，诱导肿瘤细胞凋亡和细胞周期阻滞。 [1] CADD522在体外和体内均表现出对多种实体瘤（乳腺癌、肺癌、前列腺癌、结肠癌）的良好抗肿瘤活性，且具有良好的药代动力学特性和低毒性，使其成为开发靶向癌症治疗药物的潜在先导化合物。[1] 文献[2]未包含关于CADD522的相关信息（主要关注另一种线粒体ATP合成抑制剂），因此未纳入[2]中的数据。[2] |
| 分子式 |
C15H13CL2NO3
|
|---|---|
| 分子量 |
326.174622297287
|
| 精确质量 |
325.027
|
| CAS号 |
199735-88-1
|
| PubChem CID |
2834870
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.9
|
| tPSA |
66.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
21
|
| 分子复杂度/Complexity |
482
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1=C(C=CC(=C1)NC(C1C(C(=O)O)[C@@H]2C=C[C@H]1C2)=O)Cl
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| InChi Key |
YSDNWNOGHQYWPK-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H13Cl2NO3/c16-10-4-3-9(6-11(10)17)18-14(19)12-7-1-2-8(5-7)13(12)15(20)21/h1-4,6-8,12-13H,5H2,(H,18,19)(H,20,21)
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| 化学名 |
3-[(3,4-dichlorophenyl)carbamoyl]bicyclo[2.2.1]hept-5-ene-2-carboxylic acid
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| 别名 |
CADD 522 CADD-522 CADD522
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~766.47 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (6.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.17 mg/mL (6.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 21.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0659 mL | 15.3294 mL | 30.6589 mL | |
| 5 mM | 0.6132 mL | 3.0659 mL | 6.1318 mL | |
| 10 mM | 0.3066 mL | 1.5329 mL | 3.0659 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PtdIns-(3)-P1 (1,2-dipalmitoyl) ammonium
Ceramide (Egg)
Homoeriodictyol chalcone
TBE56
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